Скрининг противоаллергических активных компонентов из Cornus officinalis и их влияние на дегрануляцию клеток RBL-2H3
Аллергические заболевания - одна из болезней, которую Всемирная организация здравоохранения включила в список ключевых исследований и профилактики в 21 веке. Уровень заболеваемости в мире достиг 20%~30%, поэтому поиск эффективных противоаллергических препаратов является актуальным направлением исследований. В настоящее время существует множество противоаллергических химических препаратов, но большинство из них имеют характеристики однократного действия и значительные побочные эффекты. Растительные экстракты представляют собой сложные смеси природных соединений различной структуры и происхождения, обладающие многоцелевой противоаллергической способностью, воздействующие на различные ключевые этапы аллергических реакций, имеющие мягкое действие и минимальные побочные эффекты. Китай обладает богатыми ресурсами традиционной китайской медицины, что обеспечивает хорошую основу для исследования противоаллергических природных веществ.

Cornus officinalis Sieb. et Zucc. - лекарственное и съедобное растение в Китае, которое содержит циклогексеновые эфиры терпенов и их гликозиды, тритерпеноиды, флавоноиды и другие вещества. Согласно теории традиционной китайской медицины, растение обладает хорошим питательным действием и широко используется для лечения синдрома дефицита, болезней печени и почек, а также заболеваний репродуктивной системы. Cornus officinalis обладает разнообразной биологической активностью, такой как противоаллергическая, противовоспалительная, антиоксидантная, противодиабетическая, противоостеопорозная, сосудорасширяющая и другие активности.

Ким и др. обнаружили, что водный экстракт Cornus officinalis может подавлять аллергические реакции легких в моделях астмы, вызванной OVA, и обладает определенным противоаллергическим действием. Као и др. обнаружили, что препарат традиционной китайской медицины, содержащий Cornus officinalis, может эффективно облегчить симптомы аллергической астмы, вызванной аллергеном Der-p, и снизить уровень IgE в сыворотке крови. Ли и др. обнаружили, что препараты традиционной китайской медицины, содержащие Cornus officinalis (на долю Cornus officinalis приходится 11%), оказывают значительное ингибирующее действие на кожный зуд, реакцию PCA и дисфункцию кожи. Атопический дерматит - это аллергическое заболевание кожи. Mechesso et al. сообщили, что экстракт C2RTPL (формула, состоящая из Cornus officinalis: Rose multiflora: Леспедеца: Platycodon grandiflorus: Каштан в соотношении 4:1:1:1:1) может улучшить симптомы атопического дерматита и уменьшить высвобождение β-аминоглюкозидазы в зависимости от концентрации, что указывает на его противоаллергическую активность. Quah et al. обнаружили, что 70% этанольный экстракт Cornus officinalis может уменьшить высвобождение анти DNP IgE индуцированной β - аминоглюкозидазы, что указывает на его противоаллергическое действие.

В настоящее время нет сведений о конкретных компонентах экстракта Cornus officinalis, обладающих противоаллергическим действием. Поэтому, основываясь на предыдущих исследованиях, в данной статье мы продолжим изучение противоаллергических активных ингредиентов Cornus officinalis с целью выявления точных компонентов, обладающих противоаллергической активностью в Cornus officinalis. Аллергические реакции делятся на типы I, II, III и IV в зависимости от их механизмов, вызываемых химическими медиаторами, такими как гистамин, простагландины, лейкотриены, факторы воспаления и т.д. Исследования показали, что подавляющее большинство аллергических заболеваний I типа связано с активностью гиалуронидазы (HAase) в организме, а HAase является одним из целевых ферментов, непосредственно контролирующих дегрануляцию тучных клеток (относящихся к IV типу аллергических реакций). Поэтому эксперименты по ингибированию гиалуронидазы и ингибированию дегрануляции тучных клеток широко используются в антиаллергических исследованиях in vitro.

В данной статье используется активность ингибирования гиалуронидазы в качестве индикатора для поиска противоаллергических компонентов в Cornus officinalis. Далее противоаллергическая активность компонентов была исследована с помощью МТТ-анализа и эксперимента по ингибированию клеточной дегрануляции, и был получен компонент с наибольшей противоаллергической активностью. Наконец, газовая хроматография-масс-спектрометрия (ГХ-МС) была использована для анализа и идентификации компонентов с противоаллергической активностью в Cornus officinalis, обеспечивая научную основу для комплексного развития и использования противоаллергических активных компонентов в Cornus officinalis.

 

 

В этой статье сравнивается ингибирующая активность гиалуронидазы различных полярных частей Cornus officinalis и обнаруживается, что петролейная эфирная часть Cornus officinalis обладает значительно более высокой активностью, чем другие части, что указывает на то, что вещества с меньшей полярностью в Cornus officinalis обладают более высокой противоаллергической активностью. По данным Li et al., экстракт формулы традиционной китайской медицины, содержащей Cornus officinalis, показал 70% ингибирование гиалуронидазы при концентрации 3 мг/мл, что указывает на хорошую противоаллергическую активность. Однако компонент COPE-8, выделенный с помощью колоночной хроматографии на силикагеле в данном исследовании, показал уровень ингибирования гиалуронидазы более 70% при концентрации всего 2,5 мг/мл, что свидетельствует о более высокой противоаллергической активности.

После активации тучные клетки выделяют и высвобождают медиаторы и факторы воспаления, которые вызывают аллергические реакции. Этот процесс называется дегрануляцией тучных клеток и является важным звеном в возникновении аллергии в организме. Среди выделяемых провоспалительных медиаторов гистамин является наиболее характерным и эффективным вазоактивным медиатором и считается маркером дегрануляции. Поэтому в данном эксперименте противоаллергическая активность четырех активных компонентов оценивалась по их влиянию на высвобождение гистамина и β-глюкозидазы. Компонент COPE-8, обладающий наилучшей активностью, снижал уровень высвобождения гистамина и β-глюкозидазы на 46% и 39% соответственно при 20 мк г/мл, в то время как экстракт C2RLP, состоящий в основном из Cornus officinalis, снижал уровень высвобождения β-глюкозидазы только на 24% при 30 мк г/мл. Кроме того, 70% этанольного экстракта Cornus officinalis снижал уровень высвобождения β - глюкозидазы только на 18% при 30 мк г/мл, что дополнительно демонстрирует преимущества компонента COPE-8 в противоаллергической активности.

В данном исследовании впервые изучены противоаллергические активные ингредиенты Cornus officinalis с акцентом на активность ингибирования гиалуронидазы. Путем систематического разделения и очистки экстракта Cornus officinalis был получен компонент COPE-8, обладающий значительным ингибированием активности гиалуронидазы и клеточной дегрануляции. Он может значительно снизить высвобождение гистамина и β - аминоглюкозидазы, индуцированное носителем ионов кальция A23187, и превосходит по этому показателю сырые или формульные экстракты Cornus officinalis, что указывает на его сильную противоаллергическую активность. С помощью ГХМС-анализа было установлено, что противоаллергические активные вещества в COPE-8 представлены в основном терпеноидами, включая α - кумаринол, β - кумаринол и спирт периллы, которые также обладают противовоспалительным и антиоксидантным действием, что указывает на их широкий спектр биологической активности.

Таким образом, компонентами Cornus officinalis, обладающими противоаллергической активностью, являются альфа-циннамиловый спирт, бета-циннамиловый спирт и спирт периллы, которые обладают сильной противоаллергической активностью, противовоспалительной и антиоксидантной биологической активностью и имеют широкие перспективы применения.