Оценка качества цветков лотоса различного происхождения на основе спектра отпечатков пальцев в сочетании с методом распознавания химических образов
Спящий лотос - многолетнее водное травянистое растение семейства Нимфейные (Nymphaeaceae), произрастающее в Или, Алтае, Боху и других районах Синьцзяна. Высушенные цветочные почки спящего лотоса, как широко используемое лекарственное растение в уйгурской медицине, были включены в том "Уйгурская медицина" Стандартов лекарственных средств Министерства здравоохранения Китайской Народной Республики. Они обладают такими свойствами, как снижение температуры, облегчение кашля, очищение от жара и детоксикация, успокоение ума, и могут использоваться для лечения головной боли, кашля, вызванного лихорадкой, острого и хронического ветряного шока у детей, вызванного лихорадкой. Спящий лотос в основном содержит флавоноиды и фенольные соединения. Современные фармакологические исследования показали, что он обладает различными биологическими активностями, такими как антиоксидантная, противовоспалительная, гипогликемическая, противовирусная и др. Для того чтобы лучше контролировать качество китайских лекарственных трав, в данном исследовании предполагается использовать спектр отпечатков пальцев в сочетании с методом распознавания химических образов для проведения многокомпонентного определения содержания, всестороннего анализа различий в составе китайских лекарственных трав в различных областях производства, уточнения различий в областях производства и характерных компонентов, обеспечения ссылки для идентификации и формулировки стандарта качества китайских лекарственных трав, а также заложить основу для дальнейшего развития и использования.

Выбор растворителя для экстракции. В лекарственном растении "Спящий лотос" много химических компонентов и различных свойств. Для того чтобы лучше отразить на хроматограмме информацию о химических компонентах, содержащихся в лекарственной траве, в данной статье было изучено большое количество литературы, и в качестве растворителей для экстракции в данном эксперименте были выбраны метанол, метанол 50% и этанол. При использовании метанола 50% и этанола в качестве растворителей для экстракции, в результате анализа спектров отпечатков 15 партий "Спящего лотоса" было обнаружено, что существует 23 общих пика при длине волны 273 нм. Пик 1 хорошо разделял галловую кислоту и имел большую площадь пика, поэтому он был использован в качестве эталонного пика. При длине волны 350 нм наблюдалось 17 общих пиков, среди которых были идентифицированы 4 компонента: дубильная кислота, гликозид фейерверка, гликозид пурпурного облака и кверцетин. Между тем, была проведена оценка сходства спектров отпечатков пальцев 15 партий образцов, и результаты показали хорошее сходство с контрольными спектрами отпечатков пальцев. Малое количество пиков приводит к неполной экстракции. Путем всестороннего анализа различных факторов был определен оптимальный метод экстракции с использованием метанола в качестве растворителя.

Выбор длины волны детекции. В данном исследовании использовался детектор на диодной матрице для сканирования спектра отпечатков пальцев цветка лотоса на полную длину волны (190-800 нм). На основании представленного 3D-спектра видно, что хроматографическое разделение пиков высокое, симметрия пиков хорошая, базовая линия стабильная, а мощность пиков большая при длинах волн 273 нм и 350 нм. Полученный спектр тестового раствора может отображать более богатую информацию. Поэтому в качестве длин волн для измерений были выбраны 273 и 350 нм.

Выбор условий хроматографирования. Исследовано влияние метанола и ацетонитрила в качестве подвижных фаз на спектр отпечатков пальцев цветков лотоса. При использовании метанола и ацетонитрила в качестве подвижных фаз для изократического анализа эффективность разделения низкая. Чтобы добиться лучшего разделения каждого хроматографического пика, используется градиентное элюирование. По сравнению с метанолом и ацетонитрилом в качестве подвижной фазы, на хроматограмме отпечатков пальцев можно получить больше хроматографических пиков. При сравнении хроматограмм, полученных с использованием двух различных подвижных фаз, было обнаружено, что эффективность разделения при использовании ацетонитрила выше, чем при использовании метанола. Поэтому в качестве подвижной фазы для данного исследования был выбран ацетонитрил.
Оценка аналитических методов. Анализируя спектры отпечатков 15 партий цветков спящего лотоса, было обнаружено 23 общих пика при длине волны 273 нм. Пик 1 хорошо разделяет галловую кислоту и имеет большую площадь пика, поэтому он был использован в качестве эталонного пика. При длине волны 350 нм наблюдалось 17 общих пиков, среди которых были идентифицированы 4 компонента: дубильная кислота, гликозид фейерверка, гликозид пурпурного облака и кверцетин. Между тем, была проведена оценка сходства спектров отпечатков пальцев 15 партий образцов, и результаты показали хорошее сходство с контрольными спектрами отпечатков пальцев. Комбинация ВЭЖХ-спектров отпечатков пальцев и кластерного анализа, PCA, OPLS-DA может быть использована для кластеризации и компонентного дискриминационного анализа лекарственного сырья различного происхождения и партий. В данном исследовании использовались химические методы распознавания образов для проведения кластерного анализа, PCA и OPLS-DA для классификации лекарственной травы Nelumbo nucifera. Результаты анализа, проведенного тремя методами, совпали. Пятнадцать партий Nelumbo nucifera были разделены на четыре категории при длине волны 273 нм, причем различия в основном отражались в пиках 17, 1, 4, 15, 20, 23, 3, 6, 2 и 21. Среди них пик 1 - галловая кислота, пик 15 - пуэрарин, а пик 20 - кверцетин. При длине волны 350 нм он делится на три категории, причем различия проявляются в основном в отборе пиков 14, 1, 13, 7, 8, 11, 10 и 2. Среди них пик 14 - это кверцетин, пик 7 - гликозид фейерверка, а пик 8 - гликозид пурпурного облака. Эти компоненты могут служить основными характерными компонентами для различения и идентификации качества лекарственного сырья лотоса из разных районов производства. Наша исследовательская группа продолжит углубленные исследования неизвестных дифференциальных компонентов, чтобы предоставить более полный справочник для оценки качества лекарственного сырья лотоса.