Исследование спектральной зависимости содержания общих полифенолов и общих антрахинонов в ревене и его антиоксидантной активности in vitro
В 1956 году Харман предложил теорию свободнорадикального старения, согласно которой окислительные реакции являются основной причиной, вызывающей биологическое старение и различные заболевания. Свободные радикалы образуются в основном в результате утечки электронов из митохондриальных дыхательных цепей или катализируются ферментативными реакциями, включая свободные радикалы кислорода и другие свободные радикалы. Некоторые активные вещества могут прямо или косвенно воздействовать на свободные радикалы, чтобы обратить вспять их окислительные атаки на клетки организма. В настоящее время синтетические антиоксиданты, такие как бутилгидроксианизол, дибутилгидроксиметиловый эфир и пропилгаллат, обладают определенной цитотоксичностью. Поэтому поиск эффективных и малотоксичных антиоксидантов из продуктов питания, специй и натуральных продуктов также привлекает большое внимание. Метод DPPH и метод ABTS могут быть использованы для определения большого количества образцов и определения антиоксидантной способности гидрофильных и липофильных веществ. Поэтому необходимо искать эффективные и малотоксичные антиоксиданты из натуральных продуктов. Ревень - традиционное китайское лекарственное растение, происходящее из Polygonaceae Rheum palmatum L. и Rheum tanguticum Maxim. Высушенные корни и корневища ревеня бывшего Balf. или лекарственного Rheum officinale Baill. в основном содержат свободные и связанные производные антрахинона, танины, гликозиды стилбена, полифенолы и другие компоненты, которые обладают фармакологическими эффектами, такими как диарейный, антибактериальный, гемостатический и антиоксидантный. Предыдущие исследования показали, что эмодин -8-O - β - D-глюкозид и общее количество антрахиноновых гликозидов положительно коррелируют с антиоксидантной активностью in vitro. Восемь компонентов, включая галловую кислоту, катехины или эпикатехины, а также 2-О-циннамоил-галлоил глюкозу, обладают сильной способностью к выжиганию свободных радикалов ABTS.
Традиционный метод скрининга активных соединений часто включает в себя разделение, очистку и т.д., что, несомненно, увеличивает трудоемкость, требует больших затрат и времени. В настоящее время для скрининга активных ингредиентов в традиционной китайской медицине широко используется метод спектрально-эффекторной зависимости. Речь идет о создании спектров отпечатков пальцев и фармакологических экспериментов, с использованием математического обеспечения и компьютерных технологий для связи "спектров" и "эффектов". Этот метод соответствует теоретической системе традиционной китайской медицины и восполняет недостатки химических спектров отпечатков пальцев в контроле качества традиционной китайской медицины. Корреляция между качественными и количественными характеристиками спектров отпечатков пальцев традиционной китайской медицины и результатами исследования биологической активности китайских лекарственных материалов может быть использована для создания математического выражения для оценки качества китайских лекарственных материалов. Таким образом, в данном исследовании был определен "спектр" с помощью метода ВЭЖХ, а также установлен антиоксидантный "эффект" in vitro с помощью метода DPPH и метода ABTS. Общее содержание полифенолов и общее содержание антрахинонов в 20 партиях ревеня были определены для изучения взаимосвязи между химическим составом ревеня и его антиоксидантной активностью in vitro, чтобы получить потенциальную группу антиоксидантных активных ингредиентов ревеня.

Общее содержание антрахинона в 20 партиях кусочков отвара ревеня составляет 1,06 ± 0,08 ~ 4,82 ± 0,12 мг/г, а общее содержание полифенолов - 4,92 ± 0,21 ~ 10,12 ± 0,11 мг/г. 20 партий ломтиков ревеня можно разделить на четыре категории, а именно: уезд Лунси и уезд Линтао, уезд Даньчан и уезд Ли, уезд Мин и уезд Чжан и уезд Вэйюань. Пики 7 (8-O-глюкозид эмодина алоэ), 1, 10 (реин), 2 и 9 (эмодин алоэ) обладают активностью, направленной на уничтожение свободных радикалов DPPH, а пики 7, 2, 9, 10, 3, 8, 12 (эмодин) и 14 (метиловый эфир эмодина) - активностью, направленной на уничтожение свободных радикалов ABTS. Это согласуется с изменениями площади пиков при антиоксидантной хроматографии in vitro, что указывает на то, что антиоксидантный эффект ревеня является результатом совместного действия нескольких компонентов. Пик 10 (реин) показал положительную корреляцию со степенью поглощения свободных радикалов ABTS, а пик 7 (эмодин 8-O-глюкозид алоэ) - отрицательную. Это может быть связано с тем, что общий пик 10 (реин) может образовывать полную большую π - сопряженную систему. В растворе этанола комплексы реина могут быть нестабильны и склонны к образованию свободнорадикальных промежуточных продуктов, что приводит к высокой степени ингибирования и положительной корреляции. Пик 7 (8-O-глюкозид алоэ эмодина) относительно стабилен в растворе этанола и менее склонен к образованию свободнорадикальных промежуточных соединений, что приводит к более низкой скорости ингибирования и отрицательной корреляции. Существует отрицательная корреляция между пиками 2 и 11 по активности поглощения свободных радикалов ABTS. Эти два соединения, скорее всего, не содержат гидроксильных групп, обеспечивающих активный водород, или содержат их в меньшем количестве. Свободнорадикальная активность ABTS зависит от структуры молекулы соединения, а количество и расположение фенольных гидроксильных групп являются основными факторами, влияющими на антиоксидантную активность. Чем больше активных водородов, тем сильнее антиоксидантная способность. Таким образом, в рамках данного проекта планируется дальнейшее совершенствование идентификации и характеристики неизвестных общих пиков, упомянутых выше, с целью дальнейшего выяснения фармакологических основ антиоксидантного эффекта вне корпуса лютеиновой кислоты.
В данном эксперименте учитывается нестабильность полифенольных компонентов и выбирается ультразвуковая экстракция, чтобы избежать потери компонентов в условиях высокой температуры. Сравнение компонентов со значительными изменениями площади хроматографического пика, последующая проверка антиоксидантов проводилась путем приготовления жидкофазного разделения мономеров. Методы ЖХ-МС и ядерного магнитного резонанса были использованы для идентификации выделенных продуктов и уточнения роли отдельных компонентов, что также является направлением будущих исследований. Корреляция между качественными и количественными характеристиками спектров отпечатков пальцев традиционной китайской медицины и результатами исследования биологической активности лекарственных материалов может быть использована для создания математического выражения для оценки качества традиционной китайской медицины. На основе составления карты отпечатков пальцев ревеня и определения качественных и количественных характеристик общего содержания антрахинона и общего содержания полифенолов в отваре ревеня в данной статье установлена зависимость между спектром и эффектом антиоксидантной активности за пределами лютеинового тела, уточнены эффективные группы ревеня для уничтожения свободных радикалов DPPH и ABTS, а также определены компоненты ревеня, оказывающие антиоксидантное действие, такие как галловая кислота, эмодин и метиловый эфир эмодина. Это создает теоретическую основу для скрининга и выделения активных компонентов антиоксидантных веществ ревеня из разных регионов его произрастания.