A Zhejiang Fritillaria és a Hubei Fritillaria közötti minőségi különbségek vizsgálata HPLC-ELSD ujjlenyomat és többkomponensű mennyiségi meghatározás alapján
A Fritillaria thunbergii Miq., a liliomfélék családjába tartozó Fritillaria thunbergii Miq. növény szárított hagymája a "Zhejiang nyolc ízének" csúcsán szerepel, és a Kínai Népköztársaság gyógyszerkönyvének (a továbbiakban: "Kínai Gyógyszerkönyv") különböző kiadásaiban is szerepel. A növényt betakarítják, megmossák, megnedvesítik, vastag szeletekre vágják és szárítják, amikor a növény kora nyáron elszárad; Xi "Zhe Bei Pian"-nak nevezi. A Zhejiang Fritillaria funkciói a hőtisztítás, a váladék feloldása, a köhögés enyhítése, a méregtelenítés és a csomók eloszlatása, valamint a karbunkulus megszüntetése. Klinikailag a szélhő, a flegma tüzes köhögés, a tüdőtályog, a mell tályogja és a sebek kezelésére használják.

A Hubei Fritillaria a liliomfélék családjába tartozó Fritillaria hupehensis Hsiao et K.C. Hsiao szárított hagymája. Fő funkciói a hő és a váladék eltávolítása, a köhögés enyhítése és a gócok eloszlatása. A klinikai gyakorlatban gyakran használják olyan tünetek kezelésére, mint a tüdőhő- és a váladékköhögés. Mind a Zhejiang Fritillaria, mind a Hubei Fritillaria a Fritillaria nemzetséghez tartozik, és hagyományos kínai gyógyszerként gyógyászati célokra használható; mindkettő hatóanyaga alkaloid, de típusuk eltérő. A Zhejiang Fritillaria fő hatóanyagai közé tartozik a Fritillaria A, Fritillaria B, IsoFritillaria A stb. A Hubei Fritillaria fő hatóanyagai közé tartozik a Fritillaria A, Fritillaria B, Hubeijia, Hubeiyi, Hubeixin stb.; Ezért a Zhejiang Fritillaria és a Hubei Fritillaria farmakológiai hatásai között bizonyos különbségek vannak. A 2020-as Kínai Gyógyszerkönyvben a gyógynövények kategóriájában a Zhejiang Fritillaria és a Hubei Fritillaria külön szerepel, ami azt jelzi, hogy a két gyógynövény között bizonyos különbségek vannak.

A Fritillaria fajok széles választéka és árkülönbsége miatt a piacon a hamisított Fritillaria és a Hubei Fritillaria kölcsönös helyettesítésének vagy helyettesítésének jelensége figyelhető meg. A morfológiai, mikroszkópos és fizikai-kémiai azonosítás korlátai miatt nem lehet hatékonyan kimutatni a két gyógyászati anyag minőségének hasonlóságait és különbségeit. Ezért specifikusabb és pontosabb módszert kell kidolgozni a kettő hatékony megkülönböztetésére és megkülönböztetésére.

A Kínai Gyógyszerkönyv 2020-as kiadása meghatározza, hogy a Fritillaria thunbergii tartalom-meghatározási mutatói a Fritillaria A és a Fritillaria B, míg Hubei tartományban a Fritillaria thunbergii tartalom-meghatározási mutatója a Fritillaria B-t választja, és a Fritillaria thunbergii B tartalmi határértéke Hubei tartományban jelentősen magasabb, mint a Fritillaria thunbergii A és a Fritillaria thunbergii B összesített határértéke Zhejiang tartományban, ami objektív feltételeket biztosít a Fritillaria thunbergii hamisításához és felhasználásához. A hagyományos kínai orvoslás összetett kémiai összetételű rendszerével szemben egyetlen mennyiségi modell alkalmazása már nem elegendő a modern kínai orvoslás minőségellenőrzési igényeinek kielégítésére. Jelenleg kevés jelentés szól a kétféle Fritillaria hatóanyag-tartalom közötti különbségről. Ezért ebben a tanulmányban a HPLC-ELSD-módszert használták a Fritillariae Thunbergii Bulbus (FTB) és a Fritillariae Hupehensis Bulbus (FHB) Fritillariae thunbergii és a Fritillariae Hupehensis Bulbus ujjlenyomat-spektrumának megállapítására Hubeiban. Ugyanakkor öt azonos alkaloidkomponenst határoztak meg, és átfogó összehasonlító vizsgálatot végeztek a Fritillariae thunbergii és a Hubei esetében mind minőségi, mind mennyiségi szempontból, amely referenciát szolgáltatott a két gyógyászati anyag azonosításához és minőségértékeléséhez.

 

Az ujjlenyomat-spektrumok megállapítása és alkalmazása során a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii HPLC-ELSD ujjlenyomat-spektrumát a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii alkaloidkomponenseinek jellemzői alapján állapították meg. A hasonlósági értékelés eredményei azt mutatták, hogy az azonos Fritillaria thunbergii ujjlenyomat-spektrumai nagyon hasonlóak. Ezért az ujjlenyomat-spektrumok közös jellemzőként használhatók a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii minőségellenőrzési kutatásához. A két Fritillaria-típus ujjlenyomat-spektrumának különbségeit összehasonlítva látható, hogy a Fritillaria thunbergii ujjlenyomat-spektrumából egyértelműen hiányzik a Hubeijia pigment spektrumának csúcsa, vagy a Hubeijia pigmenttartalom rendkívül alacsony, ami megnehezíti a Fritillaria thunbergii kimutatását. Ezért a Hubeijia differenciális biomarkerként szolgálhat a Fritillaria két típusa, a Zhejiang Fritillaria és a Hubei Fritillaria megkülönböztetésére és megkülönböztetésére.

A közös csúcs területét változóként használva a HCA, PCA és OPLS-DA elemzéseket külön-külön végeztük el. A HCA és a PCA eredményei hatékonyan meg tudták különböztetni és megkülönböztetni a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii között, ami azt jelzi, hogy az ujjlenyomat, a HCA vagy a PCA kombinációja hatékony módszer a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii azonosítására. A Fritillaria thunbergii két típusa közötti kémiai összetételbeli különbségek további tisztázása érdekében OPLS-DA analízist alkalmaztunk négy különböző biomarker azonosítására. A különbségek szignifikanciája szerint a következőképpen sorolták őket: Fritillaria thunbergii>Peak 4>Berberine A>Berberine B, ami azt jelzi, hogy a két Fritillaria thunbergii típus között jelentős különbségek vannak a fenti komponensek tartalmában. Ez a különbség részben maguknak a gyógyászati anyagoknak a különbözőségéből adódik. Az eltérő eredet olyan tényezőkkel is szorosan összefügghet, mint a gyógynövények ültetési környezete és növekedési ciklusa.

A tartalom meghatározására szolgáló mutatók kiválasztása szempontjából a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii által tartalmazott alkaloidok elsősorban szteroid alkaloidokra és szteroid alkaloidokra oszthatók. A kutatás megállapította, hogy az alkaloidok különböző farmakológiai tevékenységekkel rendelkeznek, mint például köptető, köhögéscsillapító, asztma enyhítő, gyulladáscsökkentő és daganatellenes hatások, amelyek összhangban vannak a Zhejiang Fritillaria és a Hubei Fritillaria funkcionális jelzéseivel. A Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii HPLC-ELSD-ujjlenyomat-spektrumából öt azonos alkaloidot azonosítottak. A tartalom meghatározási eredmények azt mutatták, hogy az ibuprofén tartalmi különbségét kivéve a Fritillaria thunbergii másik négy komponensének, a Berberin A, Berberin B és IsoBerberin A tartalmában jelentős különbségek voltak. Közülük a Fritillaria thunbergii Berberin A tartalma szignifikánsan magasabb volt, mint a Fritillaria thunbergiié, míg a Berberin A, Berberin B és IsoBerberin A tartalma szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a Fritillaria thunbergiié. Ezért a Berberin A, Berberin A, Berberin B és IsoBerberin A tartalmának mérésével különbséget lehet tenni a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii között. A kapott kutatási eredmények alapvetően összhangban vannak az OPLS-DA elemzés eredményeivel. Vannak olyan szakirodalmi jelentések, amelyek szerint az alkaloidok tartalmában és arányában mutatkozó különbségek fontos tényezőt jelenthetnek, amelyek a Fritillaria thunbergii két fajtája közötti köhögés, váladékképződés, antibakteriális és gyulladáscsökkentő hatásbeli különbségekhez vezetnek. A több alkaloid egyidejű meghatározása nagy jelentőséggel bír a klinikailag orientált hagyományos kínai gyógyszerek, a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii minőségellenőrzése és értékelése szempontjából. Ezért ajánlott a berberin és az izoberberin meghatározásának növelése a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii gyógyászati anyagok minőségellenőrzésében.

Összefoglalva, ez a tanulmány HPLC-ELSD-ujjlenyomat-meghatározási módszereket hozott létre a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii számára, és egyidejűleg meghatározta öt alkaloid tartalmát, amelyek fontos referenciákat biztosíthatnak a Fritillaria thunbergii és a Fritillaria thunbergii gyógyászati anyagainak azonosításához és minőségellenőrzéséhez.