Выделение, обогащение и исследование активности ингибитора альфа-глюкозидазы из сливы Цзиньлу
α - глюкозидаза (AG) - это фермент, тесно связанный с диабетом. Он может метаболизировать углеводы в глюкозу, фруктозу и галактозу, которые могут быть поглощены и использованы человеческим организмом в организме. α - ингибитор глюкозидазы (AGI) может блокировать комбинацию AG и сахара и снизить уровень сахара в крови путем конкурентного ингибирования активности AG. В последние годы, с увеличением числа пациентов с диабетом, эффективные ингредиенты китайских и тибетских препаратов постепенно увеличиваются в клиническом применении для лечения диабета. Натуральные ингибиторы α-глюкозидазы обладают такими преимуществами, как стабильная эффективность, безопасность, малые побочные эффекты и т.д., становясь горячей точкой в исследовательской области медицины.
Potentilla fruticosa L. - листопадное кустарниковое растение, принадлежащее к семейству Rosaceae и роду Potentilla, распространенное в основном в высокогорных районах Цинхай-Тибетского нагорья. Корни, стебли, листья, цветы и ветви Jin Lu Mei обладают сильной фармакологической активностью. Листья широко используются в качестве добавок в пищевые продукты и косметику, а экстракты корней и стеблей обладают сильными иммунорегулирующими свойствами, причем более сильными, чем у Ci Wu Jia; экстракт ветвей съедобен, а эксперименты in vitro показали, что он обладает хорошей активностью в снижении уровня холестерина и глюкозы в крови. Предыдущие исследования нашей исследовательской группы по химическому составу Primulaceae показали, что флавоноидное соединение кверцетин-7-О - β - D-глюкуронид было впервые выделено в Primulaceae и обладает активностью ингибитора альфа-глюкозидазы.
Методы разделения и очистки растительных флавоноидов в основном включают адсорбцию на смоле, высокоэффективную жидкостную хроматографию и т.д. Метод адсорбции смолы широко используется для обогащения флавоноидов благодаря таким его преимуществам, как большая площадь поверхности, большая адсорбционная емкость, хорошая селективность, длительный срок службы смолы и низкие эксплуатационные расходы. В данном исследовании использовался метод макропористой адсорбционной смолы (AB-8) для обогащения и ингибирования АГ активности соединения кверцетин-7-O - β - D-глюкуронида в Prunus mume, что обеспечивает теоретическую основу для комплексного развития и использования природных ингибиторов α - глюкозидазы в Prunus mume.

В данной статье в качестве объекта исследования взято тибетское лекарство Jin Lu Mei, и с помощью полупрепаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии DAC-50 и высокоэффективной жидкостной хроматографии впервые выделено целевое гипогликемическое соединение высокой степени чистоты из Jin Lu Mei. Разработан метод выделения мономерных соединений кверцетина-7-O - β - D-глюкуронида из Цзинь Лу Мэй. Химические компоненты, присутствующие в Цзиньлу Мэй, экстрагировали этанолом 75%. Экстракционный раствор был разделен и сегментирован с помощью колоночной хроматографии AB-8 с 0, 10%, 20%, 30%, 40% и 50% водно-этанольными растворами. Соединения были предварительно классифицированы на основе их полярности, и в основном были выделены и получены мономерные соединения в элюенте 20% AB-8 Jinlumei.
В результате структурного анализа соединения было установлено, что оно является флавоноидным соединением. Результаты определения активности и идентификации типа ингибитора этого соединения показали, что кверцетин-7-O - β - D-глюкуронид является конкурентным ингибитором, с самой высокой степенью ингибирования 94,67%. Это указывает на то, что соединение обладает сильной конкурентоспособностью в связывании с АГ, значительно снижая связывание АГ с сахарами, что согласуется с результатами предыдущих исследований. С помощью метода компьютерного молекулярного докинга была изучена возможная модель связывания соединения с АГ, а также исследован возможный механизм действия. Три бензольных кольца флавоноидного материнского ядра соединения образуют стабильное состояние связывания с белковыми остатками АГ через π - π сопряженные связи, π - алкильные связи, π - σ сопряженные связи, водородные связи и т.д., тем самым снижая уровень глюкозы в крови. Это соединение обладает хорошей α - глюкозидазной ингибирующей активностью, что указывает на то, что Jinlumei имеет потенциал для разработки препаратов для лечения диабета, и обеспечивает научную теоретическую основу для исследования и разработки гипогликемических фармацевтических ингредиентов Jinlumei.