Создание спектра отпечатков UPLC и определение индикаторных компонентов для лекарственной травы Verbena officinalis
Вербена лекарственная (Verbena officinalis L.), растение семейства Вербеновые (Verbenaceae), представляет собой высушенную надземную часть растения. Она способствует кровообращению, разгоняет застои крови, выводит токсины, способствует диурезу, уменьшает желтизну кожи и предотвращает малярию. Исследования химического состава показали, что вербена содержит летучие масла, иридоиды, фенилпропаноиды, флавоноиды и другие компоненты, которые обладают различными фармакологическими свойствами, такими как противовоспалительное, антиоксидантное, обезболивающее, облегчающее кашель и астму, противостоящее ишемии миокарда и ишемии головного мозга. В Фармакопее Китайской Народной Республики издания 2020 года, часть первая, в качестве показателей содержания лекарственной травы вербены используются олеаноловая и урсоловая кислоты, однако их специфичность невелика. Кроме того, в традиционной китайской медицине используются традиционные отвары, а в качестве показателей содержания используются липофильные компоненты, такие как олеаноловая и урсоловая кислоты. Стоит обсудить, помогает ли это контролировать качество лекарственных трав. В литературе имеются сообщения о том, что измерение высокого содержания терпеноидных гликозидов циклогексенового эфира, таких как вербаскозид и вербаскозид, а также фенилпропаноидного гликозида вербаскозида в вербаскозиде, имеет определенную специфичность и положительное значение для обеспечения клинической эффективности вербаскозида. Вышеперечисленные показатели содержания были использованы при исследовании контроля качества стандартного отвара и гранул вербаскозида. Для контроля качества вербаскозида также использовались фингерпринт-спектры, но идентификация химических компонентов в основном сосредоточена на вербаскозиде, вербаскозиде и вербаскозиде. Сообщений об изучении других водорастворимых компонентов не было. В данном исследовании создание спектра отпечатков пальцев травы вербены в сочетании с масс-спектрометрической идентификацией высокого разрешения, а также создание методов определения содержания четырех активных компонентов, а именно вербаскозида, вербаскозида, вербаскозида и изовербаскозида, были использованы в качестве основы для общего контроля качества травы вербены.

Выбор показателей содержания. Согласно литературным данным и нашим предыдущим исследованиям, вербаскозид при определенных условиях может превращаться в изовербаскозид. И вербаскозид, и изовербаскозид обладают антиоксидантным, антигемолитическим, антиангиотензиназным действием, снижают артериальное давление и повышают иммунную функцию. Это указывает на то, что вербаскозид и изовербаскозид имеют большое значение для контроля и оценки качества вербены. Поэтому, основываясь на существующих исследованиях, наша компания увеличит количество определений изовербаскозида, чтобы обеспечить контроль качества китайских травяных препаратов, содержащих вербену. Исследования химического состава показали, что и вербаскозид, и изовербаскозид являются иридоидными гликозидами. Вербаскозид, также известный как 5-гидроксивербаскозид, имеет дополнительную гидроксильную группу в положении углерода 5 по сравнению с вербаскозидом. Химические структуры этих двух компонентов схожи, и их кривые поглощения в УФ-видимых 3D-спектрах практически одинаковы. Поэтому для определения рекомендуется объединить два компонента и рассчитать их общее количество. В данном исследовании были разработаны четыре метода определения содержания активных ингредиентов. Метод приготовления тестового раствора соответствовал спектру отпечатков пальцев, но хроматографические условия были установлены отдельно и не соответствовали спектру отпечатков пальцев. Основное внимание уделялось степени разделения, чистоте и воспроизводимости индикаторных компонентов. Результаты определения содержания показали, что существуют определенные различия в содержании вербаскозида, вербаскозида, вербаскозида и изовербаскозида в разных районах производства травы вербены. Даже в пределах одной производственной зоны наблюдались различия в содержании разных партий трав, что в основном было связано с различиями во времени сбора, методах обработки, способах хранения и сроках хранения трав. Кроме того, в ходе исследований наша компания обнаружила значительные различия в содержании вербаскозида, вербаскозида, вербаскозида и изовербаскозида в разных лекарственных частях одной и той же травы вербены. Среди них содержание вербаскозида, вербаскозида, вербаскозида и изовербаскозида в цветках и листьях значительно выше, чем в стеблях. Поэтому строгий контроль времени сбора лекарственных трав и соблюдение соотношения цветов и листьев в травах имеют большое значение для контроля качества лекарственных трав вербены.
Исследование спектров отпечатков пальцев. Для получения спектра отпечатков пальцев Herba Verbena был использован метод UPLC. Систематически исследовались условия хроматографирования спектра отпечатков пальцев и способ приготовления тестового раствора. Результаты расчета сходства показали, что сходство спектров отпечатков пальцев 15 партий лекарственного сырья превышало 0,9, а общее сходство было высоким, что может быть использовано для идентификации и контроля качества Herba Verbena. С помощью масс-спектрометрии высокого разрешения для определения общих пиков были идентифицированы три типа активных ингредиентов, а именно гликозиды иридоидов, гликозиды фенилпропаноидов и флавоноиды. Впервые для характеристики трех типов активных ингредиентов в вербене были использованы спектры отпечатков пальцев, и впервые изовербаскозид, лютеолин 7-диглюкозид и апигенин 7-O-глюкуронид были идентифицированы по спектрам отпечатков пальцев вербены, что лучше отражает общую целостность и характеристики вербены. Используя относительную площадь общих пиков в качестве переменных, кластерный анализ и анализ главных компонент позволили разделить 15 партий лекарственного сырья на три категории. Среди них лекарственное сырье из Хэнани, Цзянсу и Гуйчжоу имело схожие соотношения химического состава. OPLS-DA обнаружил семь хроматографических пиков со значительными различиями в соотношениях пиков, а именно пики 2, 6, 16, 10, 11, 5 и 9. Эти различия могут быть связаны с различиями во времени сбора и методах обработки лекарственного сырья.
Таким образом, данный метод позволяет эффективно анализировать различия в качестве китайских лекарственных трав разного происхождения, обеспечивая основу для оценки качества китайских лекарственных трав разного происхождения.