Изучение влияния обработки на содержание пяти активных ингредиентов в Cistanche tubulosa на основе технологии ВЭЖХ-QQ-MS. Cistanche tubulosa является ценным китайским травяным лекарством для питания печени и почек, питания сущности и крови, увлажнения кишечника и стимулирования кишечных движений, а также замедления старения. Он используется для лечения почечной недостаточности, женского бесплодия, запоров, улучшения памяти, лечения болезни Альцгеймера и повышения иммунитета. Компоненты Cistanche deserticola разнообразны, включая фенилэтаноловые гликозиды, гликозиды бензилового спирта, циклогексеновые эфиры терпенов и их гликозиды, лигнаны и их гликозаминогликаны и т.д. Широкая фармакологическая активность растения тесно связана с содержащимися в нем биологически активными компонентами. Например, полисахариды из Cistanche deserticola способны эффективно сжигать гидроксильные радикалы и проявляют значительную антиоксидантную активность. Фенилэтаноидные гликозиды, такие как вербаскозид и гликозид эхинацеи, могут улучшать течение хронической высотной болезни за счет увеличения насыщения крови кислородом, повышая толерантность организма. Гликозид хризантемы Pinecone, как показали исследования, оказывает противопаркинсоническое действие. Для дальнейшего изучения активных ингредиентов и фармакологических эффектов Cistanche deserticola, мы ранее систематически обобщили химический состав и фармакологические эффекты этого вида.

В связи с очевидной и значительной фармакологической активностью Cistanche deserticola, его активным ингредиентам уделяется относительно больше внимания, а исследования по определению их содержания проводятся различными способами. Для определения состава различных полярностей и диапазонов содержания в Cistanche deserticola использовались различные методы исследования, такие как тандемная обращенно-фазовая хроматография с гидрофильным взаимодействием и тандемная масс-спектрометрия. В одном из исследований использовался метод расчета относительного поправочного коэффициента для сравнения и анализа нескольких компонентов фенилэтаноидных гликозидов в Cistanche deserticola с помощью маркера. УФ-спектрофотометрия, метод фенол-серной кислоты и высокоэффективная жидкостная хроматография были использованы для анализа изменений общего количества фенилэтаноловых гликозидов, общего количества полисахаридов и четырех репрезентативных компонентов в сырой и переработанной Cistanche deserticola. Некоторые из этих методов исследования не могут быть абсолютно количественно определены, другие обладают низкой чувствительностью. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной тройной квадрупольной масс-спектрометрией (ВЭЖХ-QQQ-MS) с низким пределом обнаружения и высокой чувствительностью больше подходит для анализа сложных образцов Cistanche deserticola с низким содержанием компонентов.

Обработка китайских лекарств - это уникальный и своеобразный фармацевтический метод в традиционной китайской медицине, который играет важную роль в снижении побочных эффектов, повышении эффективности лекарств, изменении свойств лекарственного сырья и даже в изменении терапевтического эффекта. Обработка может изменить основу фармакологического вещества традиционной китайской медицины, тем самым повышая ее эффективность. В теории традиционной китайской медицины считается, что обработка спиртом может повысить эффективность препаратов, тонизирующих почки. Поэтому Cistanche deserticola всегда обрабатывали желтым вином и использовали в качестве лекарства. Для того чтобы лучше оценить влияние обработки на химическую основу Cistanche deserticola, мы провели систематическое исследование компонентов крови и метаболомики Cistanche deserticola до и после обработки. На основе идентификации и скрининга маркеров качества соединений в Cistanche deserticola до и после обработки мы выбрали пять репрезентативных соединений из Cistanche deserticola, включая гликозиды F, вербаскозид, изоэргостериновые гликозиды, 2 '-ацетил вербаскозид и эхинакозид, и проанализировали их количественно. Метод определения химического состава Cistanche deserticola был создан на приборе HPLCQQ-MS. Среди пяти компонентов гликозид F Cistanche deserticola относится к классу фенилпропаноидных олигосахаридов, а остальные четыре - к фенилэтаноидным гликозидам, обладающим значительной фармакологической активностью. Гликозид цветка маоруи и гликозид хризантемы шишковидной также используются в качестве эталонных стандартов контроля качества в Китайской фармакопее. Этот эксперимент создаст теоретическую основу для последующей оценки эффективности переработки и качества Cistanche deserticola с точки зрения количественного анализа.

 

Метод ВЭЖХ-QQQ-MS, созданный в этой статье, в основном используется для определения пяти химических компонентов в Cistanche deserticola до и после обработки. Руководствуясь теорией стандартов качества традиционной китайской медицины, эксперимент отобрал компоненты для определения содержания на основе современных фармакологических исследований и в конечном итоге выбрал гликозид F Cistanche deserticola, вербаскозид, гликозид изоэргостерина, 2 '-ацетил вербаскозид и гликозид шишковидной хризантемы в качестве индикаторных компонентов. Эксперимент проводился в соответствии с методом экстракции в соответствии с пунктом определения содержания Cistanche deserticola в издании 2020 года Китайской фармакопеи, и образцы были извлечены как из сырых, так и из обработанных продуктов Cistanche deserticola. Были оптимизированы условия жидкостной фазы и масс-спектрометрии для пяти химических компонентов. Высокоэффективный жидкостный хроматографический тандемный масс-спектрометр с тройным квадруполем, использованный в эксперименте, обладает такими преимуществами, как высокое разрешение, высокая чувствительность и быстрый анализ. Он способен эффективно разделять и отбирать соединения, проводить количественный анализ различных молекул, обнаруживать чрезвычайно малые молекулы, а также эффективно и быстро анализировать сложные смешанные химические компоненты. Поэтому метод исследования, созданный на этой платформе, очень подходит для обнаружения компонентов в Cistanche deserticola с небольшими изменениями в содержании до и после обработки в данном эксперименте. По результатам методического исследования можно сделать вывод, что метод, созданный в данном разделе, обладает высокой точностью, аккуратностью и долговечностью. Поэтому данный метод может быть использован для определения содержания компонентов в Cistanche deserticola до и после обработки, а его результаты - для оценки качества Cistanche deserticola до и после обработки.
В процессе переработки Cistanche deserticola под воздействием нагревания некоторые соединения могут подвергаться гидролизу, окислению, ферментативным реакциям и изомеризации, что приводит к уменьшению или увеличению содержания их компонентов. Если вербаскозид изомеризуется с получением гликозида изоэргостерина, то содержание вербаскозида уменьшается, а содержание гликозида изоэргостерина увеличивается. Однако в процессе переработки гликозид шишковидной железы подвержен реакции гидролиза, что приводит к снижению его содержания. Поэтому для повышения эффективности традиционной китайской медицины следует обращать внимание на изменение содержания основных компонентов в процессе обработки, чтобы избежать явления недостаточной или чрезмерной обработки. В целом, результаты данного исследования закладывают теоретическую основу для оценки качества Cistanche deserticola в будущем и демонстрируют важность обработки Cistanche deserticola с точки зрения количественного анализа.