Сравнительное исследование регуляции экспрессии AQP3 и AQ4 у крыс с хроническим атрофическим гастритом с помощью летучего масла до и после комбинации Atractylodes macrocephala и Panax ginseng
Совместимость - одна из основных характеристик клинического применения традиционной китайской медицины. При разумной совместимости и соответствующем отваре материальная основа отваров традиционной китайской медицины претерпевает определенные изменения, тем самым достигая цели повышения эффективности и снижения токсичности. Конкретный механизм может быть научно объяснен через изменения в материальной основе и биологической активности эффективных частей или групп эффективных частей до и после совместимости с классическими лекарствами.

Традиционная китайская медицина считает, что в основе патогенеза хронического атрофического гастрита (ХАГ) лежит дефицит ци селезенки и желудка. В клинической практике принято использовать препараты, стимулирующие селезенку и ци. Эффективность одного препарата часто не является идеальной, и ее часто усиливает комбинация дополнительных препаратов. Женьшень и Atractylodes macrocephala - основные лекарственные пары, используемые в клиническом лечении синдрома недостаточности селезенки и желудка. Атрактилодес макроцефала укрепляет селезенку и ци, высушивает сырость и способствует диурезу, а также сочетается с женьшенем, который дополняет селезенку и ци, питает инь и вырабатывает жидкость. Все это используется сбалансированно и необходимо. Исследования показали, что рецепты, состоящие в основном из женьшеня и Atractylodes macrocephala, могут значительно облегчить лечение хронического атрофического гастрита, например, Sijunzi Tang и Guizhi Ginseng Tang, составленные в равных количествах в соотношении 1:1. Летучее масло Atractylodes macrocephala является основным действующим веществом Atractylodes macrocephala, которое обладает эффектами стимулирования моторики желудочно-кишечного тракта, противовоспалительным, противоопухолевым и др. Однако в настоящее время неизвестно, может ли он служить материальной основой для лечения хронического атрофического гастрита.

Аквапорины (AQPs) связаны с регуляцией водного обмена в организме. По имеющимся данным, снижение экспрессии AQP3 и AQP4 может приводить к потере воды в организме и усугублять степень атрофии слизистых желез желудка при ХАГ. Из этого можно сделать вывод, что аномальная экспрессия AQP3 и AQP4 может быть молекулярно-биологической основой дисфункции селезенки, а также одним из механизмов выработки САГ. Может ли комбинация летучего масла Atractylodes macrocephala и женьшеня достичь цели лечения хронического атрофического гастрита и повысить эффективность за счет повышения экспрессии AQP3 и AQP4, еще предстоит подтвердить в ходе исследований.

Исходя из этого, в данном эксперименте с помощью методов газовой хроматографии-масс-спектрометрии, электронной микроскопии и иммуногистохимии сравниваются материальная основа и биологическая активность (микроструктура, ультраструктура и экспрессия AQP3, AQP4) летучих компонентов масла до и после сочетания Atractylodes macrocephala и Panax ginseng, раскрывая научный смысл рационального сочетания традиционной китайской медицины.

 

ХАГ - это хроническое заболевание пищеварительной системы, вызванное множеством факторов, с высоким риском перерождения в рак желудка. В мировой статистике онкологических заболеваний уровень заболеваемости и связанная с ним смертность от рака желудка входят в пятерку лидеров. Поэтому диагностика и лечение ХАГ являются одним из важных средств профилактики возникновения и развития рака желудка. Традиционная китайская медицина считает, что дефицит ци селезенки и желудка является общим патогенезом ХАГ, и клиническое лечение часто включает в себя комбинацию препаратов, укрепляющих селезенку и оживляющих ци. Классические препараты показали значительную клиническую эффективность в лечении хронической обструктивной болезни легких (ХАБЛ) с помощью комбинации Atractylodes macrocephala и Panax ginseng, питающих селезенку и ци. Летучее масло Atractylodes macrocephala является основным действующим веществом женьшеневого препарата. Поэтому в данном исследовании сравнивались материальная основа и изменения биологической активности компонентов летучего масла до и после применения Atractylodes macrocephala в сочетании с женьшенем, а также изучался механизм синергизма двух препаратов при лечении ЦАГ.

Что касается количества извлеченного летучего масла, то количество летучего масла, извлеченного после совместимости, было всего на 1,44 мл больше, чем до совместимости. Это может быть связано с увеличением содержания летучего масла в Atractylodes macrocephala в результате совместимости, либо с добавлением небольшого количества летучего масла женьшеня, либо с образованием новых компонентов. Чтобы выяснить причины изменений в материальной основе, был проведен ГХ-МС анализ летучих масел до и после совместимости. Как и в предыдущих исследованиях, женьшень содержит очень мало летучего масла, что затрудняет его самостоятельное извлечение и определение. Поэтому в данном эксперименте в качестве объектов исследования измерялось и сравнивалось летучее масло Atractylodes macrocephala и летучее масло после совместимости. Результаты теста показали, что компоненты летучего масла Atractylodes macrocephala в основном включают Atractylodes macrocephala, Eucalyptol 3,7 (11) - диен, Heptane, Docosane и т.д. Среди них Atractylodes macrocephala имеет самое высокое содержание, до 51,67%. После совместимости с женьшенем относительное содержание Atractylodes macrocephala снизилось до 45,94%, а небольшое количество летучих компонентов масла женьшеня (таких как гинзенозид 1,01%, β - гинзенозид 0,61%, α - кумарин 0.76%, аллофиллен 0,59% и (E) - β - фарнезен 0,39%) были добавлены, что указывает на то, что состав активных ингредиентов в Atractylodes macrocephala после совместимости может меняться из-за изменений в содержании или добавления новых компонентов. В процессе совместимости добавление новых компонентов, а также физические или химические реакции, происходящие под воздействием внешних факторов, таких как температура кипения, влажность и содержание кислорода, могут быть важными причинами изменения основы фармакологического вещества в той или иной степени. В настоящее время широко распространено мнение, что сочетание нескольких компонентов в традиционной китайской медицине позволяет достичь синергетического эффекта за счет вмешательства и улучшения патогенеза через множество целей и путей. Предыдущие исследования показали, что сочетание женьшеня и атрактилодеса может усилить терапевтический эффект CAG за счет увеличения содержания сапонинов и образования новых компонентов. Это указывает на то, что изменения в составе сапонинов женьшеня и атрактилодеса способствуют повышению эффективности препарата, подтверждая мнение о том, что комбинация может усилить синергетический эффект нескольких компонентов в традиционной китайской медицине. Кроме того, компоненты летучих масел также являются важными активными ингредиентами в женьшеневой медицине. Есть исследования, показывающие, что летучее масло Atractylodes macrocephala в сочетании с женьшенем в соотношении 1:1 и 1:2 обладает более сильной антибактериальной активностью, чем летучее масло Atractylodes macrocephala. Предполагается, что сочетание Atractylodes macrocephala и Panax ginseng может изменить активность летучего масла в лечении ХАГ из-за изменений в его химическом составе. Однако для подтверждения этого предположения необходимы эксперименты на животных.

Результаты патологоанатомических исследований на животных показали, что по сравнению с модельной группой количество деформаций слизистой оболочки желудка уменьшилось, а степень атрофии значительно снизилась в каждой группе препаратов. Форма и размер желудочных ямок стали обычными, площадь воспалительной клеточной инфильтрации значительно уменьшилась, а патологический балл желудочной ткани также значительно снизился (P<0,05). Кроме того, в группе летучих масел после совместимости наблюдалась тенденция к снижению патологического балла по сравнению с группой летучих масел Atractylodes macrocephala. Приведенные выше результаты свидетельствуют о том, что летучее масло Atractylodes macrocephala и Panax ginseng оказывают хорошее улучшающее действие на слизистую оболочку желудка до и после совместимости, а терапевтический эффект Panax ginseng после совместимости показал определенную тенденцию к улучшению по сравнению с до совместимости. Что касается причин, то предыдущие исследования показали, что атрофия желез слизистой оболочки желудка является основной патологической особенностью ХАГ. Это связано с инфильтрацией и трансмембранной миграцией воспалительных клеток (в основном моноцитов и нейтрофилов) в слизистую оболочку желудка, что повышает проницаемость клеток и приводит к потере воды. AQPs тесно связаны с регуляцией водного баланса в организме, при этом AQP3 и AQP4 высоко экспрессируются в нормальных тканях желудочно-кишечного тракта и слабо экспрессируются в слизистой оболочке желудка пациентов с хроническим атрофическим гастритом, что может быть связано с потерей воды в слизистой оболочке желудка. Результаты иммуногистохимического исследования показали, что по сравнению с модельной группой в группе летучего масла Atractylodes macrocephala наблюдалась тенденция к усилению экспрессии AQP3 в слизистой желудка и значительному увеличению экспрессии AQP4 (P<0,05); экспрессия AQP3 и AQP4 в слизистой желудка была значительно увеличена в группе комбинации летучих масел (P<0,05). Из этого видно, что комбинация летучих масел может усилить экспрессию AQP3 и AQP4, предотвратить уменьшение количества воды из интерстициальных пространств в клетки, улучшить дисбаланс водного обмена в организме и облегчить такие патологические проявления, как атрофия клеток слизистой оболочки желудка при ХАГ. Это указывает на то, что дисрегуляция экспрессии AQP3 и AQP4 может служить одним из механизмов патогенеза ХАГ, а также может стать мишенью для профилактики и лечения ХАГ. Основываясь на результатах исследования материальной основы, сочетание Atractylodes macrocephala и Panax ginseng может усилить тонизирующий и подсушивающий эффекты селезенки за счет воздействия на материальную основу летучих масел и водный обмен, что позволяет достичь цели усиления терапевтического эффекта при хроническом атрофическом гастрите. Этот результат создает научную основу для выяснения научного смысла рациональной совместимости традиционной китайской медицины.

Таким образом, летучее масло Atractylodes macrocephala способно облегчить патологические состояния желудочной ткани у крыс с хроническим атрофическим гастритом, а его эффект усиливается при сочетании с женьшенем. Механизм может быть связан с уменьшением доли Atractylodes macrocephala, небольшим добавлением летучего масла женьшеня и увеличением экспрессии аквапоринов AQP3 и AQP4. Результаты исследования проясняют научный смысл совместимости и повышения эффективности традиционной китайской медицины с точки зрения материальной основы и фармакологического механизма, что создает основу для рационального клинического применения и служит ориентиром для аналогичных исследований совместимости традиционной китайской медицины.