Изоляция, скрининг и идентификация эндофитных бактерий лимона с холестериноснижающей активностью in vitro
С развитием технологий и повышением уровня жизни людей все большее внимание уделяется гиперлипидемии и повышенному уровню холестерина. Согласно статистике, число смертей от сердечно-сосудистых заболеваний, вызванных гиперлипидемией, в мире ежедневно составляет около 4000. В Китае число смертей от сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний, вызванных гиперлипидемией, таких как атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, гипертония и инсульт, ежегодно увеличивается на 12%. Для того чтобы уменьшить возникновение многих осложнений, вызванных ожирением, в последние годы все больше исследований направлено на снижение уровня липидов в крови с помощью диетотерапии для уменьшения частоты заболеваний. В зарубежной литературе предпринимались попытки использовать молочнокислые бактерии в сочетании с диетой для регулирования аномального жирового обмена. В то же время другие исследования пришли к выводу, что полезная молочная кислота может напрямую улучшить комбинированные проблемы со здоровьем - жировую массу и непереносимость глюкозы, тем самым улучшая состояние ожирения.

Согласно результатам многочисленных исследований, различные виды пробиотиков, содержащиеся в микроорганизмах, обладают эффектом снижения уровня холестерина и улучшения микробиоты кишечника. Например, TMC3115 может улучшить микробиоту кишечника, а также глюкозу и липидный профиль пожилых людей. И было подтверждено, что липидоснижающий эффект и улучшение микробиоты кишечника прямо или косвенно связаны с микробной активностью, причем липидоснижающая активность зависит от типа микроорганизмов. Например, в ходе исследования микробиоты кишечника пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени было установлено, что в настоящее время медикаментозная терапия остается наиболее важным методом. Однако сочетание пробиотиков и других препаратов также может оказать хороший эффект на улучшение микробиоты кишечника и снижение уровня холестерина. В настоящее время имеется мало сообщений о лечении неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП).

Лимон (L.) Burm f.)， Это цитрусовое растение, принадлежащее к семейству Рутовые (Rutaceae) порядка Двудольные (Dicotyledonous), также известное как фрукт Йиму (Yimu). Он происходит из Юго-Восточной Азии и в настоящее время является одним из основных районов производства в Китае, расположенном в городе Ибинь, провинция Сычуань. Лимон, независимо от того, употребляется ли он в качестве традиционного китайского лекарства или фрукта, обладает кислым и вяжущим вкусом. Он легче воспринимается, когда превращается в ферментированный сок. В последние годы исследования в области ферментов в Китае только начинаются, постоянно вводятся новые политические меры, законы и правила. Однако исследований по прямой переработке китайского лекарственного сырья в напитки практически нет. В данном эксперименте предполагается использовать микробную технологию для переработки лимона с помощью методов ферментации, культивирования и выделения пробиотиков, идентификации выделенных штаммов и скрининга на липидоснижающую активность для достижения цели отбора пробиотиков с липидоснижающей функцией. Это может послужить теоретической основой для применения пробиотиков, снижающих уровень холестерина, на более позднем этапе.

 

В данном эксперименте в качестве субстрата использовался холестерин, а для определения скорости деградации холестерина эндофитными бактериями лимона применялась высокоэффективная жидкостная хроматография с последующей идентификацией по последовательностям генов 16S или 26S рДНК. Было отобрано 17 штаммов бактерий, у которых скорость деградации холестерина превышала 25%. Результаты идентификации показали, что 16 штаммов дрожжей и 1 штамм Acetobacter, а именно Candida albicans, Pichia pastoris, дрожжи Уикхема, Pichia pastoris и Acetobacter cloacae, соответственно.
В 1963 году лаборатория Шейпера обнаружила, что у некоторых племен Африки уровень холестерина в сыворотке крови снижается после употребления большого количества молочных продуктов, ферментированных лактобактериями. Исследования показали, что обычные животные выделяют больше холестерина с фекалиями, чем стерильные, а когда обоих животных одновременно кормят пищей с высоким содержанием холестерина, содержание холестерина в крови стерильных животных в два раза выше, чем у обычных. Это позволяет предположить, что микробиота кишечника может влиять на всасывание холестерина в кишечнике. К настоящему времени большое количество экспериментов подтвердило, что различные виды молочнокислых бактерий обладают эффектом снижения уровня холестерина, среди которых Lactobacillus acidophilus является наиболее многочисленным материалом.
В ходе этого эксперимента были отобраны многочисленные штаммы дрожжей и Acetobacter, обладающие эффектом снижения уровня холестерина, что позволит получить больше бактериальных штаммов для разработки липидоснижающих ферментированных продуктов или лекарств на более поздней стадии.