Исследование изменений в компонентах Fructus Evodiae и переработанного Fructus Evodiae с помощью UPLC фингерпринтинга в сочетании с многомерным статистическим анализом
Wu Zhuyu, впервые записанное в Shennong Bencao Jing, классифицируется как средний сорт. Eucommia rutaecarpa (Juss.) Benth. - растение семейства Рутовые Euodia rutaecarpa (Juss.) Benth Var. officinalis (Dode) Huang или Euodia rutaecarpa (Juss.) Benth Высушите почти зрелые плоды var. bodinieri (Dode) Huang. Когда плоды еще не растрескались, с августа по ноябрь, срежьте ветки плодов, высушите их на солнце или при низкой температуре и удалите примеси, такие как ветки, листья и стебли. Wu Zhuyu обладает такими свойствами, как рассеивание холода и облегчение боли, уменьшение рефлюкса и прекращение рвоты, а также помощь ян и прекращение диареи. Клинически используется для лечения таких симптомов, как головная боль Цзюэинь, холодная грыжа и боль в животе, холодная и влажная стопа, менструальные боли в животе, растяжение и боль в животе, рвота и глотание кислоты, а также диарея в пять сезонов. Современные исследования показали, что Fructus Evodiae обладает различными эффектами, такими как вазодилатирующий, противовоспалительный, анальгетический, антибактериальный, центрально-протекторный, противорвотный и антиэметический. Фармакологические эффекты Fructus Evodiae и переработанного сока солодки (далее "переработанный Fructus Evodiae") различаются, что может быть связано с изменениями в химическом составе до и после переработки Fructus Evodiae. После обработки соком солодки У Жуйю можно уменьшить ее токсичность и облегчить сухость.
В Evodia rutaecarpa много химических компонентов и комплекс фармакологических действий. Ее основные химические компоненты включают алкалоиды, горечи, флавоноиды и летучие масла. Из-за разнообразия и сложности химических компонентов в традиционной китайской медицине однокомпонентная модель количественного контроля качества химических компонентов не только не обладает специфичностью, но и не в состоянии отразить присущие традиционной китайской медицине качественные характеристики. Поэтому необходимо точно объяснить изменения различных компонентов У Чжу Юй и переработанного У Чжу Юй, обобщить закономерности изменений фармакологических компонентов до и после переработки, чтобы более полно объяснить различия в фармакологической активности и клинических эффектах. В последние годы появление большого количества новых инструментов и технологий привело к тому, что распознавание отпечатков пальцев и химических образцов стало основным направлением исследований качества в традиционной китайской медицине. Сочетание методов анализа отпечатков пальцев и хемометрического анализа дает новую идею для общего контроля качества традиционной китайской медицины.
В данном исследовании использовалась технология сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографии (UPLC) для получения спектров отпечатков пальцев Fructus Evodiae и обработанного Fructus Evodiae. В сочетании с оценкой сходства и методами многомерного статистического анализа, такими как кластерный анализ (CA) и ортогональный частичный дискриминантный анализ по методу наименьших квадратов (OPLS-DA), была проведена комплексная оценка для анализа дифференциальных компонентов Fructus Evodiae до и после обработки с различных точек зрения. Была предварительно изучена корреляция между фармакологическими эффектами и химическим составом Fructus Evodiae и обработанного Fructus Evodiae, и в некоторой степени объяснена связь между изменениями фармакологических эффектов и химического состава Fructus Evodiae до и после обработки. Это может послужить основой для исследования качества и обработки фруктовых плодов эводии.

 

Определение спектра отпечатков пальцев Evodia rutaecarpa может не только дать предварительную оценку качества Evodia rutaecarpa из разных районов производства, но и четко отличить ее от переработанной Evodia rutaecarpa. В спектре отпечатков пальцев Evodia rutaecarpa выявлено в общей сложности 27 общих хроматографических пиков, а недавно добавленный общий хроматографический пик 28 в обработанной Evodia rutaecarpa - это глицирризиновая кислота, которая образуется после обработки Evodia rutaecarpa. Этот пик может быть использован для четкого разграничения сырых и обработанных продуктов Evodia rutaecarpa. Результаты оценки сходства показывают, что, за исключением 4 партий образцов из производственного района Цзянси, спектры отпечатков пальцев Evodia rutaecarpa из других производственных районов имеют высокую степень сходства. Одна партия аномалий сходства произошла в производственном районе Хунань, что может быть связано с различиями во времени сбора урожая и методах обработки в этом производственном районе. Шесть дифференциальных биомаркеров были определены с помощью ортогонального частичного дискриминантного анализа по методу наименьших квадратов (OPLS-DA), и их значимость была ранжирована следующим образом: глицирретиновая кислота>эводиамин>пик 3>пик 1>хлорогеновая кислота>пик 2.
Согласно теории традиционной китайской медицины, китайское лекарство Wu Zhu Yu обладает свойствами тепла, горечи и холода и выполняет функции рассеивания тепла, облегчения боли, уменьшения рефлюкса и прекращения тошноты. Она используется для лечения таких симптомов, как головная или эпигастральная боль, вызванная дефицитом печени и желудка, а также холод, помутнение инь и восходящий рефлюкс. Солодка обладает мягким характером и сладким вкусом, который оказывает тонизирующее действие на селезенку, питает ци, снимает боль и гармонизирует различные лекарства. Поэтому после обжаривания с соком солодки Wu Zhuyu может уменьшить токсичность и облегчить сухость в определенной степени, что делает его подходящим для людей со слабой селезенкой и желудком. После обработки соком солодки, помимо увеличения глицирретиновой кислоты, средняя площадь пиков остальных пяти дифференциальных маркеров в Wu Zhu Li имела тенденцию к уменьшению. По имеющимся данным, алкалоид Wu Zhu Li, субалкалоид Wu Zhu Li и лимонин обладают определенным токсическим действием на клетки эмбриональных почек человека. Поэтому снижение содержания таких химических компонентов, как алкалоид Wu Zhu Li, после обработки является одной из причин снижения токсичности Wu Zhu Li. Существуют также исследования, указывающие на то, что различные компоненты Evodia rutaecarpa обладают токсичностью, причем в следующей последовательности: летучее масло>целый компонент>компонент спиртового экстракта>компонент водного экстракта. Поэтому в процессе переработки Evodia rutaecarpa содержание летучего масла уменьшается под воздействием тепла, что ослабляет его токсичность. В то же время содержание компонентов фенольных кислот, таких как хлорогеновая кислота, уменьшается из-за термической нестабильности, что делает эффективность Evodia rutaecarpa более щадящей.
В данном исследовании использовалась сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография (УВЭЖХ) для получения спектров отпечатков пальцев Fructus Evodiae и обработанного Fructus Evodiae. Этот метод обладает высокой специфичностью и хорошей воспроизводимостью, а также позволил предварительно изучить корреляцию между фармакологическими эффектами и химическим составом Fructus Evodiae и переработанного Fructus Evodiae. В определенной степени он объяснил взаимосвязь между изменениями фармакологических эффектов и химического состава до и после обработки фруктовых плодов Evodiae, что может служить основой для исследования качества и обработки фруктовых плодов Evodiae.