Çin bitkisel ilacı Lobelia chinensis Lour'un farklı kökenlerinin HPLC parmak izi ve içerik belirlemeye dayalı kalite değerlendirmesi üzerine araştırma. Lobelia chinensis Lour. Campanulaceae familyasından kurutulmuş bütün bir bitkidir ve ısıyı temizleme ve detoksifiye etme, diürez ve şişliği azaltma etkilerine sahiptir. Esas olarak Henan, Anhui, Jiangxi, Guizhou ve diğer yerlerde üretilir ve klinik uygulamada yaygın olarak kullanılan bir anti-kanser Çin ilacıdır. Modern kimyasal bileşim ve farmakolojik çalışmalar, yarım lotusun anti-kanser, mikrosirkülasyon iyileştirme, ağrı kesici ve anti-inflamatuar, antioksidan, kan sistemi hasarının önlenmesi ve düzeltilmesi ve alfa glukozidaz inhibisyonu gibi çeşitli farmakolojik aktivitelere sahip flavonoidler, fenilpropanoidler, alkaloidler vb. gibi çeşitli etkili bileşenler içerdiğini göstermiştir. Çin Farmakopesi'nin 2020 baskısında Scutellaria barbata'nın ana kalite kontrol göstergeleri ince tabaka tanımlama ve ekstraksiyon belirlemedir, bu da Scutellaria barbata'nın kalite kontrolünün hala eksik olduğunu ve Scutellaria barbata kaynaklarının daha da geliştirilmesini ve kullanılmasını engellediğini göstermektedir. Parmak izi/özellik haritası, geleneksel Çin tıbbının kalite kontrolü için yaygın olarak kullanılan bir yöntemdir ve kapsamlı bir şekilde incelenmiştir. Bununla birlikte, yarım nilüferin parmak izi/özellik haritası üzerine hala sınırlı araştırma vardır ve farklı üretim alanlarından yarım nilüfer tıbbi malzemelerinin kalite değerlendirmesine ilişkin herhangi bir rapor bulunmamaktadır. Bu çalışma, parmak izi spektrumu ve içerik belirlemeyi birleştirmekte ve kemometrik analiz yoluyla farklı üretim alanlarından elde edilen Çin tıbbının kalitesini değerlendirerek kalite kontrolü için referans ve Çin tıbbı kaynaklarının seçimi ve daha da geliştirilmesi için bir temel sağlamaktadır.
Parmak izi spektrumunun oluşturulması. Banbianlian şifalı bitkisinin parmak izi spektrumunun oluşturulması üç mobil faz sistemi kullanılarak araştırılmıştır: metanol-0.1% fosforik asit çözeltisi, asetonitril-0.1% fosforik asit çözeltisi ve asetonitril-0.1mol/L potasyum dihidrojen fosfat çözeltisi. Sonuçlar, asetonitril-0.1mol/L potasyum dihidrojen fosfat çözeltisinin kullanılmasının daha fazla kromatografik pik bilgisi ve daha iyi ayırma verimliliği ile sonuçlandığını göstermiştir. Bir diyot dizi dedektörü kullanılarak 190-400nm aralığında tam dalga boyu taraması yapılmış ve karşılaştırma için farklı dalga boylarında parmak izi spektrumları çıkarılmıştır. Sonuçlar 340nm'de parmak izi spektrumunun kromatografik pik bilgisinin büyük ve genel pik şeklinin yüksek olduğunu göstermiştir. Test çözeltisinin hazırlanma yöntemi, "parmak izi spektrumundaki ortak piklerin toplam pik alanı/örnek ağırlığı" indeksi ile tek faktör analizi kullanılarak incelenmiştir. Ekstraksiyon çözücüsü, ekstraksiyon yöntemi, ekstraksiyon süresi ve ekstraksiyon çözücüsü dozajının parmak izi spektrumu üzerindeki etkilerine odaklanılmış ve en uygun numune hazırlama yöntemi seçilmiştir. Parmak izi spektrumu temel olarak Çin şifalı bitkisinin içsel kalite bilgisini yansıtır. Ortak pikleri tanımlamak için yüksek çözünürlüklü kütle spektrometresi ve bilinmeyen bileşenleri tahmin etmek için mzCloud kütle spektrometresi veritabanı kullanılarak, referans standartların alıkonma süresinin karşılaştırılması ve 3D spektral analiz ile birlikte, tanımlanan bileşikler doğrulandı. Şu anda 4 bileşik doğrulanmıştır ve referans standartların elde edilmesindeki zorluk nedeniyle hala daha fazla onaylanması gereken 4 bileşen vardır.
Benzerlik değerlendirmesi ve kemometrik analiz. Farklı üretim alanlarından gelen yarım lotus tıbbi materyallerinin parmak izi spektrumlarının genel benzerliği, 0,9'un üzerindeki benzerlik değerleri ile nispeten yüksektir. Bununla birlikte, benzerlik değerleri aralığında küçük farklılıklar vardır. HCA ve PCA, 18 parti numuneyi iki kategoriye ayırarak farklı üretim alanlarından gelen numunelerin hem benzerliğe hem de belirli üretim özelliklerine sahip olduğunu kanıtlamıştır. OPLS-DA diferansiyel bileşenleri analiz etmiş ve VIP değerleri Pik 2>Pik 1 (luteolin 7-diglucoside)>Pik 10 (diosmin)>Pik 11 (magnolol)>Pik 3>Pik 8>Pik 5 şeklinde sıralanan 7 diferansiyel belirteç bulmuştur. Çin şifalı otlarının 18 partisinin parmak izi spektrumlarındaki yedi ortak pikin pik alanları karşılaştırıldığında, sonuçlar Henan ve Anhui üretim bölgelerinden gelen Çin şifalı otlarındaki yedi ortak pikin pik alanlarının diğer üretim bölgelerinden gelenlerden daha yüksek olduğunu göstermiştir, bu da Henan ve Anhui'den gelen Çin şifalı otlarındaki yedi bileşenin içeriğinin nispeten yüksek olduğunu göstermektedir. Bütün ot geleneksel Çin tıbbının kalitesi, farklı üretim alanlarındaki farklı hasat zamanlarından ve işleme yöntemlerinden büyük ölçüde etkilenmektedir. Bu nedenle, farklı büyüme dönemlerinde tam ot geleneksel Çin tıbbının etken maddelerindeki değişikliklere dayanarak uygun hasat dönemi seçilmeli ve tıbbi malzemelerin kalitesini sağlamak için etken maddelerin özelliklerine göre makul üretim alanı işleme yapılmalıdır.
İçerik belirleme göstergelerinin seçimi. Xiangyemu glikozidi ve Buju glikozidi olarak da bilinen Diosimin, venöz gerilimi arttırmak, mikrosirkülasyonu iyileştirmek ve ödemi azaltmak gibi farmakolojik etkilere sahiptir. Menghua glikozit, çeşitli tümör hücrelerinin çoğalmasını inhibe edebilen ve apoptozlarını indükleyebilen antibakteriyel, anti-enflamatuar ve antioksidan aktivitelere sahiptir. Karaciğer ve böbrek gibi organlar üzerinde koruyucu etkisi vardır. Bu bileşenlerin her ikisi de Banbianlian'ın ana aktif bileşenlerinden biridir, Banbianlian tıbbi materyallerinde yüksek içeriğe sahiptir ve referans standartlarına kolay erişim sağlar. Belirli bir özgüllüğe sahiptirler ve farklı üretim alanlarından gelen tıbbi malzemeler için ayırt edici belirteçlerdir. Bu nedenle, yukarıdaki bileşenlerin içerik belirleme göstergeleri olarak seçilmesi, Banbianlian tıbbi malzemelerinin kalitesini etkili bir şekilde değerlendirebilir. Zeng ve diğerlerinin araştırma sonuçlarına dayanarak, diosmin ve paeoniflorin tayini gerçekleştirilmiş ve test çözeltisinin kromatografik koşulları ve hazırlama yöntemleri optimize edilmiş ve taranmıştır. Diosmin dimetil sülfoksit ve güçlü alkali çözeltilerde kolayca çözünür, suda çözünmez ve metanol veya etanolde az çözünür. Bu nedenle, ekstraksiyon çözücüsü araştırıldıktan sonra, diosmin'in tam ekstraksiyonunu sağlamak için ekstraksiyon çözücüsü olarak "evrensel çözücü" dimetil sülfoksit seçilmiştir. Metodolojik olarak doğrulanan bu yöntem iyi bir özgüllüğe, tekrarlanabilirliğe ve doğruluğa sahiptir ve yarım lotus tıbbi malzemeleri için Çin Farmakopesi kapsamında kalite standartlarının iyileştirilmesi için önemli bir referans sağlayabilir. Henan ve Anhui eyaletlerindeki tıbbi malzemelerdeki diosmin ve paeoniflorin içeriği, 18 parti tıbbi malzemenin tespit sonuçlarına göre genellikle diğer üretim alanlarından daha yüksektir ve Henan ve Anhui eyaletlerindeki tıbbi malzemelerin genel kalitesinin diğer üretim alanlarından daha iyi olduğunu kanıtlayarak Henan ve Anhui eyaletlerindeki tıbbi malzeme kaynaklarının seçimi ve daha da geliştirilmesi için bir temel oluşturmaktadır.