A Lingzhi Ergothionein nagy \u00e1tereszt\u0151k\u00e9pess\u00e9g\u0171 kimutat\u00e1si m\u00f3dszer\u00e9nek kutat\u00e1sa
\nAz ergotionin (EGT), m\u00e1s n\u00e9ven 2-tio-lisztidin-trimetil bels\u0151 s\u00f3, egy term\u00e9szetes aminosav, amely sz\u00e1mos \u00e1llatban \u00e9s n\u00f6v\u00e9nyben b\u0151s\u00e9gesen megtal\u00e1lhat\u00f3. Csak n\u00e9h\u00e1ny mikroorganizmusban (aktinomicit\u00e1k, streptomicit\u00e1k), gomb\u00e1kban \u00e9s bizonyos cianobakt\u00e9riumokban szintetiz\u00e1l\u00f3dik, maguk az \u00e1llati szervezetek nem tudj\u00e1k szintetiz\u00e1lni. Az emberi szervezet az EGT-t csak a t\u00e1pl\u00e1l\u00e9kkal tudja felvenni, \u00e9s a rendk\u00edv\u00fcl specifikus szerves kationtranszporter \u00faj t\u00edpus\u00fa 1-es t\u00edpus\u00e1n (OCTN1) kereszt\u00fcl nagy koncentr\u00e1ci\u00f3ban felhalmozni a k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 sejtekben \u00e9s sz\u00f6vetekben. Az EGT-t er\u0151s antioxid\u00e1nsnak tartj\u00e1k, \u00e9s Servillo \u00e9s munkat\u00e1rsai felt\u00e1rt\u00e1k antioxid\u00e1ns mechanizmus\u00e1t, \u00fagy v\u00e9lt\u00e9k, hogy egyed\u00fcl\u00e1ll\u00f3 redox-mechanizmussal rendelkezik, \u00e9s javasolt\u00e1k az EGT egyed\u00fcl\u00e1ll\u00f3 antioxid\u00e1ns hat\u00e1s\u00e1t a sejtekben. Az EGT standard oxid\u00e1ci\u00f3s-redukci\u00f3s potenci\u00e1lja -0,06V, m\u00edg m\u00e1s tiolok potenci\u00e1lja \u00e1ltal\u00e1ban -0,32V \u00e9s -0,2V k\u00f6z\u00f6tt van. Ez\u00e9rt az EGT fiziol\u00f3gi\u00e1s pH-k\u00f6rnyezetben stabilabb, mint m\u00e1s antioxid\u00e1nsok, \u00e9s kev\u00e9sb\u00e9 hajlamos a spont\u00e1n oxid\u00e1ci\u00f3ra. A kutat\u00e1sok kimutatt\u00e1k, hogy az EGT t\u00f6bb fontos \u00e9lettani funkci\u00f3val rendelkezik, mint p\u00e9ld\u00e1ul a gyullad\u00e1scs\u00f6kkent\u0151 hat\u00e1s; A DNS v\u00e9delm\u00e9vel el\u00e9rt sejtv\u00e9delmi funkci\u00f3; A neuron\u00e1lis differenci\u00e1l\u00f3d\u00e1s \u00e9s neurogenezis el\u0151seg\u00edt\u00e9s\u00e9vel el\u00e9rt antidepressz\u00e1ns funkci\u00f3; Az oxidat\u00edv stresszel szembeni ellen\u00e1ll\u00e1ssal el\u00e9rt szemv\u00e9delmi funkci\u00f3; Kardiovaszkul\u00e1ris \u00e9s cerebrovaszkul\u00e1ris v\u00e9delmi funkci\u00f3, amelyet az ateroszkler\u00f3zissal kapcsolatos adh\u00e9zi\u00f3s molekul\u00e1k expresszi\u00f3j\u00e1nak megszak\u00edt\u00e1s\u00e1val \u00e9rnek el; az EGT sz\u00e9lesk\u00f6r\u0171 alkalmaz\u00e1si lehet\u0151s\u00e9gekkel rendelkezik az olyan ipar\u00e1gakban, mint az orvostudom\u00e1ny, az \u00e9lelmiszeripar \u00e9s a kozmetika, a neurodegenerat\u00edv betegs\u00e9gekre gyakorolt megel\u0151z\u0151 \u00e9s ter\u00e1pi\u00e1s hat\u00e1sainak k\u00f6sz\u00f6nhet\u0151en, amelyeket a toxicit\u00e1s g\u00e1tl\u00e1s\u00e1val \u00e9s a benne rejl\u0151 biztons\u00e1goss\u00e1g\u00e1val \u00e9r el.<\/p>\n
Az EGT el\u0151\u00e1ll\u00edt\u00e1si m\u00f3dszerei k\u00f6z\u00e9 tartozik a k\u00e9miai szint\u00e9zis, az ehet\u0151 gomb\u00e1k kivon\u00e1sa \u00e9s a mikrobi\u00e1lis erjeszt\u00e9s. Az els\u0151 kett\u0151 magas k\u00f6lts\u00e9ge \u00e9s bonyolult folyamata miatt jelenleg az ehet\u0151 gombahif\u00e1k m\u00e9lyferment\u00e1ci\u00f3ja az EGT ipari el\u0151\u00e1ll\u00edt\u00e1s\u00e1nak f\u0151 m\u00f3dja. A term\u00e9szetes t\u00f6rzsek azonban alacsony EGT-termel\u00e9ssel rendelkeznek, ez\u00e9rt nagy hozam\u00fa ipari EGT-t\u00f6rzseket kell teny\u00e9szt\u00e9si technik\u00e1kkal termeszteni. Az ipari ehet\u0151 gombat\u00f6rzsek teny\u00e9szt\u00e9s\u00e9nek m\u00f3dszerei k\u00f6z\u00e9 tartozik a mutagenezis teny\u00e9szt\u00e9s, a hibridiz\u00e1ci\u00f3s teny\u00e9szt\u00e9s, a g\u00e9ntechnol\u00f3giai teny\u00e9szt\u00e9s \u00e9s a protoplasztf\u00fazi\u00f3s teny\u00e9szt\u00e9s. Minden egyes nemes\u00edt\u00e9si m\u00f3dszer azonban t\u00f6bb nagyszab\u00e1s\u00fa EGT-tartalom vizsg\u00e1latot ig\u00e9nyel. Meg kell jegyezni, hogy az EGT-tartalom vizsg\u00e1lat\u00e1nak jelent\u0151s\u00e9ge a nemes\u00edt\u00e9si folyamatban ink\u00e1bb a mint\u00e1k k\u00f6z\u00f6tti \u00f6sszehasonl\u00edt\u00e1sban rejlik. Jelenleg az EGT kimutat\u00e1si m\u00f3dszerei k\u00f6z\u00e9 tartozik a nagy teljes\u00edtm\u00e9ny\u0171 folyad\u00e9kkromatogr\u00e1fia, a nagy teljes\u00edtm\u00e9ny\u0171 kapill\u00e1ris elektrofor\u00e9zis \u00e9s a v\u00e9konyr\u00e9teg-elektrofor\u00e9zis. A legsz\u00e9lesebb k\u00f6rben haszn\u00e1lt m\u00f3dszer a nagyteljes\u00edtm\u00e9ny\u0171 folyad\u00e9kkromatogr\u00e1fia, amely k\u00e9pes az EGT-tartalom pontos kimutat\u00e1s\u00e1ra \u00f6sszetett anyagi rendszerekb\u0151l. A nagyteljes\u00edtm\u00e9ny\u0171 folyad\u00e9kkromatogr\u00e1fi\u00e1nak azonban nyilv\u00e1nval\u00f3 hi\u00e1nyoss\u00e1gai vannak, azaz k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 mint\u00e1k eset\u00e9ben k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 kimutat\u00e1si felt\u00e9teleket kell vizsg\u00e1lni. Ezenk\u00edv\u00fcl az EGT k\u00e9s\u0151i cs\u00facsideje \u00e9s a dr\u00e1ga standard mint\u00e1k miatt a teny\u00e9szt\u00e9s sor\u00e1n nagysz\u00e1m\u00fa mint\u00e1b\u00f3l sz\u00e1rmaz\u00f3 nagy hozam\u00fa mint\u00e1k sz\u0171r\u00e9se hossz\u00fa kimutat\u00e1si id\u0151h\u00f6z \u00e9s magas k\u00f6lts\u00e9gekhez vezethet, ami nagym\u00e9rt\u00e9kben h\u00e1tr\u00e1ltatja az EGT fejleszt\u00e9s\u00e9t \u00e9s alkalmaz\u00e1si kutat\u00e1s\u00e1t. Ez\u00e9rt s\u00fcrg\u0151sen l\u00e9tre kell hozni egy olyan nagy \u00e1tereszt\u0151k\u00e9pess\u00e9g\u0171 gyors kimutat\u00e1si m\u00f3dszert, amely k\u00e9pes pontosan meghat\u00e1rozni az EGT koncentr\u00e1ci\u00f3j\u00e1t a mint\u00e1k k\u00f6z\u00f6tt.
\nEr\u0151s antioxid\u00e1ns tulajdons\u00e1gai \u00e9s a k\u00e9t\u00e9rt\u00e9k\u0171 vasionokkal szembeni m\u00e9rs\u00e9kelt reduk\u00e1lhat\u00f3s\u00e1ga (a leveg\u0151 oxig\u00e9nj\u00e9vel val\u00f3 \u00e9rintkez\u00e9s nem befoly\u00e1solja, \u00e9s a gyenge reduk\u00e1lhat\u00f3s\u00e1g miatt nem reduk\u00e1l\u00f3dik) miatt az EGT k\u00e9t\u00e9rt\u00e9k\u0171 vasionokkal sz\u00edntelen kel\u00e1tokat k\u00e9pezhet, m\u00edg a tiocian\u00e1tionok k\u00e9t\u00e9rt\u00e9k\u0171 vasionokkal v\u00f6r\u00f6s komplexeket k\u00e9peznek. E tulajdons\u00e1gok alapj\u00e1n ebben a vizsg\u00e1latban a vas-tiocian\u00e1tot v\u00e1lasztottuk reduk\u00e1l\u00f3szerk\u00e9nt, \u00e9s az ergotamin standardot haszn\u00e1ltuk a vas-tiocian\u00e1ttal val\u00f3 reakci\u00f3ra, hogy l\u00e9trehozzunk egy nagy \u00e1tereszt\u0151k\u00e9pess\u00e9g\u0171 kimutat\u00e1si rendszert az ergotaminra. Ugyanakkor a nagy \u00e1tereszt\u0151k\u00e9pess\u00e9g\u0171 kimutat\u00e1si rendszert k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 Ganoderma lucidum t\u00f6rzsek EGT-hozam\u00e1nak v\u00e1ltoztat\u00e1s\u00e1val valid\u00e1lt\u00e1k. A vizsg\u00e1lat eredm\u00e9nyei \u00faj m\u00f3dszereket \u00e9s \u00f6tleteket ny\u00fajtanak a nagy hozam\u00fa EGT mikroorganizmusok sz\u0171r\u00e9s\u00e9hez \u00e9s \u00faj, nagy hozam\u00fa EGT t\u00f6rzsek nemes\u00edt\u00e9s\u00e9hez.<\/p>\n
Az ergotionein er\u0151s reduk\u00e1l\u00f3 fizikai-k\u00e9miai tulajdons\u00e1gai alapj\u00e1n az EGT tiocian\u00e1t-vas rendszer megalkot\u00e1sa el\u0151tt k\u00eds\u00e9rleteket v\u00e9geztek l\u00fagos k\u00e1lium-permangan\u00e1t rendszer, br\u00f3m-krezol z\u00f6ld rendszer, k\u00e9k palackos metil\u00e9nk\u00e9k rendszer, guaiacol rendszer \u00e9s vas-klorid EGT rendszer megalkot\u00e1s\u00e1ra. Az eredm\u00e9nyek azt mutatt\u00e1k, hogy a l\u00fagos k\u00e1lium-permangan\u00e1t rendszer az alacsony stabilit\u00e1s miatt megbukott; A bromokrezol z\u00f6ld rendszer sz\u00ednfejl\u0151d\u00e9se a pH-f\u00fcgg\u0151s\u00e9g miatt megbukott; A k\u00e9k palackos metil\u00e9nk\u00e9k rendszerben a reduk\u00e1lt \u00e1llapot\u00fa metil\u00e9nk\u00e9k er\u0151s reduk\u00e1lhat\u00f3s\u00e1ga miatt a leveg\u0151 oxig\u00e9nj\u00e9vel \u00e9rintkezve is k\u00f6nnyen oxid\u00e1l\u00f3dik metil\u00e9nk\u00e9kk\u00e9, ami a k\u00eds\u00e9rlet minden jelens\u00e9g n\u00e9lk\u00fcli meghi\u00fasul\u00e1s\u00e1hoz vezetett; A guaiacol rendszer szint\u00e9n az er\u0151s reduk\u00e1lhat\u00f3s\u00e1g \u00e9s az oxig\u00e9nnel val\u00f3 \u00e9rintkez\u00e9s zavar\u00f3 hat\u00e1sa miatt megbukott; A vas-klorid rendszer az alacsony sz\u00ednvisszaad\u00e1s miatt megbukott. Az EGT vas-tiocian\u00e1t rendszere felhaszn\u00e1lhat\u00f3 az EGT nagy \u00e1tereszt\u0151k\u00e9pess\u00e9g\u0171 kimutat\u00e1si m\u00f3dszereinek tanulm\u00e1nyoz\u00e1s\u00e1ra.<\/p>\n
Az EGT-tiocian\u00e1tos vasdetekt\u00e1l\u00f3 rendszer meg\u00e9p\u00edt\u00e9se sor\u00e1n meg\u00e1llap\u00edtott\u00e1k, hogy az extrakci\u00f3s oldatban l\u00e9v\u0151 fenolos anyagok maradv\u00e1nyai befoly\u00e1solj\u00e1k a rendszer sz\u00ednreakci\u00f3j\u00e1t \u00e9s cs\u00f6kkentik az \u00e9rz\u00e9kenys\u00e9g\u00e9t, amikor a vizsg\u00e1lt mint\u00e1t a szok\u00e1sos EGT nyers extrakci\u00f3s m\u00f3dszerrel extrah\u00e1lt\u00e1k, nevezetesen alkoholos csapad\u00e9kos nitrog\u00e9nf\u00fav\u00e1sos \u00e1lland\u00f3 t\u00e9rfogat\u00fa extrakci\u00f3val. Ez\u00e9rt a nitrog\u00e9nf\u00fav\u00e1sos \u00e1lland\u00f3 t\u00e9rfogat\u00fa extrakci\u00f3t k\u00f6vet\u0151en a nyers extrakci\u00f3s oldathoz egy kloroformos fenolelt\u00e1vol\u00edt\u00e1si l\u00e9p\u00e9st kell hozz\u00e1adni.
\nA Ganoderma lucidum hagyom\u00e1nyos \u00e9s \u00e9rt\u00e9kes gy\u00f3gygomba K\u00edn\u00e1ban, amely k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 bioakt\u00edv anyagokat \u00e9s \u00e9lettani funkci\u00f3kat tartalmaz. Ergotionein-tartalma sok ehet\u0151 gomba k\u00f6z\u00fcl viszonylag magas, de mint kereskedelmi forgalomban el\u0151\u00e1ll\u00edtott t\u00f6rzs, a hozama m\u00e9g mindig alacsony. Ez\u00e9rt a Ganoderma lucidum \u00faj, magas ergotionein-termel\u00e9s\u0171 t\u00f6rzs\u00e9nek termeszt\u00e9se nagy jelent\u0151s\u00e9ggel \u00e9s gyakorlati alkalmaz\u00e1si \u00e9rt\u00e9kkel b\u00edr. A fenti okok alapj\u00e1n laborat\u00f3riumunk protoplasztf\u00fazi\u00f3s regener\u00e1l\u00e1ssal, izol\u00e1l\u00e1ssal \u00e9s azonos\u00edt\u00e1ssal egy t\u00e9tel pszeudof\u00fazi\u00f3s term\u00e9ket nyert. A m\u00f3dszer valid\u00e1l\u00e1si folyamat\u00e1ban haszn\u00e1lt Ganoderma lucidum f\u00fazi\u00f3s term\u00e9kek mind ebb\u0151l a forr\u00e1sb\u00f3l sz\u00e1rmaznak.
\nAz ebben a tanulm\u00e1nyban l\u00e9trehozott m\u00f3dszer mag\u00e1nak az EGT-nek a fizikai \u00e9s k\u00e9miai tulajdons\u00e1gain alapul, \u00e9s a kimutat\u00e1si rendszer \u00e9rz\u00e9keny \u00e9s stabil. Alkalmas nagy mennyis\u00e9g\u0171 minta gyors \u00f6sszehasonl\u00edt\u00e1s\u00e1ra az EGT-t termel\u0151 ipari ferment\u00e1ci\u00f3s t\u00f6rzsek teny\u00e9szt\u00e9si folyamat\u00e1ban. Elm\u00e9letileg csak egyszer\u0171 minta EGT extrakci\u00f3j\u00e1nak optimaliz\u00e1l\u00e1sa sz\u00fcks\u00e9ges ahhoz, hogy a t\u00f6rzsek t\u00falnyom\u00f3 t\u00f6bbs\u00e9g\u00e9ben az EGT-tartalom nagy \u00e1tereszt\u0151k\u00e9pess\u00e9g\u0171 gyors kimutat\u00e1s\u00e1t el\u00e9rj\u00fck, \u00e1tt\u00f6rve az eredeti EGT-kutat\u00e1s korl\u00e1tait, \u00e9s \u00faj m\u00f3dszereket \u00e9s \u00f6tleteket ny\u00fajtva az EGT \u00e1ltal\u00e1nos fejleszt\u00e9s\u00e9hez \u00e9s alkalmaz\u00e1si kutat\u00e1s\u00e1hoz.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Research on High throughput Detection Method of Lingzhi Ergothionein Ergothioneine (EGT), also known as 2-thio-Lhistidine trimethyl inner salt, is a natural amino acid that is abundant in many animals and plants. It is only synthesized in some microorganisms (actinomycetes, streptomyces), fungi, and certain cyanobacteria, and cannot be synthesized by animal organisms themselves. The human body […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n