Az X-396 endofita gomba izolálása és azonosítása édesköményből, valamint az erjesztett termékében lévő lipidoldható komponensek elemzése
A növényi endofita gombák olyan gombák, amelyek általában jelen vannak az egészséges növényi szövetekben, de általában nem okoznak növényi betegségeket. A gazdanövényekkel együtt fejlődve stabil ökológiai kapcsolatokat alakítanak ki, és képesek a gazdanövénnyel azonos vagy attól eltérő bioaktív anyagokat termelni. A kutatások kimutatták, hogy szinte minden vizsgált növény tartalmaz endofita gombákat, beleértve a gyógynövényeket is. A gyógynövényekben található endofita gombák rendkívül nagyszámú és széles körű elterjedésű, feltörekvő mikrobiális erőforrásnak számítanak. Sokféle gazdanövény létezik, és a velük való kapcsolatuk rendkívül összetett. Különböző aktív termékeket képesek előállítani, és széleskörű fejlesztési és alkalmazási lehetőségekkel rendelkeznek. A gyógynövények lassú természetes regenerálódása, a hatóanyagok alacsony kivonási aránya és a túlzott emberi beavatkozás okozta csökkent biodiverzitás miatt a gyógynövényekben található endofita gombák és metabolitjaik mélyreható kutatása az egyik hatékony módja a ritka gyógynövények védelmének és a gyógyászati hatóanyagok nagyüzemi termelésének. Az elmúlt években a kutatók számos szerkezetileg újszerű és nagy hatóanyagú monomer vegyületet izoláltak az endofita gombák másodlagos anyagcseretermékeiből. A gombák anyagcseréjével nyert természetes termékek jelentős előnyökkel rendelkeznek a terméshozam, a gazdaságosság és a környezetvédelem terén a gyógynövényekkel szemben.

A tibeti gyógynövények, mivel nagy hőmérsékletkülönbségekkel, alacsony csapadékmennyiséggel, hosszú fényhatással és erős sugárzással rendelkező magashegyi területeken nőnek, egyedülálló hatóanyagokat és biológiai aktivitásokat tartalmaznak, így a természetes gyógyszerek vagy vezető vegyületek fontos forrásai. A Hypecoum leptocarpum Hook. f. et Thoms. tibeti gyógyszer a Papaveraceae családba tartozó Hypecoum nemzetséghez tartozó szárított egész növény. A tibeti gyógyszer neve "Balbada", amely keserű ízű és hideg jellegű. Hőtisztító, méregtelenítő, gyulladáscsökkentő és fájdalomcsillapító hatású. Elsősorban influenza, tüdőgyulladásos köhögés, ízületi fájdalom, torokfájás kezelésére, ételmérgezés enyhítésére használják, és alkalmas különböző lázat okozó fertőző betegségek kezelésére. Jelenleg ennek a gyógynövénynek a kutatása elsősorban a növényi erőforrásokra, a kémiai összetételre és a biológiai aktivitásra összpontosít, és kevés figyelmet fordítanak az endofita gombákra. Ezért a belőle származó aktív vegyületek bányászata nagy kutatási értékkel és tudományos jelentőséggel bír. Ebben a tanulmányban izoláltak és tisztítottak egy X-396 endofitikus gombát az édesköményből, és azonosították. Fermentációs termékének lipidben oldódó komponenseit GC-MS technológiával elemeztük, tumorellenes aktivitását pedig CCK-8 módszerrel vizsgáltuk. A jövőben várhatóan biztos adatalapot és referenciaértéket biztosít az édeskömény endofita gombakészleteinek hatékony hasznosításához és új daganatellenes aktív vezető vegyületek kifejlesztéséhez.

Ez a tanulmány GC-MS segítségével elemezte az X-396 endofita gomba fermentált termékének lipidben oldódó komponenseit az édesköményben. A lipofil komponenseinek illékonyságának növelése és a hasonló komponensek elkülönítése érdekében ez a tanulmány a GC-MS-elemzés előtt derivatizációs kezelést végzett. A GC-MS elemzés eredményei azt mutatták, hogy a gazdanövény édesköményben azonosított 17 lipidoldékony komponenshez képest az X-396 endofita gomba fermentált termékében a lipidoldékony komponensek bioaktív összetevői változatosabbak voltak, és nagy mennyiségű szterolvegyületet tartalmaztak. A növényi szterolok hasonló szerkezete miatt nehéz pontosan azonosítani a típusukat. Ebben a vizsgálatban három standard mintát választottunk ki brasszinoszteroidokból, sztigmaszterolból és β - szitoszterolból derivatizáláshoz és GC-MS detektáláshoz, és végül meghatároztuk az X-396 fermentációs termék lipidben oldódó összetevőinek szteroltípusait. Az ergoszterin és a β - szitoszterin relatív tartalma 31,83%, illetve 12,00% volt. Az ergoszterin a gombák sejtmembránjainak fontos összetevője. Stabil szerkezetének és erős specificitásának köszönhetően tartalma a gombák biomasszájának indikátoraként használható, elősegítve a kalcium és a foszfor emberi szervezet általi felszívódását. Az emberi szervezet számára az exogén D2-vitamin egyik jó forrása. β - szitoszterin biztonságos, természetes, zöld és hatékony emberi táplálékkiegészítő, amely nem okoz genetikai vagy sejttoxicitást. Klinikai vizsgálatok és modellállatokon végzett vizsgálatok megerősítették, hogy a β - szitoszterolnak különböző biológiai hatásai vannak, mint például koleszterinszint-csökkentő, vércukorszint-csökkentő, antioxidáns, gyulladáscsökkentő, antibakteriális és rákellenes tulajdonságai.

GC-MS elemzéssel olyan hatóanyagokat azonosítottak az X-396 erjesztési termékből, mint a metil-hexadecanoát, a lakkfahid és a szkvalén. Ezek közül a metil-hexadecanoát egy atkaölő vegyület, amely gátolja a fagocitikus aktivitást és az immunválaszt. Irodalmi jelentések szerint gyulladáscsökkentő hatása is van. A lakkfanyersav gyulladáscsökkentő és angiogénellenes hatással rendelkezik. A szkvalén, mint a szteroidszintézis előanyagaként részt vesz az anyagcserében, és fontos szerepet játszik a β - karotin, a Q10 koenzim, a D-vitamin, az E-vitamin és a K1-vitamin szintézisútjaiban. Ezért a szkvalén fontos szerepet játszhat a gyulladáscsökkentő, antioxidáns, bőr- és szív- és érrendszeri védelemben.

Az in vitro aktivitási szűrés szempontjából az X-396 fermentáció lipidben oldódó komponensei jobb daganatellenes aktivitást mutatnak a HepG sejtekkel szemben. Ez a tanulmány gazdagítja az édeskömény endofita gombás erjesztési termékeinek összetételére vonatkozó kutatásokat, és bizonyos referenciaadatokat és tudományos alapot biztosít az édeskömény endofita gombás erjesztési termékeinek későbbi aktivitáskutatásához.