Исследование иммуноадъювантного эффекта сапонинов из Panax ginseng и Panax ginseng
Сапонины - это стероидные или тритерпеноидные гликозиды, широко представленные в некоторых растениях, которые при дальнейших исследованиях стали использоваться в качестве растительного адъюванта в вакцинах. Исследования показали, что пероральный прием сапонинов обладает определенным адъювантным эффектом. Например, пероральный прием ресвератрола может усилить иммунный эффект овальбумина (OVA), а пероральный прием гинзенозидов из стеблей и листьев женьшеня может значительно повысить титры специфических IgG и подклассов в сыворотке крови мышей, которым вводили вакцину против ящура, стимулировать пролиферацию лимфоцитов селезенки, повысить экспрессию мРНК соответствующих генов и усилить ответные эффекты. Сапонины корней Radix Pseudostellaria fibroblast roots (RPFRS) - это активные ингредиенты, выделенные из корней женьшеня Pseudostellaria heterophylla, которые обладают эффектами повышения иммунитета, антиоксидации и стрессоустойчивости организма. В настоящее время основной корень женьшеня используется в качестве лекарственного средства, а корневой шелк выбрасывается, что приводит к большим потерям. Исследования показали, что среднее содержание общих сапонинов в корневом шелке женьшеня Panax в 1,14 раза больше, чем в корневом клубне. Предварительные эксперименты исследовательской группы показали, что экстракт женьшеня и женьшеневой бороды Panax ginseng, содержащий сапонины в качестве одного из своих компонентов, способен усиливать иммунный ответ мышей с поврежденным иммунитетом и оказывает значительное регулирующее действие на иммунитет. Предполагается, что он может усиливать иммунный ответ организма на антигены. Однако существует мало сообщений о влиянии сапонинов из Panax ginseng и Panax ginseng на содействие антигенному иммунитету в организме. В исследованиях часто используется OVA в качестве модельного антигена для проверки эффективности адъювантов. Модельные антигены, индуцированные OVA, вызывают более высокий IgG-ответ, также улучшается пролиферативная способность клеток селезенки мыши, а также экспрессия мРНК цитокинов IL-4, IL10, IL-12, IFN - γ, транскрипционных факторов GATA-3 и T-bet. Таким образом, в данном эксперименте был изучен иммуноадъювантный эффект перорального введения RPFRS на OVA-модели антигена иммунизированных мышей и определены соответствующие иммунологические показатели для изучения иммуноадъювантного эффекта и возможного механизма действия RPFRS на OVA-модель антигена. Это дает теоретическую основу для дальнейшего поиска эффективных, нетоксичных и безопасных иммунных адъювантов традиционной китайской медицины.

 

T. В-клетки могут распознавать антигены, активировать иммунную систему организма и активировать пролиферацию клеток. Способность вызывать эффективный иммунный ответ Т- и В-лимфоцитов может быть продемонстрирована путем стимуляции реакций пролиферации лимфоцитов. Гинзенозиды из стеблей и листьев женьшеня могут повысить эффективность вакцины против ящура и стимулировать пролиферацию лимфоцитов при стимуляции ConA и LPS, соответственно; сапонины Panax notoginseng могут значительно усилить пролиферацию клеток селезенки, индуцированную ConA, LPS и OVA у мышей, иммунизированных OVA. Результаты этого эксперимента показали, что группа Z может синергетически способствовать пролиферации лимфоцитов селезенки мышей с помощью ConA, а группы Z и G могут более значительно синергетически способствовать пролиферации клеток селезенки мышей с помощью LPS и OVA, что указывает на то, что RPFRS может усилить гуморальный и клеточный иммунитет, способствуя пролиферации клеток селезенки, и оказывает влияние на повышение жизнеспособности Т и В клеток у иммунизированных OVA мышей.

NK-клетки обладают естественной киллинговой функцией, а активация врожденного иммунитета организма может способствовать выделению NK-клеток, играя решающую роль в аутоиммунных заболеваниях. Ли и др. обнаружили, что гинзенозид Rb1 может снижать киллинговый эффект NK-клеток, подавляемый дазатинибом. Результаты этого эксперимента показывают, что группа RPFRS может улучшить активность NK-клеток в определенной степени, а низкие дозы RPFRS более эффективны, что приводит к более высокой степени уничтожения YAC-1. Это доказывает, что RPFRS может усилить клеточный иммунный процесс иммунных OVA мышей и повысить их неспецифическую иммунную функцию.

Th-клетки включают в себя Th1-клетки (продуцирующие IFN - γ, IL-2 и т.д.) и Th2-клетки (продуцирующие IL-4, IL-6, IL-10 и т.д.). Th1-клетки могут активировать провоспалительные реакции, способствовать активации макрофагов и пролиферации CTL-клеток; Th2 способствуют активации, пролиферации и выработке антител B-клетками, а баланс между Th1 и Th2 регулирует иммунный ответ организма. Результаты эксперимента показали, что уровень цитокинов IL-2, IL-4, IL-10 и IFN - γ увеличился в группе RPFRS, что говорит о том, что RPFRS может способствовать развитию иммунитета Th2 и Th1 типов, увеличивать секрецию цитокинов и таким образом способствовать укреплению иммунитета организма. Из этого видно, что пероральный прием RPFRS оказывает стимулирующее действие на оба типа иммунитета, что может обеспечить более широкие возможности для его клинического применения.

На выработку подклассов антител в организме влияют различные цитокины. Цитокины Th1 способствуют выработке IgG2a B-клетками, а цитокины Th2 - выработке IgG1 организмом. Sun et al. обнаружили, что сочетание протопанаксадиола и триоловых сапонинов с OVA может повысить уровень специфических антител IgG иммунизированных мышей к OVA. Компонент AJS75, входящий в состав общих сапонинов из коры акации, также значительно усиливает иммунный потенциал OVA и активирует Th1/Th2-ответ у мышей. Результаты этого эксперимента показывают, что каждая доза группы RPFRS может увеличить содержание специфических антител IgG к OVA и их подклассов больше, чем группа OVA, что указывает на то, что RPFRS может способствовать развитию иммунитета Th1 и Th2 типов, стимулировать секрецию специфических антител в организме, что согласуется с результатами, приведенными в вышеуказанной литературе.

T-bet и GATA-3 тесно связаны с дифференциацией Th1/Th2, и они могут влиять на динамический баланс между Th1/Th2, регулируя секрецию цитокинов и экспрессию мРНК. Исследование Су показало, что гинзенозиды Rg1 и Re могут усиливать иммунный ответ мышей, вызванный OVA, путем увеличения экспрессии мРНК соответствующих цитокинов, таких как IFN - γ. Эксперимент, проведенный Ванг и др. на мышах, показал, что комбинация общих сапонинов из стеблей и листьев женьшеня и селена может действовать как адъювант для иммунного ответа аттенуированной вакцины против бешенства путем увеличения экспрессии мРНК T-bet/GATA-3. Результаты этого эксперимента показывают, что средняя доза RPFRS может значительно увеличить экспрессию IL-4мРНК, высокая доза RPFRS может значительно увеличить экспрессию IL-10мРНК, и все группы RPFRS могут в некоторой степени увеличить экспрессию T-bet, GATA-3 и соотношение T-bet/GATA-3, что указывает на то, что RPFRS может способствовать производству Th1/Th2 ответа путем стимулирования экспрессии соответствующих цитокинов и мРНК транскрипционных факторов, тем самым усиливая клеточную иммунную функцию организма и усиливая ответ организма на OVA.

Субпопуляция Т-лимфоцитов отражает общий клеточный иммунный статус организма. Количество CD3+, CD4+, CD8+T-клеток и баланс соотношения CD4+/CD8+ может указывать на иммунный статус организма, среди которых CD4+ и CD8+T-клетки в основном опосредуют клеточный иммунитет. Qi et al. обнаружили, что гинзенозид Rh2 и его основные метаболиты R-PHQ и S-PHQ могут усилить иммунный ответ мышей с ослабленным иммунитетом, вызванным циклофосфамидом, предотвращая атрофию иммунных органов, способствуя пролиферации клеток селезенки и восстанавливая соотношение CD4+/CD8+. Результаты этого эксперимента показывают, что по сравнению с группой OVA каждая группа RPFRS может значительно увеличить количество CD3+, CD8+T-клеток и соотношение CD4+/CD8+. Группы D и Z могут значительно увеличить количество CD4+T-клеток, что указывает на то, что RPFRS обладает эффектом балансировки организма, усиления Т-клеточного иммунитета и повышения иммунного ответа.
Результаты, полученные по вышеуказанным показателям, свидетельствуют о том, что RPFRS может усиливать гуморальный и клеточный иммунный ответ мышей, иммунизированных OVA, а также генерировать более устойчивый ответ и улучшать иммунную функцию мышей по сравнению с контрольными мышами, иммунизированными OVA. Это доказывает, что RPFRS обладает хорошим потенциалом в качестве иммунного адъюванта. В эксперименте различные дозы сапонинов женьшеня Panax показали преимущества по определенным показателям, поэтому для определения оптимальной концентрации необходим дальнейший скрининг. В то же время конкретные эффективные компоненты и механизмы действия сапонинов женьшеня до конца не выяснены и нуждаются в дальнейших исследованиях.