Исследование противовоспалительного эффекта и механизма действия Sophora alopecuroides на воспаление, вызванное липополисахаридом, в клетках RAW264.7
Воспаление - это защитная реакция, которая возникает, когда организм подвергается атаке или заражению вредными внутренними и внешними раздражителями, такими как патогенные микроорганизмы. Это вызывает иммунный ответ для защиты организма. Когда иммунная система чрезмерно или постоянно активирована, это может привести к ряду заболеваний, связанных с воспалением, таких как ревматоидный артрит, воспалительные заболевания кишечника, опухоли и т. д., что в конечном итоге приводит к постоянному или временному воспалению. Макрофаги играют центральную роль в инициировании, поддержании и ослаблении воспалительных реакций, а их постоянное накопление и активация свидетельствуют о хроническом воспалении. Липополисахарид (ЛПС) может активировать макрофаги и способствовать выделению ими медиаторов воспаления, таких как фактор некроза опухоли альфа (TNF - α), интерлейкин-1 β (IL-1 β), интерлейкин-6 (IL-6), оксид азота (NO) и др. Чрезмерное высвобождение этих медиаторов воспаления может привести к повреждению органов и хроническим заболеваниям. NF - κ B играет важную роль в регуляции таких процессов, как клеточный апоптоз и воспалительный ответ, и является важной мишенью для противовоспалительной терапии.

Sophora alopecuroides L, также известная как Sophora alopecuroides, - это растение, принадлежащее к семейству Leguminosae рода Sophora. Оно распространено в различных провинциях северо-западного Китая и странах Центральной Азии и обладает функциями очищения от жара и детоксикации, снятия боли и воспаления, осушения сырости и прекращения дизентерии. Это важное лекарственное растение в северо-западном регионе Китая. Софора алопекуровидная в основном содержит алкалоиды, флавоноиды, органические кислоты, полисахариды, летучие масла, стероиды, фенолы и другие компоненты. Алкалоиды обладают противовоспалительным, противораковым, антибактериальным и иммунорегулирующим действием, флавоноиды - противовоспалительным, противовирусным, антиоксидантным действием, а полисахариды - иммунорегулирующей и противоопухолевой функциями, которые могут эффективно повышать иммунитет организма и играть важную роль в противоопухолевом и иммунном стимулировании. Все вышеперечисленные исследования основаны на определенной группе химического состава Sophora alopecuroides, а традиционная китайская медицина обладает свойствами многокомпонентного, многоцелевого и многопутевого комбинированного воздействия, что позволяет достичь такого же или даже лучшего терапевтического эффекта при меньших дозах лекарств, включая эффективную совместимость частей и эффективную совместимость ингредиентов. Поэтому необходимо изучить, могут ли различные группы химического состава Sophora alopecuroides повысить эффективность. В данной статье мы использовали LPS-индуцированные клетки RAW 264.7 клетки в качестве модели воспаления для скрининга противовоспалительных препаратов в Sophora alopecuroides, и исследуется обычный водный экстракт отварки (WDE), водный ультразвуковой экстракт (WUE), 75% этанол рефлюкс экстракт (ERE), 75% этаноловый ультразвуковой экстракт (EUE), а также общий экстракт алкалоидов (TAE), общий экстракт флавоноидов (TFE), общий экстракт полисахаридов (TPE) Sophora alopecuroides и их девять комбинаций из различных эффективных частей. Изучены противовоспалительный эффект и механизм действия (1:1:1, 1:2:2, 1:3:3, 2:1:2, 2:2:3, 2:3:1, 3:1:3, 3:2:1, 3:3:2, 3:3:2).

Макрофаги участвуют в иммунном ответе организма. При стимуляции ЛПС макрофаги запускают сигнальные пути (такие как NF - κ B), способствующие выработке провоспалительных медиаторов, таких как NO, TNF - α, IL-1 β, IL-6 и др. Чрезмерная выработка NO тесно связана с возникновением воспаления. Повышение уровня TNF - α и IL-6 может способствовать секреции клетками большего количества провоспалительных цитокинов. IL-6 является важным провоспалительным цитокином, который может вызывать активацию В- и Т-клеток и участвовать в иммунном ответе организма. ИЛ-1 β повышается при остром или хроническом воспалении. Результаты данного исследования показали, что после обработки ЛПС RAW 264.7 значительно увеличивается высвобождение NO, TNF - α, IL-6 и IL-1 β, что свидетельствует об успешном создании модели воспаления in vitro. Sophora alopecuroides WDE, WUE, EUE, ERE и их TAE, TFE, TPE могут подавлять производство NO, TNF - α, IL-6 и IL-1 β в клетках RAW 264.7, стимулированных ЛПС, среди которых TFE, EUE, ERE ингибирующий эффект TAE более значителен После смешивания TFE и TPE в различных соотношениях было обнаружено, что они могут подавлять высвобождение TNF - α в разной степени. Среди них, за исключением комбинаций 1:1:1 и 1:1:2, остальные семь комбинаций оказывали лучшее ингибирующее действие на высвобождение TNF - α, чем при использовании одной комбинации. Комбинация 2:1:2 обладала наилучшим ингибирующим действием, демонстрируя значительный синергетический эффект.

Для изучения молекулярного механизма противовоспалительной активности Sophora alopecuroides в данном исследовании использовали ВБ для определения экспрессии ключевых белков IkB α, NF - κ B p65, а также p-IkB α, p-NF - κ B p65 в сигнальном пути NF - κ B. NF - κ B является ключевым регуляторным фактором воспаления, который может регулировать транскрипцию многих ключевых медиаторов воспаления, таких как IL-1 β, IL-6, TNF - α и др. ЛПС связывается с рецепторами TLR4 и активирует сигнальный путь NF - κ B, который является важным звеном в побуждении макрофагов к высвобождению медиаторов воспаления. При стимуляции клеток ингибирующий белок IkBa, связывающийся с NF - κ B, быстро фосфорилируется до p-IkB α под действием киназы IkB α, высвобождая активный p-NF - κ B p65 в ядро, тем самым способствуя синтезу и секреции факторов, связанных с воспалением. В последние годы появилось множество сообщений о противовоспалительном действии алкалоидов, флавоноидов и полисахаридов. Например, исследования показали, что алкалоиды Sophora flavescens могут ослаблять LPS-индуцированное воспаление в макрофагах RAW 264.7 путем ингибирования фосфорилирования IkB α и ядерной транслокации p-NF - κ B p65. Zhao et al. обнаружили, что общие алкалоиды Sophora flavescens могут облегчить колит, вызванный сульфатом декстрана, путем ингибирования активации NF - κ B. Исследования показали, что флавоноиды в традиционной китайской медицине могут снижать уровень фосфорилирования белков IkB α и p65 в сигнальном пути NF - κ B и оказывать противовоспалительное действие. Ли и др. обнаружили, что флавоноиды Sophora flavescens могут оказывать иммуномодулирующее действие на язвенный колит путем ингибирования активации сигнального пути JAK2/STAT3, а полисахариды Cistanche могут ингибировать активацию сигнального пути JAK2/STAT3. Активация NF - κ B MAPK и STAT3 используется для ингибирования LPS-индуцированного воспаления в макрофагах RAW 264.7, а исследование Qu et al. показало, что полисахариды из Pinus koraiensis могут ингибировать LPS-индуцированное воспаление путем регулирования сигнального пути Nrf2/HO-1. В настоящее время существует относительно мало исследований, посвященных влиянию комбинации алкалоидов, флавоноидов и полисахаридов на воспаление. Данное исследование показало, что при использовании комбинации TAE, TFE и TPE в Sophora alopecuroides фосфорилирование белков NF - κ B p65 и IkB α значительно снижалось, а экспрессия белков p-IkB α и p-NF - κ B p65 подавлялась. Это указывает на то, что комбинация общей биомассы Sophora alopecuroides, общих флавоноидов и общих полисахаридов может облегчить LPS-индуцированное воспаление в макрофагах RAW 264.7 путем ингибирования активации пути NF - κ B.

Таким образом, в данном исследовании сравнивалась противовоспалительная активность обычных WDE, WUE, EUE, ERE и их различных эффективных частей TAE, TFE, TPE и девяти комбинаций (1:1:1, 1:2:2, 1:3:3, 2:1:2, 2:2:3, 2:3:1, 3:1:3, 3:2:1, 3:3:2) Sophora alopecuroides in vitro. Было установлено, что комбинация TAE, TFE, TPE (2:1:2) оказывает наилучшее ингибирующее действие на LPS-индуцированное воспаление в клетках RAW 264.7, а также оказывает противовоспалительное действие in vitro путем ингибирования активации NF - κ B воспалительного пути. Этот эксперимент только завершил скрининг противовоспалительных препаратов на клеточном уровне, и только проверил совместимость комбинаций различных фармакологических частей Sophora alopecuroides. Однако остаются проблемы, такие как сложный химический состав, неясные фармакологические компоненты и материальная основа их действия, которые требуют дальнейших исследований.