ITS2 dizisi ve HPLC parmak izine dayalı olarak Ficus microcarpa ve ilgili türlerinin tanımlanması
Süt ağacı veya süt tohumu olarak da bilinen Ficus pandurata Hance, Moraceae familyasının Ficus cinsinde bir bitkidir. Başlıca Guangdong, Guangxi, Jiangxi, Hainan, Fujian, Hunan, Hubei, Jiangxi, Anhui, Zhejiang ve diğer yerlerde dağılım gösterir. "Geleneksel Çin Tıbbı Sözlüğü", "Fujian Tıbbi Kayıtları" ve "Jiangxi Halk Bitkisel Formül Testi "ne göre, Ficus microcarpa'nın kök ve yaprak kısımları ilaç olarak kullanılmaktadır. Hafif bir yapıya, tatlı ve hafif serin bir tada sahiptir ve toksik değildir. Isıyı temizleme, dalağı canlandırma, iştahı uyarma, qi'yi besleme ve sıvı üretme ve rutubet ve durgunluğu giderme etkilerine sahiptir. Rüzgarı ve rutubeti gidermek, detoks yapmak, sıtmayı tedavi etmek ve emzirmeyi teşvik etmek için kullanılır. Örneğin, "Jiangxi Halk Bitkisel Formül Testi", orta miktarda Ficus microcarpa kökleri ve Malan'ın, berrak su kaynağında ağızdan alındığında sarılık tedavisinde kullanılabileceğini; uygun miktarda banyan kökü, Brahma kökü, Stephania tetrandra, Acanthopanax senticosus kökü ve pelin otu sapının, Baijiu ve aynı hacimdeki su karışımı ile bel omurgası ağrısını tedavi etmek için kullanılabileceğini kaydetmektedir. Guangdong'da, Ficus microcarpa uzun bir yeme ve ilaç geçmişine ve yerel karakteristik Tonik Diyetin önemli bir parçası ve diyetetik tıbbın hammaddesi haline gelen derin bir kitle tabanına sahiptir. Modern araştırmalar Ficus microcarpa'nın triterpenoidler, flavonoidler, kumarinler ve fenolik asitler gibi aktif bileşenler içerdiğini göstermiştir. Bunlar arasında, bergamot laktonun anti-tümör, kan şekeri regülasyonu, uykusuzluğun iyileştirilmesi, osteoporozun önlenmesi ve tedavisi, yaşlanma karşıtı, anti-enflamatuar ve anti alerjik etkiler gibi çeşitli farmakolojik aktiviteleri vardır; Psoralen, anti osteoporoz, nöroproteksiyon, anti-tümör, östrojen benzeri, anti-enflamatuar vb. farmakolojik etkilere sahiptir; Her ikisi de anti osteoporoz etkilere sahiptir, bol miktarda ve kolayca temin edilebilir ve Ficus microcarpa'nın temsili aktif bileşenleridir.
Şu anda piyasada üç ana tip Ficus microcarpa şifalı bitki karışımı ürün bulunmaktadır: Ficus microcarpa var. holophylla, Ficus microcarpa var. angustifolia ve Ficus microcarpa var. hirta. Quanyuan Qinye Ficus ve Tiaoye Ficus, üçü arasında geçiş yaprak şekillerine sahip Qinye Ficus varyantlarıdır; Ayrıca hem Ficus microcarpa hem de Ficus microcarpa köklerini ilaç olarak kullanır ve sütlü bir aromaya sahiptir. Piyasada genellikle Süt Ağacı Kökleri ticari adı altında satılırlar ve bu da tıbbi malzemelerin kalitesinin eşit olmamasına neden olur. Şu anda, Ficus microcarpa üzerine yapılan modern araştırmalar esas olarak farmakognozi, kimyasal bileşim ve farmakolojik aktiviteye odaklanmaktadır ve Ficus microcarpa'nın kalite standartları hakkında herhangi bir rapor bulunmamaktadır. DNA barkod tanımlama, tür tanımlama için standart, nispeten kısa bir DNA dizisi kullanan bir moleküler biyoloji tanımlama yöntemidir. Bu yöntem, yeni Çin tıbbı kaynaklarının geliştirilmesi ve kullanımının teşvik edilmesi, Çin tıbbı tanımlama yeteneklerinin eksikliğinin giderilmesi, Çin tıbbı pazarlarının dolaşımının yönetilmesi ve morfolojinin üstesinden gelinmesi zor olan gizli tohum sorunlarının ele alınması açısından büyük önem taşımaktadır. HPLC parmak izi, madde gruplarının genel etkisinin anlaşılmasına dayanan kromatografik tekniklerle elde edilen geleneksel Çin tıbbı kimyasal bileşenlerinin orijinalliğini tanımlamak, kalite tutarlılığını ve stabilitesini değerlendirmek için güvenilir bir yöntemdir. Bu deneyde, ITS2 dizileri Ficus microcarpa ve ilgili türlerinin moleküler tanımlanması için kullanılmıştır. Psoralen ve bergamot lakton içeriğindeki farklılıkları belirlemek ve farklı kökenlerden gelen Ficus microcarpa ve ilgili türlerini tanımlamak için HPLC parmak izi spektrumları oluşturulmuştur. Bu, Ficus microcarpa tıbbi malzemelerinin kalite kontrolü ve değerlendirilmesi için bilimsel bir temel sağlamaktadır.

Deney, ITS2 dizisini, K2P genetik mesafesini, NJ ağaç kümeleme analizini ve Ficus microcarpa ve ilgili türlerinin ikincil yapısını analiz etmiştir. Hem NJ ağaç kümeleme analizi hem de ikincil yapı, Ficus microcarpa ve ilgili türlerini etkili bir şekilde ayırt edebilir. Bununla birlikte, K2P türleri içindeki ve arasındaki genetik mesafe, Ficus microcarpa ve ilgili türlerin tanımlanmasında belirli sınırlamalara sahiptir ve tanımlama için NJ ağaç kümeleme analizi ve ikincil yapının kombinasyonunu gerektirir.

Deneyde farklı ekstraksiyon çözücüleri, tespit dalga boyları, kolon sıcaklıkları, mobil faz sistemleri ve kromatografik kolonlar gibi kromatografik koşullar incelenmiştir. Sonuçlar, 95% etanol ekstraksiyonu, XBridge Peptide BEH C18 (5 μm, 4.6mm × 250mm) kromatografik kolon, tespit dalga boyu 330nm, kolon sıcaklığı 30 ℃, akış hızı 1.0mL/dak ve mobil faz metanol-pH8 fosfat tampon çözeltisi kullanılarak, her bir renk spektrumunun pik şekillerinin ve ayırma derecesinin iyi olduğunu göstermiştir. Ficus microcarpa ve ilgili türlerinin HPLC parmak izi spektrumlarını oluşturduk ve Ficus microcarpa'nın HPLC karakteristik spektrumları çalışmasındaki boşluğu doldurduk. Ficus microcarpa ve ilgili türlerinin parmak izi spektrumları, Ficus microcarpa'yı ilgili türlerinden sezgisel olarak ayırt edebilen ve Ficus microcarpa'nın kalite değerlendirmesine uygulanabilen karakteristik piklerin sayısı ve göreceli alıkonma süresinde önemli farklılıklar göstermektedir. Ficus microcarpa'da farklı kökenlerden gelen toplam 10 kromatografik pik vardır ve bunların çoğu Ficus microcarpa ve Ficus microcarpa'da tespit edilmemiştir. Yakın akraba türler ve Ficus microcarpa arasındaki benzerlik 0,807'den azdır; Ficus microcarpa ve ilgili türleri arasında psoralen ve bergamot lakton içeriğinde önemli bir fark vardır. Ficus microcarpa ve Ficus microcarpa'nın içeriği, Ficus microcarpa'nınkinden önemli ölçüde daha düşüktür ve bu da Ficus microcarpa ile ilgili türleri arasında bir kalite farkı olduğunu gösterir. Psoralen ve bergamot lakton içeriğinin Ficus microcarpa için kalite kontrol göstergeleri olarak kullanılması için önemli pratik rehberlik değerine sahiptir. Bu nedenle, parmak izi spektrumları, benzerlik ve içerik belirleme, Ficus microcarpa tıbbi malzemelerinin orijinalliğini objektif ve doğru bir şekilde ayırt edebilir ve bu da Ficus microcarpa tıbbi malzemelerinin kalite kontrolü ve orijinalliğinin belirlenmesi için etkili bir şekilde kullanılabilir.

Özet olarak, Ficus microcarpa ve ilgili türlerinin DNA barkodu ve HPLC parmak izi oluşturulmuştur. Yöntem basit, güvenilir, kararlı ve iyi bir tekrarlanabilirliğe sahip olup, Ficus microcarpa ve ilgili türlerinin parmak izi araştırması ve özgünlük tanımlaması için kullanılabilir. Aynı zamanda, Ficus microcarpa'nın kalitesini daha da artırmak için bilimsel bir temel sağlar.
PPI ağında, derece sıralamasına göre 42 önemli hedef seçilmiştir ve bunlar temel olarak 5 kategoriye ayrılmıştır: protein tirozin fosfatazlar (PTPN1, PTPN2, PTPN6, PTPN11, vb.), fosfatidilinositol 3-kinazlar (PIK3R1, PIK3CB, PIK3CA, vb.), mitojen aktive protein kinazlar (MAPK1, MAPK3, MAPK8, MAPK14, vb.), siklin bağımlı kinazlar (CDK1, CDK2, CDK4, vb.) ve diğer önemli hedefler (VEGFA, HSP90AA1, LCK, vb.). Bu önemli hedefler, UC'nin hedefe yönelik tedavisi için referans sağlayabilir.