Исследование ВЭЖХ-спектров и распознавание химических образов тритерпеноидов в кожуре Poria cocos и Poria cocos
Пория кокосовая, также известная как футу, фулинг, сонфу и т. д., - это сушеный гриб рода Poria cocos (Schw.) семейства Волчьи. Он обладает сладким и легким вкусом, мягким характером и может быть обнаружен в меридианах сердца, легких, селезенки и почек. Он способствует проникновению воды, укрепляет селезенку и успокаивает сердце. Фулинг включен в Фармакопею Китайской Народной Республики издания 2020 года (далее - "Китайская фармакопея") и является одним из Четырех сокровищ и Восьми сокровищ традиционной китайской медицины, известных как "Десять формул и Девять линь". Основными фармакологическими веществами Poria cocos являются полисахариды Poria cocos и тритерпеноиды Poria cocos. Современные фармакологические исследования показали, что тритерпеноиды Poria cocos обладают мочегонным, противоопухолевым, иммунорегулирующим, противовоспалительным, антивозрастным, гипогликемическим и липидоснижающим действием, и в настоящее время являются важными показателями, характеризующими качество и эффективность Poria cocos. В настоящее время основные сорта Poria cocos, циркулирующие на рынке, являются культивированными сортами, и различное происхождение, методы обработки и спецификации ломтиков Poria cocos могут повлиять на качество лекарственного сырья и ломтиков Poria cocos. В издании Китайской фармакопеи 2020 года для идентификации и контроля качества лекарственного сырья Poria cocos и коры Poria cocos используется только тонкослойная хроматография, что не позволяет в полной мере отразить их качество. Анализ отпечатков пальцев является одним из общепризнанных и широко используемых методов контроля качества традиционной китайской медицины в области современной китайской медицины. Он обладает такими преимуществами, как высокая целостность и сильные характеристики, и соответствует комплексному воздействию множества компонентов в традиционной китайской медицине. Он обладает потенциалом для дальнейшей идентификации, распознавания и классификации. Химическое распознавание образов может анализировать многомерную информацию спектров отпечатков пальцев, точно отражать качественные различия лекарственных материалов и достигать цели общего описания и разумной оценки качества лекарственных материалов. Целью данного исследования является создание ВЭЖХ спектров отпечатков пальцев Poria cocos (полученного из эпидермиса Poria cocos) и Poria cocos (полученного из очищенной части Poria cocos), а также анализ влияния каждого общего пика на спектры отпечатков пальцев с помощью методов распознавания образов. Выявление основных и характерных пиков позволит оценить различия в различных химических веществах между Poria cocos и Poria cocos в целом, что послужит основой для контроля качества лекарственного сырья Poria cocos.

В данном исследовании использовали метанол в качестве экстракционного растворителя и ультразвуковую обработку в течение 30 минут для изучения различных подвижных фаз (ацетонитрил - вода, ацетонитрил-0,1% - вода с муравьиной кислотой, ацетонитрил-0,1% - вода с фосфорной кислотой, ацетонитрил-0,2% - вода с фосфорной кислотой, ацетонитрил-0.3% фосфорнокислая вода), различные хроматографические колонки [Agilent 5 TC-C18 (2) (250 мм × 4,6 мм, 5 мкм), Welch Ultimate XB-C18 (250 мм × 4,6 мм, 5 мкм), Agilent Eclipse Plus C18 (250 мм × 4.6 мм, 5 мкм)], различные объемные скорости потока (1,0, 1,1, 1,2 мл/мин), различные температуры колонок (22, 25, 28 ℃), и различные длины волн сбора (203, 210, 242)]. В конечном итоге было определено влияние нм на спектр отпечатков пальцев, и хроматографические условия были определены следующим образом: ацетонитрил 0,3% фосфорная кислота вода в качестве подвижной фазы, Agilent 5 TC-C18 (2) (250 мм × 4,6 мм, 5 мкм) хроматографическая колонка, с объемной скоростью потока 1,0 мл/мин, температура колонки 25 ° C, и переменной длины волны сбора. В этих условиях базовая линия стабильна, форма хроматографического пика хорошая, а эффект разделения хороший.
На основании этого методом ВЭЖХ было получено 14 партий спектров отпечатков пальцев Poria cocos и Poria cocos различного происхождения. В общей сложности 15 общих пиков были откалиброваны в общем режиме спектров отпечатков Poria cocos и Poria cocos, и 6 химических компонентов были идентифицированы по химическим эталонам: Poria cocos acid B, dehydrofumaric acid, Poria cocos acid A, dehydrofumaric acid, Poria cocos acid и Poria cocos acid. В результате кластерного анализа 14 партий образцов кожи и белого Poria cocos различного происхождения в сочетании с данными о сходстве можно сделать вывод о наличии значительных различий между группами образцов Poria cocos из разных лекарственных частей и небольших различий внутри групп. Корреляция между образцами белого Poria cocos и происхождением очень сильная. Поэтому для распознавания образов был использован метод PCA без надзора, и результаты PCA разделили 15 общих пиковых переменных на 2 главные компоненты Y1 и Y2. Y1 - это комплексная реакция 7 общих хроматографических пиков, включая компоненты дегидрофумаровой кислоты, дегидропористой кислоты и пористой кислоты, что указывает на то, что 7 общих хроматографических пиков необходимы для изучения спектров отпечатков пальцев кожи пории кокос и белой пории кокос; Y2 - комплексная реакция из 8 хроматографических пиков, включая кислоту B Poria cocos, кислоту A Poria cocos и кислоту Poria cocos, что указывает на то, что эти 8 хроматографических пиков могут служить характерными идентификационными пиками для кожи Poria cocos при одновременной оценке качества кожи Poria cocos и Poria cocos. Параметры переменных общих пиков, оказывающие значительное влияние на спектр отпечатков, - это 1, 2 (кислота B кожи Poria cocos) и хроматографический пик 7. Разница в содержании 15 общих пиковых компонентов в Poria cocos меньше, чем в коже Poria cocos. На самом деле, содержание этих 15 общих компонентов пиков в белом Poria cocos намного ниже, чем в коже Poria cocos. Для того чтобы сделать общий рисунок кожи Poria cocos и отпечатка белого Poria cocos более полным и измеримым, в приготовлении белого Poria cocos был добавлен этап концентрации.
Исследования показали, что метод, разработанный в данной статье, является простым, надежным и точным, и может служить основой для оценки качества, разработки стандартов и рационального использования Poria cocos и Poria cocos.