Az endofita bakt\u00e9riumok eloszl\u00e1sa \u00e9s a szteroid szaponin termel\u0151 t\u00f6rzsek el\u0151zetes sz\u0171r\u00e9se Xiangmaidongban k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 n\u00f6veked\u00e9si szakaszokban
\nA Xiangmaidong, m\u00e1s n\u00e9ven Hubei maidong Liriope spicata var. prolifera Y.T. Ma, a K\u00ednai N\u00e9pk\u00f6zt\u00e1rsas\u00e1g gy\u00f3gyszerk\u00f6nyv\u00e9ben (2010-es kiad\u00e1s) a Shanmaidong egyik alapn\u00f6v\u00e9nye. Szteroid szaponinok a f\u0151 hat\u00f3anyaga, \u00e9s a szapogenin alapv\u00e1za a spiroszt\u00e1n sz\u00e1rmaz\u00e9k\u00e1hoz tartozik (27 sz\u00e9natomb\u00f3l \u00e1ll). A spiroszt\u00e1n szerkezet\u00e9ben l\u00e9v\u0151 C25 konfigur\u00e1ci\u00f3 \u00e9s az F gy\u0171r\u0171 ciklikus \u00e1llapota szerint a k\u00f6vetkez\u0151 n\u00e9gy f\u0151 t\u00edpusra oszthat\u00f3: spirosztanol (C25 S konfigur\u00e1ci\u00f3), izoszterosztanol (C25 R konfigur\u00e1ci\u00f3) \u00e9s furosztanol (az F gy\u0171r\u0171 ny\u00edlt l\u00e1nc\u00fa sz\u00e1rmaz\u00e9k).), m\u00f3dos\u00edtott spirosztanolalkoholok (az F gy\u0171r\u0171 egy \u00f6t tag\u00fa tetrahidrofur\u00e1ngy\u0171r\u0171). Az Ophiopogon japonicusb\u00f3l tizenn\u00e9gyf\u00e9le szteroid szaponin izol\u00e1ltak, a f\u0151 glikozidok a diosgenin \u00e9s a ruscogenin, amelyek mindkett\u0151 C25 (S) izomer. K\u00f6z\u00fcl\u00fck a C szaponinok (Ls-S3) tartalma az Ophiopogon japonicusban viszonylag magas. A szteroid szaponinok t\u00f6bbf\u00e9le farmakol\u00f3giai hat\u00e1ssal rendelkeznek, \u00e9s n\u00e9h\u00e1ny k\u00e9miailag szintetiz\u00e1lhat\u00f3 szaponin kiv\u00e9tel\u00e9vel ezeket f\u0151k\u00e9nt k\u00f6zvetlen\u00fcl a hagyom\u00e1nyos k\u00ednai gy\u00f3gy\u00e1szati anyagokb\u00f3l nyerik k\u00e9miai extrakci\u00f3val. A Xiangmaidong szteroid szaponinok sem k\u00e9peznek kiv\u00e9telt. A Xiangmaidong szteroid szaponinok fenntarthat\u00f3 termel\u00e9se \u00e9s ell\u00e1t\u00e1sa azonban korl\u00e1tozott, mivel a hossz\u00fa termel\u00e9si ciklusok, a folyamatos termeszt\u00e9s akad\u00e1lyai, az alacsony szaponin tartalom, a magas extrakci\u00f3s k\u00f6lts\u00e9gek \u00e9s a jelent\u0151s k\u00f6rnyezetszennyez\u00e9s miatt. Ez\u00e9rt \u00faj m\u00f3dszereket kell keresni a szaponinok nagy mennyis\u00e9gben t\u00f6rt\u00e9n\u0151 el\u0151\u00e1ll\u00edt\u00e1s\u00e1ra.<\/p>\n
Kor\u00e1bban tanulm\u00e1nyok sz\u00e1moltak be olyan endofita bakt\u00e9riumok izol\u00e1l\u00e1s\u00e1r\u00f3l, amelyek k\u00e9pesek szteroid szaponinokat termelni a Dianzhong \u00e9s Huazhong \u00e9p\u00fcletekb\u0151l. Ezen felbuzdulva kutat\u00f3csoportunk megk\u00eds\u00e9relte izol\u00e1lni \u00e9s felfedezni a Xiangmaidongb\u00f3l sz\u00e1rmaz\u00f3 szteroid szaponinokat metaboliz\u00e1l\u00f3 \u00e9s termel\u0151 endofita bakt\u00e9riumt\u00f6rzseket. Tiszta teny\u00e9szt\u00e9si m\u00f3dszerek \u00e9s 16SrDNS-PCRDGGE technol\u00f3gia seg\u00edts\u00e9g\u00e9vel elemezt\u00fck \u00e9s azonos\u00edtottuk az endofita bakt\u00e9riumok eloszl\u00e1s\u00e1t a Xiangmaidong mint\u00e1iban (gum\u00f3k vagy gy\u00f6kerek) a kezdeti megjelen\u00e9s, a gyors terjeszked\u00e9s \u00e9s az \u00e9rett betakar\u00edt\u00e1si id\u0151szakok sor\u00e1n. Ugyanakkor sz\u00ednreakci\u00f3, TLC \u00e9s HPLC m\u00f3dszereket alkalmaztunk a kapott tiszta teny\u00e9sztett t\u00f6rzsek szaponintermel\u0151 k\u00e9pess\u00e9g\u00e9nek el\u0151zetes \u00e9rt\u00e9kel\u00e9s\u00e9re a c\u00e9lt\u00f6rzsek megszerz\u00e9se \u00e9s a szteroid szaponinok \"gy\u00e1ri, m\u00e9retar\u00e1nyos \u00e9s gyors\" termel\u00e9s\u00e9nek elm\u00e9leti al\u00e1t\u00e1maszt\u00e1sa \u00e9rdek\u00e9ben.<\/p>\n
A hagyom\u00e1nyos mikrobiol\u00f3giai tiszt\u00e1nteny\u00e9szt\u00e9si m\u00f3dszerek alkalmaz\u00e1s\u00e1val ez a tanulm\u00e1ny 15 nemzets\u00e9get \u00e9s 22 endofita bakt\u00e9riumfajt izol\u00e1lt a Xiangmaidong gy\u00f6k\u00e9rgum\u00f3ib\u00f3l \u00e9s rostos gy\u00f6kereib\u0151l k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 n\u00f6veked\u00e9si szakaszokban. K\u00f6z\u00fcl\u00fck 4 Bacillus \u00e9s 4 Staphylococcus faj, 2 Pseudomonas faj, a fennmarad\u00f3 12 nemzets\u00e9g pedig a Salmonella, Enterobacter, Pseudoxanthomonas, Morganella, Agrobacterium, Microbacterium, Porphyromobacter, Acinetobacter, Lysinibacter \u00e9s Sphingosine volt. A Sphingomonas, a Sphingomonas \u00e9s a Curtobacterium nemzets\u00e9gekben csak egy-egy bakt\u00e9riumfaj tal\u00e1lhat\u00f3.<\/p>\n
A 16SrDNS PCR DGGE azonos\u00edt\u00e1sa r\u00e9v\u00e9n ez a tanulm\u00e1ny meg\u00e1llap\u00edtotta, hogy a Xiangmaidong endofita bakt\u00e9riumk\u00f6z\u00f6ss\u00e9g\u00e9nek szerkezete alapvet\u0151en azonos volt a gum\u00f3k kezdeti megjelen\u00e9si id\u0151szak\u00e1ban, a gyors terjeszked\u00e9si id\u0151szakban \u00e9s az \u00e9rett betakar\u00edt\u00e1si id\u0151szakban, \u00e9s a t\u00f6rzscsoportok k\u00f6z\u00f6tt alig volt k\u00fcl\u00f6nbs\u00e9g. Az izol\u00e1lt szekvenci\u00e1kb\u00f3l a szekvenci\u00e1k \u00f6sszehangol\u00e1s\u00e1val 15 nemzets\u00e9get \u00e9s 21 bakt\u00e9riumfajt azonos\u00edtottak, k\u00f6zt\u00fck 3 Bacillus \u00e9s 3 Staphylococcus fajt, 2 Serratia \u00e9s 2 Pseudomonas fajt, a fennmarad\u00f3 11 nemzets\u00e9get, k\u00f6zt\u00fck a Pseudomonas, Pectobacterium, Bordetella, Stenotrophomonas, Porphyromobacter, Curtobacterium, Enterobacter, Methylobacterium, nitrog\u00e9nk\u00f6t\u0151. Az Azotobacter, Microbacterium \u00e9s Pseudoclavibacter t\u00f6rzsekb\u0151l csak egy van. A fent eml\u00edtett 22 tiszta endofita bakt\u00e9riumt\u00f6rzsh\u00f6z k\u00e9pest a DGGE 7 \u00faj nemzets\u00e9get azonos\u00edtott: Serratia, Pectobacterium, Bordetella, Stenotrophomonas, Methylobacterium, Azotobacter \u00e9s Pseudomonas.<\/p>\n
Ez a tanulm\u00e1ny \u00e9rt\u00e9kelte a tiszt\u00e1n termeszthet\u0151 endofita t\u00f6rzsek szaponintermel\u0151 k\u00e9pess\u00e9g\u00e9t, \u00e9s el\u0151zetesen azonos\u00edtott h\u00e1rom bakt\u00e9riumt\u00f6rzset, a Pseudoxanthomonas mexicana, a Staphylococcus caprae \u00e9s a Microbacterium testaceum bakt\u00e9riumt\u00f6rzseket, amelyek jelent\u0151s tulajdons\u00e1gokkal rendelkeznek a szteroid szaponinok termel\u00e9s\u00e9ben. A HPLC-detekt\u00e1l\u00e1s eredm\u00e9nyei szerint ez a h\u00e1rom endofita bakt\u00e9rium mindegyike jellegzetes cs\u00facsokat mutatott a 15,98, 57,64 \u00e9s 75,19 perces id\u0151pontokban, ami arra utal, hogy legal\u00e1bb h\u00e1rom szaponin ferment\u00e1ci\u00f3s term\u00e9k\u00fckben azonos szerkezet\u0171 lehet, ami tov\u00e1bbi k\u00eds\u00e9rleti ellen\u0151rz\u00e9st ig\u00e9nyel. Jelenleg k\u00e9t f\u0151 strat\u00e9gia l\u00e9tezik a szteroid szaponinok kimutat\u00e1s\u00e1ra: az egyik a k\u00f6zvetlen kimutat\u00e1s, a m\u00e1sik pedig a k\u00f6zvetett kimutat\u00e1s a has\u00edtott szaponinok min\u0151s\u00e9gi \u00e9s mennyis\u00e9gi elemz\u00e9s\u00e9vel. A tud\u00f3sok HPLC-m\u00f3dszert haszn\u00e1ltak a dioscin tartalm\u00e1nak meghat\u00e1roz\u00e1s\u00e1ra a Dioscorea nipponica, a ny\u00edlgy\u00f6k\u00e9r, a sziz\u00e1l \u00e9s a liliomr\u00fcgyek eset\u00e9ben. A Xiangmaidong szteroid szaponinok standard \u00e9s izol\u00e1lt tiszta mint\u00e1inak hi\u00e1nya miatt ebben a k\u00eds\u00e9rletben az elk\u00e9sz\u00edtett Xiangmaidong gy\u00f6k\u00e9r szteroid szaponinokat (kever\u00e9k) ideiglenesen pozit\u00edv kontrollk\u00e9nt haszn\u00e1lt\u00e1k. Azzal, hogy \u00f6sszehasonl\u00edtottuk, hogy azonos kimutat\u00e1si k\u00f6r\u00fclm\u00e9nyek k\u00f6z\u00f6tt azonos id\u0151pontban megjelenhetnek-e a jellegzetes cs\u00facsok, el\u0151zetesen azonos\u00edtottuk az endofita bakt\u00e9riumok glikozidtermel\u00e9s\u00e9nek jellemz\u0151it. A j\u00f6v\u0151ben laborat\u00f3riumunk tov\u00e1bb fogja v\u00e1lasztani \u00e9s tiszt\u00edtani a ferment\u00e1ci\u00f3s term\u00e9k szaponin kivonat\u00e1t, \u00e9s t\u00f6megspektrometri\u00e1t, nukle\u00e1ris m\u00e1gneses rezonanci\u00e1t \u00e9s m\u00e1s m\u00f3dszereket fog alkalmazni a pontosabb jellemz\u00e9shez.<\/p>\n
A 16SrDNS V6 \uff5e V8 magas v\u00e1ltoz\u00f3 r\u00e9gi\u00f3j\u00e1nak DGGE-elemz\u00e9se alapj\u00e1n, valamint a szteroid szaponinok el\u0151\u00e1ll\u00edt\u00e1s\u00e1ra k\u00e9pes, tiszt\u00e1n teny\u00e9sztett endofita bakt\u00e9riumok sz\u0171r\u00e9si eredm\u00e9nyeivel kombin\u00e1lva ez a k\u00eds\u00e9rlet egy jelens\u00e9get tal\u00e1lt: a Xiangmaidong gy\u00f6k\u00e9rgum\u00f3inak gyors terjeszked\u00e9si \u00e9s \u00e9rett betakar\u00edt\u00e1si id\u0151szak\u00e1ban a gy\u00f6k\u00e9rgum\u00f3kb\u00f3l kimutathat\u00f3 a mexik\u00f3i pseudoyellow pseudomonas P. A gy\u00f6k\u00e9rgum\u00f3kban a mexik\u00f3i jelenl\u00e9t\u00e9t a gy\u00f6k\u00e9rgum\u00f3k kezdeti szakasz\u00e1ban nem mutatt\u00e1k ki. Meger\u0151s\u00edt\u00e9st nyert, hogy a Xiangmaidong gy\u00f6k\u00e9rgum\u00f3inak biomassz\u00e1ja \u00e9s szteroid szaponin tartalma a kezdeti st\u00e1diumt\u00f3l fokozatosan n\u00f6vekszik, \u00e9s a betakar\u00edt\u00e1s gyors n\u00f6veked\u00e9si \u00e9s \u00e9r\u00e9si szakasz\u00e1ban \u00e9ri el a cs\u00facspontj\u00e1t. Ez a jelens\u00e9g arra utal, hogy a mexik\u00f3i Pseudomonas aeruginosa pozit\u00edv korrel\u00e1ci\u00f3s szerepet j\u00e1tszik a szteroid szaponinok felhalmoz\u00f3d\u00e1s\u00e1ban az Ophiopogon japonicus gum\u00f3iban? Ez is tov\u00e1bbi k\u00eds\u00e9rleti igazol\u00e1st ig\u00e9nyel.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Az endofita bakt\u00e9riumok eloszl\u00e1sa \u00e9s a szteroid szaponin termel\u0151 t\u00f6rzsek el\u0151zetes sz\u0171r\u00e9se a Xiangmaidongban k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 n\u00f6veked\u00e9si szakaszokban A Xiangmaidong, m\u00e1s n\u00e9ven Hubei maidong Liriope spicata var. prolifera Y.T. Ma, a K\u00ednai N\u00e9pk\u00f6zt\u00e1rsas\u00e1g gy\u00f3gyszerk\u00f6nyv\u00e9ben (2010-es kiad\u00e1s) a Shanmaidong egyik alapn\u00f6v\u00e9nye. Szteroid szaponinok a f\u0151 akt\u00edv [...]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n