Verbena officinalis şifalı bitkisi için UPLC parmak izi spektrumunun oluşturulması ve indikatör bileşenlerin belirlenmesi
Verbenaceae familyasından bir bitki olan Verbena officinalis L. bitkisinin kurutulmuş toprak üstü kısmıdır. Kan dolaşımını teşvik etme, kan stazını dağıtma, detoksifikasyon, diürez, sararmayı azaltma ve sıtmayı önleme etkilerine sahiptir. Kimyasal bileşim çalışmaları, mine çiçeğinin uçucu yağlar, iridoidler, fenilpropanoidler, flavonoidler ve anti-enflamatuar, antioksidan, analjezik, öksürük ve astım giderici, anti miyokardiyal iskemi ve serebral iskemi gibi çeşitli farmakolojik aktivitelere sahip diğer bileşenleri içerdiğini göstermiştir. Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'nin 2020 baskısı, Birinci Bölüm, mine çiçeğinin tıbbi bitkisi için içerik göstergeleri olarak oleanolik asit ve ursolik asit kullanır, ancak spesifikliği güçlü değildir. Dahası, geleneksel Çin tıbbında geleneksel dekoksiyonlar kullanılmakta ve oleanolik asit ve ursolik asit gibi lipofilik bileşenler içerik göstergeleri olarak kullanılmaktadır. Bunun şifalı bitkilerin kalite kontrolüne yardımcı olup olmadığı tartışmaya değerdir. Verbascoside ve verbascoside gibi sikloheksen eter terpenoid glikozitlerin yanı sıra verbascoside'deki fenilpropanoid glikozit, verbascoside'in yüksek içeriğini ölçerek, verbascoside'in klinik etkinliğini sağlamak için belirli bir özgüllüğe ve pozitif öneme sahip olduğuna dair literatür raporları vardır. Yukarıdaki içerik göstergeleri verbascoside standart kaynatma ve formül granüllerinin kalite kontrol araştırmalarında kullanılmıştır. Parmak izi spektrumları da verbascoside'in kalite kontrolü için kullanılmıştır, ancak kimyasal bileşenlerin tanımlanması esas olarak verbascoside, verbascoside ve verbascoside üzerine odaklanmıştır. Suda çözünen diğer bileşenlerin çalışılmasına ilişkin herhangi bir rapor bulunmamaktadır. Bu çalışmada, mine çiçeği bitkisinin parmak izi spektrumunun oluşturulması ve yüksek çözünürlüklü kütle spektrometresi tanımlamasının yanı sıra dört aktif bileşen, yani verbascoside, verbascoside, verbascoside ve isoverbascoside için içerik belirleme yöntemlerinin oluşturulması, mine çiçeği bitkisinin genel kalite kontrolü için referans sağlamak amacıyla kullanılmıştır.

İçerik göstergelerinin seçimi. Literatür raporlarına ve önceki araştırmalarımıza göre, verbascoside belirli koşullar altında isoverbascoside'e dönüştürülebilir. Hem verbascoside hem de isoverbascoside antioksidan, anti hemolitik, anti anjiyotensinaz aktivitesi, kan basıncını düşürücü ve bağışıklık fonksiyonunu arttırıcı etkilere sahiptir. Bu da verbascoside ve isoverbascoside'in mine çiçeğinin kalite kontrolü ve değerlendirilmesi için büyük önem taşıdığını göstermektedir. Bu nedenle, mevcut araştırmalara dayanarak, şirketimiz mine çiçeği içeren Çin bitkisel preparatlarının kalite kontrolü için referans sağlamak amacıyla izoverbascoside tayinini artıracaktır. Kimyasal bileşim çalışmaları, hem verbascoside hem de verbascoside'in iridoid glikozitler olduğunu göstermiştir. 5-hidroksi verbascoside olarak da bilinen verbascoside, verbascoside ile karşılaştırıldığında karbon pozisyonu 5'te ek bir hidroksil grubuna sahiptir. İki bileşenin kimyasal yapıları benzerdir ve UV görünür 3D spektrumlarındaki absorpsiyon eğrileri temelde aynıdır. Bu nedenle, tespit için iki bileşenin birleştirilmesi ve iki bileşenin toplam miktarının hesaplanması önerilir. Bu çalışmada, aktif bileşenlerin içeriğini belirlemek için dört yöntem oluşturulmuştur. Test çözeltisinin hazırlanma yöntemi parmak izi spektrumu ile tutarlıydı, ancak kromatografik koşullar ayrı olarak oluşturuldu ve parmak izi spektrumu ile tutarlı değildi. Ana hususlar, indikatör bileşenlerinin ayrılma derecesi, saflığı ve yöntemin tekrar üretilebilirliğiydi. İçerik belirleme sonuçları, mine çiçeği bitkisinin farklı üretim alanlarında verbascoside, verbascoside, verbascoside ve isoverbascoside içeriğinde belirli farklılıklar olduğunu göstermiştir. Aynı üretim alanı içinde bile, farklı bitki partilerinin içeriğinde farklılıklar vardı ve bu farklılıklar temel olarak bitkilerin hasat zamanı, işleme yöntemleri, depolama yöntemleri ve depolama süresindeki farklılıklarla ilgiliydi. Buna ek olarak, şirketimiz araştırmamızda aynı mine çiçeği bitkisinin farklı tıbbi kısımlarında verbascoside, verbascoside, verbascoside ve isoverbascoside içeriğinde önemli farklılıklar olduğunu tespit etmiştir. Bunlar arasında, çiçek ve yapraklardaki verbascoside, verbascoside, verbascoside ve isoverbascoside içeriği, gövdelerdekinden önemli ölçüde daha yüksektir. Bu nedenle, şifalı bitkilerin hasat zamanının sıkı bir şekilde kontrol edilmesi ve bitkilerdeki çiçek ve yaprak oranının sağlanması, mine çiçeği şifalı bitkilerinin kalite kontrolü için büyük önem taşımaktadır.
Parmak izi spektrumları üzerine araştırma. Herba Verbena'nın parmak izi spektrumunu oluşturmak için UPLC yöntemi kullanılmıştır. Parmak izi spektrumunun kromatografik koşulları ve test çözeltisinin hazırlanma yöntemi sistematik olarak araştırılmıştır. Benzerlik hesaplama sonuçları, 15 parti tıbbi malzemenin parmak izi spektrumlarının benzerliğinin 0,9'un üzerinde olduğunu ve genel benzerliğin yüksek olduğunu ve bunun Herba Verbena'nın tanımlanması ve kalite kontrolü için kullanılabileceğini göstermiştir. Ortak pikleri tanımlamak için yüksek çözünürlüklü kütle spektrometresi kullanılarak, iridoid glikozitler, fenilpropanoid glikozitler ve flavonoidler olmak üzere üç tür aktif bileşen tanımlanmıştır. İlk kez, mine çiçeğindeki üç tür aktif bileşeni karakterize etmek için parmak izi spektrumları kullanıldı ve ilk kez, mine çiçeğinin parmak izi spektrumundan, mine çiçeğinin genel bütünlüğünü ve özelliklerini daha iyi yansıtan isoverbascoside, luteolin 7-diglucoside ve apigenin 7-O-glucuronide tanımlandı. Ortak piklerin göreceli pik alanını değişken olarak kullanan küme analizi ve temel bileşen analizi, 15 parti tıbbi malzemeyi üç kategoride sınıflandırmıştır. Bunlar arasında Henan, Jiangsu ve Guizhou'dan gelen tıbbi malzemeler benzer kimyasal bileşim oranlarına sahipti. OPLS-DA, pik oranlarında önemli farklılıklar gösteren yedi kromatografik pik bulmuştur; bunlar pik 2, 6, 16, 10, 11, 5 ve 9'dur. Bu farklılıklar, tıbbi malzemelerin hasat zamanı ve işleme yöntemlerindeki farklılıklarla ilgili olabilir.
Özetle, bu yöntem farklı kökenlerden gelen Çin şifalı bitkilerinin kalite farklılıklarını etkili bir şekilde analiz edebilir ve farklı kökenlerden gelen Çin şifalı bitkilerinin kalitesinin değerlendirilmesi için bir referans sağlayabilir.