A rezveratrol JNK-útvonalon alapuló, az immunrendszer által okozott májkárosodásra gyakorolt hatásának vizsgálata egerekben
Az immunválasz által közvetített májkárosodást gyakran gyulladásos sejtek beszivárgása és a májsejtek szöveti szerkezetének felbomlása kíséri. Ezenkívül ez a sérülés szükséges útja a végstádiumú elváltozások, például a májfibrózis, a májzsugor, sőt a májdaganatok kialakulásának és fejlődésének, ami meghatározza a betegség kimenetelét és romlását. A közelmúltban az immunrendszeri májkárosodás előfordulási aránya Kínában évről évre nő. Az immunszuppresszánsokat többnyire klinikailag használják, de a kezelés hatása nem nyilvánvaló, és a gyógyszer megvonása után könnyen visszaeshet. Ezért sürgősen hatékony gyógyszereket kell keresni az immunmájkárosodás megelőzésére és kezelésére. A geránium a Geraniaceae család és a Geranium nemzetség tagja. Főleg Északkelet- és Észak-Kína számos régiójában, valamint néhány ázsiai országban termesztik. A geranint főként a Geranium wilfordii-ból izolálják, és különböző hatásai vannak, például antioxidáns és gyulladáscsökkentő. Tanulmányok kimutatták, hogy a resveratrol csökkenti a H2O2 által indukált pro-apoptotikus Bax fehérje kifejeződését, és elősegíti az antiapoptotikus Bcl-2 fehérje kifejeződését, de a vonatkozó apoptotikus útvonalakat nem vizsgálták alaposan. Ezen túlmenően Wu és munkatársai tanulmánya kimutatta, hogy a rezveratrol és a kolhicin kombinációja jelentősen csökkentheti a lipopoliszacharid (LPS) által stimulált RAW 264.7 makrofágok és az acetaminofen (APAP) által kiváltott immunrendszeri májkárosodást egerekben. Jelenleg nem találtunk olyan releváns szakirodalmat, amely a rezveratrolnak a JNK-útvonalon alapuló immunmájkárosodásra gyakorolt hatásáról számolna be. Ezért a Wu és munkatársai és kutatócsoportunk megerősítése alapján, miszerint a resveratrol védő hatással van a D-galaktozamin és a szén-tetraklorid által kiváltott májkárosodásra, ez a kísérlet tovább vizsgálja a resveratrol hatását az LPS által kiváltott immunmájkárosodásra egereknél a JNK útvonalon keresztül, és feltárja a hatásmechanizmusát.

A májban számos enzim található, melyek közül az ALT és az AST a két leggyakoribb. Általában a májszövetben a transzaminázok tartalma 100-szor magasabb, mint a vérben. Ha a májsejtek 1% károsodnak, a szérumban a transzaminázok szintje megduplázódik, ami a májkárosodás visszacsatolásának egyik legkorábbi és legérzékenyebb mutatója. Az ALP-t és a TBIL-t fontos indikátoroknak tekintik a májkárosodás klinikai értékelésében. A SOD a szervezet antioxidáns rendszerének fontos enzim-antioxidánsa, amely oxigén és hidrogén-peroxid létrehozásával reagál, hogy a szervezetben lévő oxigén szabadgyököket eltávolítsa, ezáltal gátolja a későbbi lipidperoxidációs reakciókat. Az MDA a peroxidáció végterméke, amely súlyosan veszélyezteti a sejtmembrán szerkezetének integritását, sejtduzzanatot és nekrózist okozva. A szövetek MDA-tartalma közvetve tükrözheti a szabad gyökök által megtámadott máj károsodásának mértékét. A GSH nemcsak a szervezet anyagcseréjének fontos anyaga és a legfontosabb redukáló anyag, hanem a GSH Px szubsztrátja is, amely képes a toxikus anyagok, például az oxigén szabadgyökök és a szuperoxid-anionok eltávolítására, és megakadályozza, hogy a peroxidok behatoljanak a sejtmembránokba. A kísérleti eredményekből látható, hogy az LPS által kiváltott immunrendszeri májkárosodásban szenvedő egerek szérum ALT, AST, ALP, TBIL és MDA szintje jelentősen megemelkedett, míg a SOD és GSH Px aktivitása jelentősen csökkent, ami összhangban van Chou és munkatársai jelentésével. A resveratrol kezelés után az egerek szérumában a májfunkciós faktorok ALT, AST, ALP, TBIL és az oxidatív stressz index MDA szintje csökkent, míg a SOD és GSH Px aktivitása jelentősen nőtt. A fenti kísérleti eredmények alapján feltételezzük, hogy az immunrendszeri májkárosodás megelőzése és kezelése a resveratrol által a transzaminázok emelkedésének gátlásával és antioxidáns hatásával függ össze.

Az IL-1 β a gyulladásos válasz egyik kulcsfontosságú célpontja. Bár közvetlenül nem károsíthatja a májat, az IL-1 β magas koncentrációja gyulladásos és immunsejteket indíthat el egy sor citokin termelésére, ami gyulladásos reakciókhoz és hibás immunválaszokhoz vezet. A TNF - α termelésének sajátos mechanizmusa az, hogy a májkárosodás bekövetkezése után a sejtmembrán áteresztőképessége megnő, elősegítve a Ca2+-influxust és aktiválva a Kupffer-sejteket, ami a TNF - α nagymértékű szekréciójához vezet, és súlyosbítja a májkárosodás mértékét. Ezzel egyidejűleg a helyi szövetek gyulladásos sejtinfiltráción mennek keresztül, és a TNF - α indukálhatja az IL-6 termelését. Az IL-6 a TNF - α második közvetítőjeként működhet, ami kiterjedt sejtdegenerációhoz és nekrózishoz vezet a májban, ami súlyos hepatitiszhez vezet. Ebben a vizsgálatban az LPS modellezést követően az IL-1 β, a TNF - α és az IL-6 szintje az egér májszövetében jelentősen megemelkedett. Ezen indikátoradatok emelkedő tendenciája összhangban van Dong és munkatársaival, és a normál csoporthoz képest jelentős különbségek mutatkoznak. Érdekes, hogy a resveratrolal történő kezelés jelentősen vissza tudja fordítani ezeket az LPS által kiváltott változásokat, elsősorban azáltal, hogy csökkenti az IL-1 β, TNF - α és IL-6 szintjét a szövetekben, és enyhíti a gyulladásos reakciókat. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a rezveratrol gyulladáscsökkentő hatásain keresztül megelőzheti és kezelheti az immunrendszeri májkárosodást is.

A JNK a MAPK-útvonal egyik fő tagja, amely részt vesz a jelátvitelben, a gyulladásos válaszban, a sejtek apoptózisában és más folyamatokban. A sejtek nyugalmi állapotában a JNK főként a citoplazmában található. Az upstream jelsorozat aminosav-maradék foszforilációs módosításának kaszkádreakcióján keresztül történő aktiválást követően a citoplazmában lévő JNK a sejtmagba vándorol, teljesen aktiválja a JNK-t és enzimatikus aktivitást mutat, részt vesz a sejtek szabályozásában. További kutatások kimutatták, hogy a JNK útvonal aktiválása sejtkárosodáshoz vezet, és végül apoptózist vált ki. Érdemes megjegyezni, hogy a JNK gátlása után a sejtkárosodás és az apoptózis is gátolt. Az ASK1 a JNK útvonal előtt helyezkedik el, és normál fiziológiás körülmények között komplexeket képez a megfelelő fehérjékkel. Kóros körülmények között azonban az ASK1 a 183-as treonin és a 185-ös tirozin MAP2K (például MKK4 és MKK7) általi kettős foszforilációjával aktiválódhat. Még mindig vannak kísérleti bizonyítékok arra, hogy az ASK1 túltermelése hepatocita apoptózist indukálhat, míg az ASK1 csendesítése gátolhatja a sejtek apoptózisát. A C-Jun a JNK jelátviteli útvonal után helyezkedik el, és az aktivált JNK tovább foszforilálhatja a c-Jun-t, ami fontos szerepet játszik a sejtek jelátvitelében, a proliferációban, az apoptózisban és más életfolyamatokban. Ezenkívül a c-Jun-t a klinikai gyakorlatban különböző betegségek, például a gyulladás és a rák kutatási célpontjának tekintik. Ebben a kísérletben a normál csoporthoz képest a p-ASK1/ASK1, p-MKK4/MKK4, p-JNK/JNK és p-c-Jun/c-Jun arányok a modellcsoportban növekvő tendenciát mutattak, ami a JNK útvonal aktiválódását jelzi; A p-ASK1/ASK1, p-MKK4/MKK4, p-JNK/JNK és p-c-Jun/c-Jun arányai a rezveratrol egyes dóziscsoportjainak szöveteiben különböző mértékben csökkentek a modellcsoporthoz képest, ami azt jelzi, hogy a rezveratrol gátolta a JNK aktiválódását és a JNK jelátviteli útvonal kulcsfontosságú fehérjéinek expresszióját, ezáltal gyengítette a májsejtek apoptózis aktivitását.

Összefoglalva, a resveratrol képes gátolni az emelkedett transzaminázszinteket, az oxidatív stressz szintjét és a gyulladásos válaszokat, valamint szabályozni a JNK jelátviteli útvonalat az apoptotikus aktivitás csökkentése érdekében, ami azt jelzi, hogy jelentősen javíthatja az immunrendszeri májkárosodást.