Эффективное выделение и очистка нового фибринолитического фермента из плодового тела гриба бархатный пант
Тромбоэмболические заболевания характеризуются высокой инвалидизацией и смертностью. Фибрин является основным компонентом тромбов, поэтому стимулирование деградации фибрина является одним из распространенных способов профилактики и лечения тромботических заболеваний. Экзогенные фибринолитические ферменты, такие как урокиназа (UK) и стрептокиназа (SK), широко используются в клиническом лечении тромбоэмболических заболеваний благодаря их способности косвенно или напрямую гидролизовать фибрин. Несмотря на значительную тромболитическую эффективность, они также имеют определенные ограничения в применении, такие как короткий период полураспада и значительные побочные эффекты. Поэтому поиск новых фибринолитических ферментов с высокой специфичностью, высокой безопасностью и низким уровнем побочных эффектов стал актуальным направлением исследований.

Съедобные грибы богаты белками, полисахаридами, терпенами, аминокислотами, стеринами, нуклеозидами и другими веществами, которые обладают различными физиологическими функциями, такими как антиоксидантная, противоопухолевая, иммунная и нейронная регуляция. В настоящее время широкое внимание уделяется изучению фибринолитических ферментов, полученных из съедобных грибов, и их функциональных свойств. Сообщается, что фибринолитические ферменты были выделены и экстрагированы из различных съедобных грибов, таких как Lentinus edodes, Cordyceps Militaris, Agrocybe aegerita, Tricholoma sejunctum, Lepista nuda, Pleurotus ferulae и др.

Пантовый гриб - это древесно-разлагающийся съедобный и лекарственный гриб, широко распространенный в умеренных регионах Северного полушария. Он обладает такими физиологическими функциями, как антиоксидантная, иммуноукрепляющая, противоопухолевая и понижающая уровень липидов в крови. В ходе предварительных экспериментов было установлено, что экстракт плодового тела гриба бархатный пант содержит плазмин высокой активности, что значительно выше, чем плазмин из других источников съедобных грибов. В данной статье представлен метод выделения и очистки фибринолитического фермента из плодового тела бархатного пантового гриба, а также проведена предварительная идентификация фермента. В настоящее время наша исследовательская группа не встречала других сообщений, связанных с фибринолитическим ферментом в грибах бархатного панты. Данное исследование может послужить основой для проведения тромболитических и антитромботических функциональных тестов фибринолитического фермента гриба бархатного панты, а также заложить теоретическую основу для его использования в разработке функциональных продуктов питания.

В данном исследовании из плодового тела гриба бархатный пант был выделен и очищен фибринолитический фермент с использованием современной технологии хроматографического разделения. N-концевая последовательность двенадцати аминокислот фибринолитического фермента представляет собой Gly Ala Val Thr Gln Asn Ala Pro Trp Gly Leu. После сравнения с базой данных NCBI фибринолитический фермент был идентифицирован как новый фибринолитический фермент. Удельная активность фибринолитического фермента составляет 4105,78 Ед/мг, коэффициент очистки - 206,09, а коэффициент восстановления активности - 30,91%. С помощью электрофореза Native PAGE и электрофореза SDS-PAGE было установлено, что относительная молекулярная масса фибринолитического фермента составляет 30,9 кДа. Приведенные выше результаты свидетельствуют о том, что новый фибринолитический фермент, полученный из плодового тела гриба бархатный пант, обладает хорошим тромболитическим потенциалом и может быть использован для разработки функциональных продуктов питания для снижения склонности к тромбофилии.