Изучение механизма действия препарата Хуанлянь Цзеду Тань в лечении сосудистой деменции на основе сетевой фармакологии и экспериментальной проверки
Сосудистая деменция (СД) - это синдром когнитивной дисфункции, вызванный множественными цереброваскулярными факторами, и является вторым по распространенности типом деменции после болезни Альцгеймера. Исследование показало, что уровень заболеваемости ВД среди людей старше 65 лет в мире достигает 5%~10%. Ожидается, что с усугублением процесса старения населения в 2050 году число больных ВД утроится, что представляет собой серьезную угрозу для здоровья людей среднего и пожилого возраста. В настоящее время в западной медицине не существует специального препарата для лечения ВД, а длительное применение западных лекарств может вызвать серьезные побочные эффекты. Однако формулы традиционной китайской медицины обладают преимуществами многоцелевого и многомеханического воздействия, что позволяет вмешиваться в сложный патогенез ВД посредством многоцелевого, многопутевого и многосистемного воздействия, с минимальными токсическими побочными эффектами и значительным терапевтическим эффектом.

Современное общество считает, что "токсическое повреждение меридиана мозга" является основным стержнем патогенеза ВД, а основными методами лечения являются очищение огнем и детоксикация. Хуанлянь Цзеду Тань берет свое начало от "Экстренной формулы резерва локтя" Гэ Хуна, а его название впервые появилось в "Тайных сущностях внешней платформы". Она состоит из Хуанлянь, Хуанбай, Хуанцинь и Гардении и является представительной формулой для очищения от огня и детоксикации. Постинсультное когнитивное расстройство - важная ветвь сосудистой деменции. Клинические исследования показали, что Huanglian Jiedu Tang положительно влияет на уровень С-реактивного белка, нейроспецифической энолазы, D-димера и показатели синдрома традиционной китайской медицины у пациентов с постинсультными когнитивными нарушениями и может улучшить их когнитивные функции; Huanglian Jiedu Tang оказывает очищающее действие на общую токсичность, не ограничиваясь только тепловой токсичностью. Результаты экспериментов показали, что "Ляньцзеду Тан" может улучшить способности к обучению и запоминанию у мышей с расстройствами приобретения памяти, вызванными скополамином. Механизм может быть связан с повышением активности ацетилхолинэстеразы (AchE) и ингибированием активности ацетилхолинэстеразы (ChAT). Формулы традиционной китайской медицины отличаются целостностью и разнообразием, и традиционными фармакологическими методами трудно оценить их сложные механизмы действия. Исследовательская концепция сетевой фармакологии делает акцент на системном уровне и общей перспективе биологических сетей, что позволяет систематически анализировать взаимосвязь между "компонентами традиционной китайской медицины, мишенями, путями и мишенями заболеваний". Она может продемонстрировать взаимосвязь между многочисленными компонентами, мишенями и путями, входящими в формулы традиционной китайской медицины, что совпадает с общей идеей дифференциации и лечения синдромов традиционной китайской медицины.

Эффективные ингредиенты Хуанлянь Цзеду Тань сложны и имеют множество целей, но эффективные ингредиенты и механизм Хуанлянь Цзеду Тань в лечении ВД все еще неясны. Поэтому в данном исследовании были применены методы сетевой фармакологии и фармакологической валидации in vitro для изучения и исследования потенциального механизма действия Хуанлянь Цзеду Тан в лечении ВД, а также рассмотрен научный вопрос о том, как Хуанлянь Цзеду Тан улучшает ВД, что создает основу для его клинического применения.

Обсуждение и заключение: Целевая сеть эффективных ингредиентов показывает, что Huanglian Jiedu Tang обладает свойствами многокомпонентного и многоцелевого лечения ВД. Результаты показывают, что берберин, кверцетин, феруловая кислота и генипозид являются его ключевыми активными ингредиентами. Исследования показали, что берберин может улучшить обучение и память у крыс с ВД за счет ингибирования экспрессии воспалительных хемокинов - моноцитарного хемоаттрактантного протеина-1 (MCP-1) и белков пути P38MAPK в гиппокампе. Исследования показали, что кверцетин может облегчать нарушения обучения и памяти у крыс с ВД, что может быть связано со снижением содержания оксида азота (NO) в тканях мозга, подавлением активности синтазы оксида азота (NOS), стимулированием энергетического обмена мозга, регулированием баланса между эндотелином-1 (endothelin-1) и пептидом, связанным с геном кальцитонина (CGRP), и улучшением гемореологии. Исследования показали, что феруловая кислота может усиливать функцию холинергической системы, антиоксидантную активность и регулировать уровень возбуждающих аминокислот у крыс с ВД, тем самым оказывая нейропротекторное действие. Исследования показали, что генипозид может облегчить апоптоз и некроз нейронов коры головного мозга и гиппокампа у крыс с ВД.
В результате пересечения активных ингредиентов Huanglian Jiedu Tang с мишенями ВД было получено 105 целевых генов, сопутствующих лекарственным заболеваниям. Тремя основными мишенями препарата Хуанлянь Цзеду Тан являются MAPK8, MAPK9 и MAPK10. MAPK8, MAPK9 и MAPK10 также известны как JNK1, JNK2 и JNK3, соответственно. Они являются важными членами сигнального пути MAPK, активируемого митогеном протеинкиназы, играют решающую роль в клеточной пролиферации, дифференциации, выживании и апоптозе, а также тесно связаны с возникновением и развитием болезни Альцгеймера.
Среди сигнальных путей KEGG, проверенных в этом исследовании, сигнальный путь MAPK имеет самую высокую корреляцию с эффективными мишенями Huanglian Jiedu Tang, за которым следует сигнальный путь FoxO. Исследования показали, что сигнальный путь JNK, являющийся важным компонентом классического сигнального пути MAPK, играет решающую роль в клеточной аутофагии, апоптозе, воспалительной реакции, а также в возникновении и развитии сосудистой деменции. FoxO1 является основным представителем семейства транскрипционных факторов Forkhead Box O (FoxO), которые в основном регулируют клеточную пролиферацию, дифференцировку, аутофагию, апоптоз, окислительный стресс, повреждение/восстановление ДНК и другие связанные с этим механизмы. Исследования показали, что активированный JNK может регулировать экспрессию FoxO1. JNK способствует ядерной транслокации и снижает транскрипционную активность за счет увеличения связывания FoxO1 с партнерским белком 14-3-3. В данном исследовании, в сочетании с патогенезом ВД, аутофагия, воспалительная реакция, реакция на окислительный стресс, апоптоз клеток и путь JNK/FoxO1 были рассмотрены в качестве возможных механизмов воздействия Хуанлянь Цзеду Тан на ВД в экспериментах с клетками in vitro. Результаты данного исследования показывают, что Huanglian Jiedu Tang может значительно подавлять воспалительный и окислительный стрессовые реакции, индуцированные глутаматом в клетках PC12, что может быть связано с ингибированием JNK/FoxO1 пути, что согласуется с данными литературы. Белки LC3-II, Beclin-1 и P62 участвуют в формировании аутофагосом и являются важными индикаторными белками для измерения аутофагии. Atg может регулировать аутофагию и содержит ряд регуляторных факторов, таких как Atg1, Atg5, Atg6, Atg7 и др. По мере развития аутофагии растворимая форма LC3-I в цитоплазме ковалентно связывается с фосфатидилэтаноламином под действием Atg7, образуя LC3-II, который связывается с мембраной аутофагосомы и способствует развитию аутофагии. Результаты данного исследования показывают, что Huanglian Jiedu Tang может снижать экспрессию белков JNK, p-JNK, FoxO1, LC3II/I, Beclin-1, Atg7, каспазы-3 и каспазы-9, а также повышать экспрессию белков p-FoxO1 и P62. Это позволяет предположить, что Huanglian Jiedu Tang может ингибировать аутофагию и апоптоз клеток путем подавления пути JNK/FoxO1, что совпадает с результатами, полученными в литературе.
Таким образом, в данном исследовании использовались методы сетевой фармакологии и экспериментальной проверки для изучения возможного механизма действия Хуанлянь Цзеду Тан в лечении ВД. Сделан вывод о том, что Хуанлянь Цзеду Тан может оказывать терапевтическое действие на ВД путем ингибирования пути JNK/FoxO1, тем самым подавляя воспаление, окислительный стресс, аутофагию и апоптоз клеток. Данное исследование позволяет обосновать эффективность Huanglian Jiedu Tang в лечении ВД, а также дает новые идеи относительно механизма действия Huanglian Jiedu Tang на ВД в будущем.