Исследование разделения и получения антоцианов из зеленой шелковицы методом высокоскоростной противоточной хроматографии и их антиоксидантной активности
Тутовник, как плод тутового дерева семейства тутовых, богат питательными веществами и обладает различными эффектами, такими как противораковый, антиоксидантный, обезболивающий и противовоспалительный, а также красота черных волос. Зеленая шелковица, также известная как желтая шелковица, относится к незрелым ягодам шелковицы. В традиционной китайской медицине зеленые ягоды шелковицы легче собирать, транспортировать и хранить, чем зрелые, а содержание антоцианов, катехинов и эпикатехинов в них гораздо выше, чем в зрелых ягодах шелковицы. В стране и за рубежом проводились исследования по извлечению и выделению антоцианов из различных растений, таких как виноградные косточки, розы, кукурузный шелк, клюква, какао-бобы и т.д. Liu et al. использовали смолу LSA-10 для обогащения и очистки антоцианов из боярышника; Chen Wenliang et al. использовали мембранное разделение и фильтрацию для отделения олигомерных антоцианов из виноградных косточек, в результате чего получили содержание 65% олигомерных антоцианов, но не получили мономерных компонентов разделения; Glavnik et al. проанализировали антоцианы в японском тигровом тростнике с помощью высокоэффективной тонкослойной хроматографии и выделили мономеры, декамеры и антоцианы типа В из его сырого экстракта. Однако этот метод сложен в подготовке; Sun et al. использовали полупрепаративную высокоэффективную жидкостную хроматографию для разделения антоцианов из виноградных косточек, но предварительная обработка была сложной, а выход разделения - низким; В данной статье выбрана высокоскоростная противоточная хроматография (ВПХХ), которая обладает большой разделительной способностью, может использоваться для подготовки и разделения партий, проста в эксплуатации и имеет высокую эффективность разделения.
Процианидины (ПК), являясь одним из видов полифенольных соединений, широко представлены в растениях. В основном они состоят из катехинов, эпикатехинов (ЭК), эпигаллокатехинов (ЭГК) и эпикатехиновых галлатов (ЭКГ) и обладают сильной антиоксидантной активностью. Цель данной работы - использовать высокоскоростную противоточную хроматографию для разделения и очистки антоцианов из ягод зеленой шелковицы. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) будет использована для идентификации химических компонентов каждого компонента и анализа их чистоты. Изучение способности сжигать радикалы DPPH, ABTS+-радикалы и гидроксильные радикалы в каждом компоненте позволяет судить о силе их антиоксидантной способности. Данная работа расширяет рамки глубокой переработки и использования шелковицы, дает направление для промышленного производства антоцианов в зеленой шелковице и имеет определенное справочное значение для развития и использования шелковицы в качестве лекарственного сырья.

‍

Используя зеленую шелковицу в качестве сырья, сырой экстракт был получен путем экстракции, обезжиривания, удаления примесей и экстракционного обогащения в экспериментальных условиях. Оптимальной системой растворителей для выделения и очистки ГСКЦ была н-гексан-этилацетат-вода (1:20:20, V/V/V). 200 мг сырого экстракта антоцианов зеленой шелковицы были разделены на пять компонентов методом ГСКК, а именно F1 (28,5 мг), F2 (10,43 мг), F3 (6,85 мг), F4 (10,65 мг) и F5 (13,65 мг). Каждый компонент содержал катехины, антоцианин B2, антоцианин A1 и т.д. Среди них F4 содержит эпигаллокатехин галлат с чистотой 95,05%; F5 содержит катехины с чистотой 73,75%. Все выделенные компоненты обладают определенной антиоксидантной активностью. Если использовать Vc в качестве контроля, то способность к поглощению свободных радикалов DPPH выглядит следующим образом: Vc>F5>F4>F2>F3>F1>сырой экстракт зеленой шелковицы; способность к отщеплению свободных радикалов ABTS+: Vc>F5>F4>F2>F3>F1>сырой экстракт зеленой шелковицы; способность к вымыванию гидроксильных радикалов: F1>F5>Vc>F4>F2>сырой экстракт зеленой шелковицы>F3. HSCCC имеет большую емкость для приготовления препарата и не содержит упаковочного материала в хроматографической колонке. В этом эксперименте сырой экстракт можно разделить один раз, чтобы получить пять компонентов, а некоторые компоненты имеют высокую чистоту мономерных веществ и сильную антиоксидантную активность. Содержащиеся в статье исследования открыли новые идеи для получения антоцианов и обеспечили теоретическую поддержку для изучения лекарственной эффективности антоцианов в зеленой шелковице.