Сравнительное исследование качества Paeonia lactiflora и продуктов ее переработки с использованием спектра характеристик ВЭЖХ в сочетании с определением содержания
Белый пион - это сухой корень Paeonia lactiflora Pall, растения семейства Ranunculaceae. Он горький, кислый и слегка холодный по своей природе. Возвращается к меридианам печени и селезенки. Питает кровь и регулирует меридианы, тонизирует инь и останавливает потоотделение, смягчает печень и снимает боль, а также успокаивает печеночный ян. Используется при недостатке крови и пожелтении кожи, нарушениях менструального цикла, спонтанной потливости, ночных потах, болях в ребрах, животе, спазмах конечностей, головной боли и головокружении. Основным действующим веществом Paeonia lactiflora являются общие глюкозиды Paeonia lactiflora (TGP). TGP - это смесь паэонифлорина, паэонифлорина, бензоил паэонифлорина и других компонентов, которая обладает противовоспалительным, иммунорегулирующим и гепатопротекторным действием. Жареный белый пион и винный белый пион - это продукты переработки белого пиона. Современные фармакологические исследования показали, что фармакологические эффекты обработанного белого пиона в целом усиливаются, а обезболивающий эффект обработанных продуктов более значителен, чем у сырых продуктов, что полностью подтверждает важность обработки белого пиона. Национальные стандарты обработки китайской медицины содержат методы обработки винного белого пиона, белого пиона, обжаренного с помешиванием, и белого пиона, обжаренного с землей; в "Цзинъюэ цюаньшу" и "Десяти лекциях по опыту лекарств" Цзяо Шудэ говорится об использовании белого пиона, обжаренного с помешиванием. После обжаривания белого пиона его охлаждающие свойства ослабевают, он питает кровь и коллатерали, снимает боль в селезенке и может использоваться для лечения диареи и болей в животе, вызванных недостатком селезенки или дисгармонией печени и селезенки. В книге "Бянь Цюэ Синь Шу" впервые был предложен метод "обжаривания белого пиона в вине", а в "Тан Е Бэнь Цао" говорится, что вымачивание белого пиона в вине в меридиане может облегчить центральную боль в животе; в "Сборнике лечебной медицины" говорится, что "тем, кто избегает среднего холода, следует жарить в вине" и "жарить в вине для питания инь". После обжаривания с вином из белого пиона его кислая и холодная природа может быть уменьшена, и он хорошо гармонизирует средний, медленный и срочный. Его часто используют при болях в ребрах, животе, особенно послеродовых болях в животе.

Фумигация серой является широко используемым методом для предотвращения заражения насекомыми, роста плесени и продления срока хранения традиционных китайских лекарственных материалов. Однако фумигация серой может вызвать чрезмерное содержание SO2 в некоторых традиционных китайских лекарственных материалах, что приводит к изменению эффективных ингредиентов и их содержания, снижению их эффективности и даже превращению их в "яд", серьезно влияя на качество и безопасность традиционных китайских лекарственных материалов. Современные исследования обработки Paeonia lactiflora показали, что фумигация серой может привести к снижению содержания паэонифлорина в Paeonia lactiflora. Предполагается, что фумигация серой может превращать часть паэонифлорина в новый компонент - сульфит паэонифлорина, тем самым снижая содержание паэонифлорина.

На основе стандарта 2020 года издания Китайской фармакопеи для лекарственного сырья и продуктов переработки Paeonia lactiflora в данном исследовании были получены характерные спектры Paeonia lactiflora, вина Paeonia lactiflora, Paeonia lactiflora stir fried и Paeonia lactiflora sulfur smoked с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии HPLC и определены шесть активных ингредиентов: галловая кислота, катехины, паэонифлорин, паэонифлорин, 1,2,3,4,6-пентагаллоил глюкоза и бензоил паэонифлорин; одновременно измерить содержание шести активных ингредиентов, упомянутых выше, в белом пионе, винном белом пионе, жареном белом пионе и копченом белом пионе, и оценить качество белого пиона, продуктов переработки и серного копчения с помощью расчета сходства характеристических спектров и хемометрических методов анализа. Данная работа является справочным материалом для идентификации и оценки качества белого пиона, продуктов переработки и серных копченостей.

Приготовление тестового раствора. В данном исследовании изучалась эффективность экстракции различными концентрациями метанола и этанола с помощью однофакторного анализа. Хроматографический пик "общая площадь пика/размер образца" использовался в качестве индекса оценки характерного спектра, а общее содержание галловой кислоты, катехинов, паэонифлорина, паэонифлорина, 1,2,3,4,6-пентагаллоил глюкозы и бензоил паэонифлорина использовалось в качестве индекса определения содержания. В качестве растворителя для экстракции был выбран разбавленный этанол. Было проведено сравнительное исследование двух методов экстракции: нагревание под рефлюксом и ультразвуковая обработка, и было установлено, что различные методы экстракции не оказывают значительного влияния на эффективность экстракции Paeonia lactiflora. Поэтому, учитывая простоту работы, была выбрана ультразвуковая обработка; в то же время было исследовано время ультразвуковой обработки образцов (15, 30, 45 минут), и было установлено, что 30 минут ультразвуковой обработки могут полностью извлечь различные компоненты. На основании вышеизложенных исследований было установлено, что наилучшим методом приготовления тестового раствора белого пиона является обработка 50 мл разбавленного этанола ультразвуком (мощность 250 Вт, частота 40 кГц) в течение 30 минут.

Создание и анализ карт характеристик. Результаты исследования характеристических спектров показывают, что в ВЭЖХ-спектрах белого пиона, жареного белого пиона и винного белого пиона имеется 6 общих пиков, а в ВЭЖХ-спектрах серокопченого белого пиона - 7 общих пиков. В связи с использованием приборов Agilent, Waters и Thermo разных производителей для определения образцов с целью сокращения рабочего времени и повышения эффективности работы, даже при использовании одной и той же хроматографической колонки время удерживания хроматографических пиков в характеристическом спектре может отличаться из-за различий в мертвом объеме приборов разных производителей. Если пик 4 принять за пик S и рассчитать относительное время удерживания, то относительное время удерживания каждого характерного пика будет относительно стабильным. Пик 7 образуется после фумигации Paeonia lactiflora серой, которая, предположительно, является сульфитом паэонифлорина. Шесть характерных компонентов Paeonia lactiflora, жареной Paeonia lactiflora и винной Paeonia lactiflora были идентифицированы с помощью эталонных стандартов, а именно: галловая кислота, катехины, паэонифлорин, паэонифлорин, 1,2,3,4,6-пентагаллоил глюкоза и бензоил паэонифлорин. Анализ OPLS-DA выявил три дифференциальных биомаркера, указывающих на значительные изменения в пике 7, пике 4 (паэонифлорин) и пике 5 (1,2,3,4,6-пентагаллоил глюкоза) после обработки и фумигации Paeonia lactiflora серой.

Изменения химического состава пиона молочноцветкового (Paeonia lactiflora) после обжаривания с перемешиванием, винного обжаривания и серного окуривания. Результаты определения содержания шести известных компонентов в белом пионе, жареном белом пионе, винном белом пионе и белом пионе, окуренном серой, показали, что, кроме галловой кислоты, остальные пять компонентов претерпели изменения различной степени. После обжаривания и винной обжарки содержание паэонифлорина в белом пионе уменьшилось, а лактона паэонифлорина и бензоила паэонифлорина - увеличилось. Это может быть связано с превращением паэонифлорина в паэонифлорин лактон и бензоил паэонифлорин во время обработки белого пиона; после фумигации серой содержание паэонифлорина снизилось, что, предположительно, вызвано превращением белого пиона в паэонифлорин сульфит после фумигации серой. Катехины нестабильны при воздействии тепла. Поэтому процессы жарки и обжарки в вине значительно снизили содержание катехинов в белом пионе, в то время как процесс фумигации серой не показал значительных изменений в содержании катехинов из-за отсутствия явного теплового воздействия. Кроме того, после обжарки вина и окуривания серой содержание 1,2,3,4,6-пентагаллоилглюкозы значительно увеличилось, что, как предполагается, связано с каталитическим действием тепла и некоторых химических компонентов во вспомогательных материалах при обработке Paeonia lactiflora, которые способствуют превращению 1,2,3,4,6-пентагаллоилглюкозы. Конкретный механизм требует дальнейшего изучения.

Согласно теории традиционной китайской медицины, должны существовать различия в клиническом применении различных продуктов переработки традиционной китайской медицины, которые связаны с различиями в их внутреннем химическом составе. Paeonia lactiflora обладает такими свойствами, как питание крови, питание инь, защита печени и снятие спазмов. После обжаривания с помешиванием ее охлаждающие свойства ослабевают, а селезеночный и болеутоляющий эффекты усиливаются. После обжаривания в спирте кислое и холодное свойства уменьшаются, а умеренный и срочный эффекты усиливаются. Это может быть связано с уменьшением содержания паэонифлорина в Paeonia lactiflora, увеличением содержания гликозидных лактонов и бензоила паэонифлорина. Хотя серная фумигация Paeonia lactiflora может предотвратить появление насекомых, предотвратить появление плесени и гнили, чрезмерная серная фумигация приводит к значительному снижению содержания паэонифлорина, что может быть связано с превращением части паэонифлорина в паэонифлорин сульфит, что серьезно влияет на лекарственное сырье. Качество отвара должно строго контролироваться, поэтому процесс фумигации серы должен строго контролироваться. На последующем этапе будут проведены дальнейшие исследования процесса серной фумигации Paeonia lactiflora, изучено влияние различных степеней серной фумигации на эффективные компоненты Paeonia lactiflora и определен оптимальный процесс серной фумигации.