Создание отпечатка пальца UPLC и количественный анализ четырех компонентов в стандартном отваре куркумы
После тысячелетий лекарственной практики отвары по-прежнему остаются основной лекарственной формой для клинического применения в традиционной китайской медицине. С развитием общества и технологическим прогрессом отвары обрели новые "коннотации", а также появились "стандартные отвары" традиционной китайской медицины. Стандартный отвар китайской медицины - это стандартное вещество, приготовленное на основе метода отвара традиционной китайской медицины и стандартизированного режима отвара. Он может стандартизировать клиническое применение китайской медицины, стандартизировать использование новых отваров китайской медицины, таких как гранулы формулы китайской медицины, в клинической практике, а также служить основой для исследований и разработки гранул формулы китайской медицины, классических препаратов формулы и других продуктов.
Турмерик - это высушенное корневище Curcuma longa L., растения семейства имбирных. Его действие направлено на разгон крови, стимулирование циркуляции ци и облегчение боли. Это широко используемое в клинической практике средство традиционной китайской медицины. Основными химическими компонентами куркумы являются фенолы и терпеноиды. Кроме того, в ней также содержится небольшое количество алкалоидов, флавоноидов, стеринов, которые оказывают антибактериальное, противовоспалительное, антиоксидантное, противоопухолевое, противодиабетическое, защищающее печень, липиды крови и другие эффекты. В настоящее время куркума распространена в основном в Сычуани, Юньнани, Шэньси и других регионах. Сычуань и Юньнань являются подлинными и основными районами производства куркумы, и на рынок поставляется в основном культивируемая культура. Дикорастущих ресурсов мало, что затрудняет формирование масштаба. В настоящее время оценка качества куркумы в основном сосредоточена на анализе и определении компонентов куркумина и летучих масел, а другие виды компонентов изучаются в меньшей степени.
С развитием современных аналитических технологий был достигнут значительный прогресс в контроле качества традиционной китайской медицины. Применение таких методов контроля качества, как отпечаток пальца/характерный спектр, одно измерение и несколько оценок, многокомпонентное количественное определение и многокомпонентная тонкослойная идентификация, сделало концепцию "общего контроля качества" традиционной китайской медицины все более ясной. Данное исследование позволило получить UPLC-отпечаток стандартного отвара куркумы в сочетании с хемометрическим анализом для выявления дифференциальных маркеров качества и многокомпонентным количественным анализом для идентификации и контроля качества стандартного отвара куркумы и сопутствующих препаратов.

Выбор показателей измерения. Куркумин и летучее масло являются одними из основных активных компонентов куркумы, но их растворимость в воде относительно низкая. Стандартные отвары используют воду в качестве растворителя, и водорастворимые компоненты должны быть важной материальной основой эффективности отваров. Поэтому при исследовании стандартов качества стандартных отваров в дополнение к измерению компонентов куркумы было добавлено определение феруловой кислоты. По сравнению с компонентами куркумина, феруловая кислота обладает относительно хорошей растворимостью в воде и является предшественником для синтеза компонентов куркумина. В то же время, в процессе отваривания стандартных отваров, компоненты куркумина также могут быть преобразованы в феруловую кислоту. Современные фармакологические исследования подтвердили, что феруловая кислота обладает антибактериальным, противовирусным, антиоксидантным, антитромботическим, липидоснижающим, уменьшающим ишемию миокарда и потребление кислорода действием, и ее лекарственное значение становится все более важным. Обращено внимание на количество феруловой кислоты в стандартном отваре, отражающее изменения в химическом составе куркумы в процессе стандартного отвара. Оптимизация производственных процессов для современных рецептур традиционной китайской медицины, таких как гранулы на основе "стандартных отваров", имеет большое направляющее значение.

Разработка аналитических методов. Полярность химических компонентов в стандартном отваре куркумы сильно различается, включая активные ингредиенты, такие как куркумин с высокой липидной растворимостью, и водорастворимые ингредиенты, такие как феруловая кислота. Поэтому для создания спектра отпечатков пальцев требуется максимальное извлечение вышеперечисленных компонентов, а также хорошее хроматографическое разделение химических компонентов с разной полярностью и создание многокомпонентного количественного метода, соответствующего условиям спектра отпечатков пальцев. Поэтому мы провели систематическое исследование системы подвижной фазы, длины волны детектирования и способа приготовления тестового раствора, чтобы определить оптимальные хроматографические условия и способ приготовления тестового раствора.
Оценка спектров отпечатков пальцев и результатов определения содержания. Сходство между спектрами отпечатков пальцев 16 партий стандартного отвара куркумы и контрольными спектрами отпечатков пальцев превышает 0,95, что свидетельствует о высоком общем сходстве спектров отпечатков пальцев и может быть использовано для идентификации и контроля качества стандартного отвара куркумы. Расчет сходства может отразить стабильный состав и характерные соотношения пиков отпечатков, но не может полностью описать и выделить закономерности распределения и взаимосвязи сложных компонентов, содержащихся в спектре отпечатков. Поэтому для изучения спектра отпечатков были использованы методы распознавания образов в хемометрии. Результаты показали, что 16 партий стандартных образцов отвара куркумы обладают определенной продуктивностью, 10 общих областей пиков являются переменными, HCA и PCA классифицировали 16 партий образцов на две категории, причем образцы из района производства Сычуань были отнесены к одной категории, а образцы из района производства Юньнань - к другой. Всего было обнаружено 6 дифференциальных биомаркеров, а именно: пик, пик (феруловая кислота), пик 8 (бис (деметоксикуркумин)), пик 9 (деметоксикуркумин), пик 2 (ванилин) и пик 1 (п-гидроксибензальдегид). Пик 5 был идентифицирован с помощью масс-спектрометрии высокого разрешения, и предполагается, что это может быть 1-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-7-(4-гидрокси-3-метоксифенил)-1,4,6-гептадиен-3-он. В настоящее время не хватает эталонных стандартов, поэтому необходимы дальнейшие исследования и подтверждения. Измерение содержания феруловой кислоты, деметоксикуркумина, деметоксикуркумина и куркумина показало, что стандартный отвар куркумина, деметоксикуркумина, двойного деметоксикуркумина и феруловой кислоты, приготовленный из сырья куркумы в Дали, Юньнань, был выше, чем в образцах из Ибиня и Лэшаня, Сычуань. Это также служит ориентиром для выбора сырья для производства на предприятии.
В настоящее время существует множество исследований, посвященных спектру отпечатков пальцев и определению содержания куркумы, но они в основном сосредоточены на характеристике и определении летучих масел и компонентов куркумина, и недостаточно изучены компоненты с относительно высокой растворимостью в воде. В данном исследовании с помощью UPLC определяется спектр отпечатков пальцев стандартного отвара куркумы и одновременно определяются четыре эффективных ингредиента, что дает важные рекомендации для улучшения стандартов качества лекарственного сырья куркумы, а также для установления стандартов качества продукции для гранул формулы куркумы традиционной китайской медицины и классических препаратов формулы. Этот метод прост в эксплуатации, стабилен и надежен, обладает хорошей повторяемостью.