Molekul\u00e1ris dokkol\u00e1s \u00e9s enzimg\u00e1tl\u00e1si kinetika alapj\u00e1n vizsg\u00e1lja meg a Rhodiola rosea-b\u0151l kivont \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1z in vitro g\u00e1tl\u00f3 aktivit\u00e1s\u00e1t.A cukorbetegs\u00e9g gyakori betegs\u00e9g, amely k\u00e9t t\u00edpusra oszthat\u00f3: 1-es t\u00edpus\u00fa cukorbetegs\u00e9g (T1DM) \u00e9s 2-es t\u00edpus\u00fa cukorbetegs\u00e9g (T2DM). A T2DM a cukorbetegek t\u00f6bb mint 90%-j\u00e9t teszi ki, amelyet els\u0151sorban az inzulinrezisztencia \u00e9s az abnorm\u00e1lis inzulinszekr\u00e9ci\u00f3 miatt megn\u00f6vekedett posztprandi\u00e1lis v\u00e9rcukorszint okoz. Az alfa-gl\u00fckozid\u00e1z az egyik f\u0151 enzim, amely a posztprandi\u00e1lis hiperglik\u00e9mi\u00e1t okozza, \u00e9s az alfa-gl\u00fckozid\u00e1z aktivit\u00e1s g\u00e1tl\u00e1sa v\u00e1lt a posztprandi\u00e1lis hiperglik\u00e9mia szab\u00e1lyoz\u00e1s\u00e1nak \u00e9s a T2DM kezel\u00e9s\u00e9nek f\u0151 m\u00f3dj\u00e1v\u00e1. Jelenleg a klinikai gyakorlatban \u00e1ltal\u00e1nosan haszn\u00e1lt alfa-gl\u00fckozid\u00e1z-g\u00e1tl\u00f3k az akarb\u00f3z, a miglitol stb. B\u00e1r nagy g\u00e1tl\u00f3 aktivit\u00e1ssal rendelkeznek, dr\u00e1g\u00e1k \u00e9s hajlamosak egy sor gasztrointesztin\u00e1lis reakci\u00f3ra, p\u00e9ld\u00e1ul em\u00e9szt\u00e9si zavarra. A n\u00f6v\u00e9nyekb\u0151l sz\u00e1rmaz\u00f3 term\u00e9szetes term\u00e9kek alacsony toxicit\u00e1suk \u00e9s mell\u00e9khat\u00e1saik miatt a ter\u00e1pi\u00e1s szerek kiv\u00e1l\u00f3 min\u0151s\u00e9g\u0171 forr\u00e1s\u00e1v\u00e1 v\u00e1ltak. Ez\u00e9rt a term\u00e9szetes hat\u00f3anyagokb\u00f3l sz\u00e1rmaz\u00f3 biztons\u00e1gos \u00e9s alacsony mell\u00e9khat\u00e1s\u00fa alfa-gl\u00fckozid\u00e1z inhibitorok keres\u00e9se a kutat\u00e1s egyik forr\u00f3 pontj\u00e1v\u00e1 v\u00e1lt.<\/p>\n
A Rhodiola sachalinensis, mint az \u00e9lelmiszer- \u00e9s gy\u00f3gy\u00e1szati homol\u00f3gi\u00e1val rendelkez\u0151 hagyom\u00e1nyos k\u00ednai gy\u00f3gy\u00e1szati anyagok egyike, szalidrozidot, katechint, tirozolt \u00e9s m\u00e1s hat\u00f3anyagokat tartalmaz. Jelenleg a hazai \u00e9s k\u00fclf\u00f6ldi kutat\u00e1sok els\u0151sorban a hipoxia elleni, az apopt\u00f3zis elleni, a tumorellenes, a stressz okozta k\u00e1rok enyh\u00edt\u00e9s\u00e9re stb. \u00f6sszpontos\u00edtanak. Egyes tanulm\u00e1nyok azt is mutatj\u00e1k, hogy bizonyos szerepe van a cukorbetegs\u00e9g r\u00e1gcs\u00e1l\u00f3modellekben, \u00e9s enyh\u00edtheti a cukorbeteg egerek hiperglik\u00e9mi\u00e1j\u00e1t, hiperlipid\u00e9mi\u00e1j\u00e1t \u00e9s vizeletcukor t\u00fcneteit az 5 '- adenozin-monofoszf\u00e1t f\u00fcgg\u0151 feh\u00e9rje kin\u00e1z (AMPK) kapcsol\u00f3d\u00f3 jel\u00e1tviteli \u00fatvonalak aktiv\u00e1l\u00e1s\u00e1val. A k\u00f6zelm\u00faltban a kutat\u00f3k meg\u00e1llap\u00edtott\u00e1k, hogy a Rhodiola kivonat jelent\u0151sen cs\u00f6kkentheti a posztprandi\u00e1lis v\u00e9rcukorszintet egerekben, \u00e9s hat\u00f3anyagai bizonyos fok\u00fa g\u00e1tl\u00f3 hat\u00e1st mutatnak in vitro, de a specifikus g\u00e1tl\u00e1si mechanizmus nem egy\u00e9rtelm\u0171. Csoportunk el\u0151zetes kutat\u00e1sai azt tal\u00e1lt\u00e1k, hogy a Rhodiola rosea polifenolos anyagai bizonyos in vitro alfa-gl\u00fckozid\u00e1z g\u00e1tl\u00f3 hat\u00e1ssal rendelkeznek. A fenti kutat\u00e1si h\u00e1tt\u00e9r alapj\u00e1n ez a tanulm\u00e1ny az enzimg\u00e1tl\u00e1si kinetik\u00e1t, az UHPLC-QE-MS-t \u00e9s a molekul\u00e1ris dokkol\u00e1si technol\u00f3gi\u00e1t kombin\u00e1lja, hogy vizualiz\u00e1lt m\u00f3don vizsg\u00e1lja a Rhodiola rosea kivonat g\u00e1tl\u00f3 hat\u00e1s\u00e1t az alfa-gl\u00fckozid\u00e1zra. A kutat\u00e1s c\u00e9lja, hogy elm\u00e9leti referenci\u00e1t ny\u00fajtson a hipoglik\u00e9mi\u00e1s gy\u00f3gyszerek \u00e9s az eg\u00e9szs\u00e9ges \u00e9lelmiszerek fejleszt\u00e9s\u00e9hez, a Rhodiola rosea tov\u00e1bbi fejleszt\u00e9s\u00e9nek \u00e9s felhaszn\u00e1l\u00e1s\u00e1nak el\u0151seg\u00edt\u00e9se \u00e9rdek\u00e9ben.<\/p>\n
<\/p>\n
<\/p>\n
Az alfa-gl\u00fckozid\u00e1z a szervezetben a v\u00e9konyb\u00e9l ny\u00e1lkah\u00e1rty\u00e1j\u00e1nak ecsetszeg\u00e9ly\u00e9ben tal\u00e1lhat\u00f3, amely k\u00e9pes az oligoszacharidokat vagy diszacharidokat monoszacharidokk\u00e1 bontani. Aktivit\u00e1s\u00e1nak g\u00e1tl\u00e1sa lelass\u00edthatja a sz\u00e9nhidr\u00e1t-hidrol\u00edzis \u00e9s a gl\u00fck\u00f3ztermel\u00e9s sebess\u00e9g\u00e9t, ez\u00e1ltal cs\u00f6kkentve a gl\u00fck\u00f3z v\u00e9konyb\u00e9lben t\u00f6rt\u00e9n\u0151 felsz\u00edv\u00f3d\u00e1s\u00e1t \u00e9s a posztprandi\u00e1lis v\u00e9rcukorszintet. A kutat\u00e1sok azt mutatj\u00e1k, hogy a k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 n\u00f6v\u00e9nyek, p\u00e9ld\u00e1ul a csillagalma, az elef\u00e1ntl\u00e1b ban\u00e1n, a fekete farkasbogy\u00f3, a Schisandra chinensis, a lila yam \u00e9s a Guizhou pitypang kivonata mind g\u00e1tl\u00f3 hat\u00e1ssal rendelkezik az alfa-gl\u00fckozid\u00e1zzal szemben. Az inhibitorok enzimekre gyakorolt g\u00e1tl\u00f3 hat\u00e1s\u00e1nak \u00e9rt\u00e9kel\u00e9s\u00e9re a f\u00e9lmaxim\u00e1lis g\u00e1tl\u00f3 koncentr\u00e1ci\u00f3 (IC50) haszn\u00e1lhat\u00f3. Min\u00e9l kisebb az IC50, ann\u00e1l nagyobb a g\u00e1tl\u00f3 hat\u00e1s. A csoport kor\u00e1bbi kutat\u00e1sai kimutatt\u00e1k, hogy a Rhodiola polifenolok j\u00f3 g\u00e1tl\u00f3 hat\u00e1ssal vannak az alfa-gl\u00fckozid\u00e1zra, az IC50 \u00e9rt\u00e9ke 2,83 mg\/ml. Az ebben a k\u00eds\u00e9rletben kapott RCE IC50 1,538mg\/ml, ami nemcsak az akarb\u00f3zn\u00e1l, hanem a Rhodiola polifenolokn\u00e1l is alacsonyabb. Ez a flavonoidok, szerves savak \u00e9s egy\u00e9b anyagok jelenl\u00e9t\u00e9nek k\u00f6sz\u00f6nhet\u0151 az RCE-ben. Az inhibitorok \u00e1ltal okozott enzimg\u00e1tl\u00e1s t\u00edpusai reverzibilis g\u00e1tl\u00e1sra \u00e9s irreverzibilis g\u00e1tl\u00e1sra oszthat\u00f3k. Az ebben a vizsg\u00e1latban kapott RCE \u00e9s \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1z reverzibilis g\u00e1tl\u00e1s, amelyet az inhibitor \u00e9s az enzim k\u00f6z\u00f6tti nem kovalens k\u00f6t\u0151d\u00e9s jellemez, amely fizikai m\u00f3dszerekkel helyre\u00e1ll\u00edthatja az enzimaktivit\u00e1st. A reverzibilis g\u00e1tl\u00e1st\u00edpusok n\u00e9gy kateg\u00f3ri\u00e1ba sorolhat\u00f3k: kompetit\u00edv g\u00e1tl\u00e1s, nem kompetit\u00edv g\u00e1tl\u00e1s, antikompetit\u00edv g\u00e1tl\u00e1s \u00e9s vegyes g\u00e1tl\u00e1s. A kevert g\u00e1tl\u00e1si t\u00edpusok k\u00f6z\u00e9 tartozik a kompetit\u00edv \u00e9s a nem kompetit\u00edv kevert g\u00e1tl\u00e1s. E t\u00edpus jellemz\u0151je, hogy az inhibitor koncentr\u00e1ci\u00f3j\u00e1nak n\u00f6veked\u00e9se cs\u00f6kkenti az enzimatikus reakci\u00f3 maxim\u00e1lis reakci\u00f3sebess\u00e9g\u00e9t (Vmax) \u00e9s n\u00f6veli a Michaelis \u00e1lland\u00f3j\u00e1t (Km). Ez a vizsg\u00e1lat azt mutatja, hogy az RCE koncentr\u00e1ci\u00f3j\u00e1nak n\u00f6veked\u00e9se a Vmax cs\u00f6kken\u00e9s\u00e9hez vezet A Km n\u00f6veked\u00e9se \u00f6sszhangban van a fenti jellemz\u0151kkel, ez\u00e9rt az RCE \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1zra gyakorolt g\u00e1tl\u00e1si t\u00edpus\u00e1t a kompetit\u00edv \u00e9s nem kompetit\u00edv g\u00e1tl\u00e1s vegyes t\u00edpus\u00e1nak hat\u00e1roztuk meg, ami azt jelzi, hogy a Rhodiola kivonat hat\u00e9kony term\u00e9szetes \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1z inhibitor. Az RCE \u00f6sszhangban van a Rhodiola rosea polifenolok, a Schisandra chinensis poliszacharidjai \u00e9s a Scenedesmus macrophylla poliszacharidjai \u00e1ltal az \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1z g\u00e1tl\u00e1s\u00e1nak t\u00edpus\u00e1val. Tiszt\u00e1zni kell azonban, hogy mely vegy\u00fcletek tartoznak a kompetit\u00edv g\u00e1tl\u00e1shoz \u00e9s melyek a nem kompetit\u00edv g\u00e1tl\u00e1shoz, \u00e9s tov\u00e1bbi vizsg\u00e1latokra van sz\u00fcks\u00e9g. Az RCE j\u00f3 \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1z g\u00e1tl\u00f3 hat\u00e1ssal rendelkezik, de tov\u00e1bbi \u00e1llatmodellekre van sz\u00fcks\u00e9g annak ellen\u0151rz\u00e9s\u00e9re, hogy a hat\u00e1s in vivo is jelent\u0151s-e. Jelenleg az alfa-gl\u00fckozid\u00e1znak sz\u00e1mos forr\u00e1sa van, els\u0151sorban a s\u00f6r\u00e9leszt\u0151, az Aspergillus niger, a termofil Bacillus subtilis \u00e9s a Leuconostoc enterica. A k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 forr\u00e1sokb\u00f3l sz\u00e1rmaz\u00f3 \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1z tulajdons\u00e1gai nagym\u00e9rt\u00e9kben elt\u00e9rnek, \u00e9s az ebben a tanulm\u00e1nyban haszn\u00e1lt \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1z s\u00f6r\u00e9leszt\u0151b\u0151l sz\u00e1rmazik. Ez\u00e9rt tov\u00e1bbi vizsg\u00e1latokra van sz\u00fcks\u00e9g annak meg\u00e1llap\u00edt\u00e1s\u00e1ra, hogy az RCE ugyanolyan g\u00e1tl\u00f3 hat\u00e1ssal van-e m\u00e1s forr\u00e1sokb\u00f3l sz\u00e1rmaz\u00f3 enzimekre.
\nAz UHPLC-QE-MS a gyorsas\u00e1g \u00e9s a pontoss\u00e1g jellemz\u0151ivel rendelkezik, \u00e9s haszn\u00e1lhat\u00f3 a komplex k\u00ednai gy\u00f3gy\u00e1szati anyagokban l\u00e9v\u0151 vegy\u00fcletek nem c\u00e9lzott elemz\u00e9s\u00e9re. Ez a tanulm\u00e1ny elemezte az RCE-t, \u00e9s az adatb\u00e1zissal val\u00f3 \u00f6sszehasonl\u00edt\u00e1s r\u00e9v\u00e9n 1245 vegy\u00fcletet azonos\u00edtott, k\u00f6zt\u00fck 263 vegy\u00fcletet negat\u00edv ionm\u00f3dban \u00e9s 982 vegy\u00fcletet pozit\u00edv ionm\u00f3dban. A Rhodiola rosea hat\u00f3anyagainak kivon\u00e1s\u00e1ra szolg\u00e1l\u00f3 f\u0151 old\u00f3szerek az etanol \u00e9s a v\u00edz. A tiszta v\u00edzzel \u00f6sszehasonl\u00edtva a szerves old\u00f3szerek vizes oldatai t\u00f6bb vegy\u00fcletet k\u00e9pesek kivonni. A vizes kivonatban a galluszsav tartalma magasabb, mint az alkoholos kivonat\u00e9, m\u00edg a tirozol, a klorog\u00e9nsav \u00e9s a tanninok tartalma alacsonyabb, mint a vizes alkoholos kivonat\u00e9. Ez\u00e9rt a t\u00f6bb vegy\u00fclet kivon\u00e1sa \u00e9rdek\u00e9ben ez a k\u00eds\u00e9rlet 50% etanolt haszn\u00e1lt old\u00f3szerk\u00e9nt az RCE extrakci\u00f3 el\u0151k\u00e9sz\u00edt\u00e9s\u00e9hez. Az egyetlen extrakci\u00f3s old\u00f3szer miatt azonban a kimutatott vegy\u00fcletek nem felt\u00e9tlen\u00fcl a Rhodiola rosea \u00f6sszes vegy\u00fclete, \u00e9s m\u00e9g mindig vannak olyan vegy\u00fcletek, amelyeket nem lehet kivonni vagy azonos\u00edtani. Ez\u00e9rt tov\u00e1bbi \u00f6sszehasonl\u00edt\u00f3 k\u00eds\u00e9rletekre van sz\u00fcks\u00e9g k\u00fcl\u00f6nb\u00f6z\u0151 extrakci\u00f3s old\u00f3szerekkel. Zakharenko kutat\u00e1sai szerint a Rhodiola rosea f\u0151 hat\u00f3anyagai a szalidrozid, a luteolin, a katechin, a kvercetin, a gy\u00f3gyn\u00f6v\u00e9nykivonat \u00e9s a katechin. Ez \u00f6sszhangban van a jelen tanulm\u00e1ny eredm\u00e9nyeivel, mivel az RCE magas luteolin- \u00e9s kvercetin-tartalommal rendelkezik. A molekul\u00e1ris dokkol\u00e1ssal megj\u00f3solhat\u00f3, hogy a kis molekul\u00e1j\u00fa ligandumok k\u00e9pesek-e k\u00f6t\u0151dni a receptorfeh\u00e9rj\u00e9khez, valamint a k\u00f6t\u0151er\u0151k. Ebben a tanulm\u00e1nyban 20, UHPLC-QE-MS-sel nyert magas tartalm\u00fa vegy\u00fcletet dokkoltunk \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1zzal. Az eredm\u00e9nyek azt mutatt\u00e1k, hogy 11 vegy\u00fclet k\u00e9pes k\u00f6t\u0151dni az \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1zhoz, k\u00f6zt\u00fck a luteolin, szalidrozid, kaempferol, (-) - epikatekin 3-O-gall\u00e1t, k\u00e1v\u00e9sav, L-almasav, (+) - epikatekin, kvercetin, (-) - eritrotro-anetol-glikol 1-gl\u00fckozid, 3-hidroxi-4,6-heptin-1-il 1-gl\u00fckozid \u00e9s tirozol. K\u00f6z\u00fcl\u00fck a legt\u00f6bb hidrog\u00e9nk\u00f6t\u00e9st a k\u00e1v\u00e9sav k\u00e9pezte. A His-515, Arg-437, Glu-432 \u00e9s His-348 marad\u00e9kokhoz k\u00e9pes k\u00f6t\u0151dni. (+) - Az epikatekin az Asn-443 \u00e9s a His-515-hez k\u00f6t\u0151dik a legjobban, a legalacsonyabb k\u00f6t\u00e9si energi\u00e1val (-17,08 kJ\/mol); a PNPG dokkol\u00e1sa az \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1zzal kimutatta, hogy az Arg-437 \u00e9s a Glu-432 a k\u00e9t k\u00f6t\u0151helye. A k\u00e1v\u00e9savnak ugyanazok a k\u00f6t\u0151helyei a PNPG-vel, Arg-437 \u00e9s Glu-432, m\u00edg az L-almasavnak, a kvercetin \u00e9s a tirozolnak ugyanaz a k\u00f6t\u0151helye a PNPG-vel, Arg-437. Ez\u00e9rt arra lehet k\u00f6vetkeztetni, hogy a k\u00e1v\u00e9sav, az L-almasav, a kvercetin \u00e9s a tirozol \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1z g\u00e1tl\u00e1si t\u00edpusa kompetit\u00edv g\u00e1tl\u00e1s lehet, m\u00edg a t\u00f6bbi hat vegy\u00fclet\u00e9 nem kompetit\u00edv g\u00e1tl\u00e1s. A vegy\u00fcletek tov\u00e1bbi tiszt\u00edt\u00e1sa \u00e9s a Lineweaver-Burk reciprok \u00e1br\u00e1k k\u00e9sz\u00edt\u00e9se sz\u00fcks\u00e9ges azonban a g\u00e1tl\u00e1si t\u00edpusok meghat\u00e1roz\u00e1s\u00e1hoz.
\n\u00d6sszefoglalva, ez a tanulm\u00e1ny az RCE \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1zra gyakorolt g\u00e1tl\u00f3 hat\u00e1s\u00e1t vizsg\u00e1lta vizualiz\u00e1lt m\u00f3don, enzimg\u00e1tl\u00e1si kinetika, UHPLCQE-MS \u00e9s molekul\u00e1ris dokkol\u00e1si technik\u00e1k seg\u00edts\u00e9g\u00e9vel. A g\u00e1tl\u00e1s t\u00edpusa a kompetit\u00edv \u00e9s nem kompetit\u00edv g\u00e1tl\u00e1s vegyes t\u00edpusa volt, \u00e9s a (+) - epikatekin \u00e9s az \u03b1 - gl\u00fckozid\u00e1z k\u00f6z\u00f6tti k\u00f6t\u0151d\u00e9si aktivit\u00e1s az RCE-ben volt a legjobb. Ez a cikk alapkutat\u00e1st ny\u00fajt az RCE mint term\u00e9szetes alfa-gl\u00fckozid\u00e1z inhibitor fejleszt\u00e9s\u00e9hez \u00e9s a Rhodiola er\u0151forr\u00e1sok felhaszn\u00e1l\u00e1s\u00e1hoz.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Based on molecular docking and enzyme inhibition kinetics, explore the inhibitory activity of \u03b1 – glucosidase in vitro extracted from Rhodiola rosea. diabetes is a common disease, which can be divided into two types: diabetes type 1 (T1DM) and diabetes type 2 (T2DM). T2DM accounts for more than 90% of diabetes patients, mainly caused by […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n