A lignánok kémiai összetevőinek és májsejtvédő hatásainak vizsgálata a kínai farkasbogyóban
A Leonuri Fructus a Lamiaceae családba tartozó Leonurus japonicus Houtt szárított és érett terméséből származik. Gyógyászati tulajdonságai közé tartozik a vérkeringés elősegítése, a menstruáció szabályozása, a máj tisztítása és a látás javítása. Először a "Shennong Bencao Jing"-ben jegyezték fel, és csípős és enyhe ízéről, valamint a látás javítására, az esszencia táplálására és a nedvesség eltávolítására való képességéről ismert. Gyógyászati felhasználása hosszú múltra tekint vissza. A Yimucao és a Wuweizi két hagyományos kínai gyógyszer ugyanabból a növényből, különböző gyógyhatású részekkel. Hagyományos hatásaiknak is vannak hasonlóságaik és különbségeik. A "Compendium of Materia Medica" megkülönbözteti a két kínai gyógyszer funkcióit és javallatait: "A jimucao elősegíti a vérkeringést és táplálja a vért... Valóban a vér családjának szent gyógyszere. A Wuweizi kiválóan alkalmas a nők szabálytalan meridiánjainak, a magzat születésének és mindenféle vér- és qi-betegségnek a kezelésére. Gyökerei, szára, virágai és levelei mind gyógyszerként használatosak, és együttesen is alkalmazhatók. Ha kezeli a kéz és láb stagnálását, a jin és a vér szétválását, a szél és a hő, a májhő tisztítását és tisztítását, a látás és az esszencia javítását, valamint a női meridiánok szabályozását, akkor a Wuweizi önmagában is jó. Ha duzzanatokat, méreganyagokat, sebek és fekélyek kezelésére szolgál, akkor a gyulladást is megszüntetheti. A víz elősegíti a vérkeringést, és ha egy nő különböző betegségekben szenved a terhesség alatt, akkor célszerű kombinálva használni a jót. Ebből látható, hogy mind az anyóska, mind a farkasalma funkciója a vérkeringés elősegítése és a vér pangásának megszüntetése, de az előbbi a vérkeringés elősegítésére és a vér pangásának megszüntetésére, míg az utóbbi a máj tisztítására és a látás javítására jó. A Polygonatum sibiricummal kapcsolatos jelenlegi kutatások szélessége és mélysége azonban jóval kisebb, mint a Leonurus heterophyllusé. A kémiai vizsgálatok szerint a Leonurus heterophyllusban több mint 300 kémiai komponenst izoláltak és azonosítottak, és számos szakirodalom magyarázza farmakológiai hatásait és mechanizmusait az értágításban, a vérlemezke-aggregáció ellen és a méh simaizomzatának szabályozásában. A Polygonatum sibiricumban azonban kevesebb mint 70 vegyületről számoltak be, a fő komponens-típusok a triterpenoidok, ciklikus peptidek, flavonoidok, szterolok, fenilpropanoidok, lignánok és alkaloidok. A modern farmakológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a Polygonatum sibiricumnak olyan hatásai vannak, mint a méhösszehúzódás, a májsejtek védelme, a tirozináz és az acetilkolinészteráz aktivitás gátlása, rákellenes, gyulladáscsökkentő, neuroprotektív stb. hatásai. A legtöbb farmakológiai vizsgálat azonban csak a kivonat farmakológiai hatásaira összpontosít, és viszonylag kevés kutatás foglalkozik az egyes összetevők farmakológiai hatásaival és mechanizmusaival. Az előzetes kutatás során a kutatócsoport megállapította, hogy a kínai farkasbogyó magvaiban található tetrahidrofurán lignánok jelentős májsejtvédő hatással rendelkeznek, és fluoreszcenciafestéssel, Western blot-olással és más módszerekkel feltárta a lehetséges hatásmechanizmust. Ezért a Fructus Polygonatum sibiricum májvédő hatású hatóanyagainak további vizsgálata érdekében ez a tanulmány különböző kromatográfiás és spektroszkópiai technikákat alkalmazott a Fructus Polygonatum sibiricum n-butanol frakciójából 8 lignán izolálására és azonosítására. Ezután MTT, Hoechst 33342 fluoreszcencia festés és Western blot technikákat alkalmaztunk a vegyületek májsejtkárosodást védő hatásainak és mechanizmusainak jellemzésére.

 

Ebben a tanulmányban nyolc lignánt izoláltak és azonosítottak a Polygonatum sibiricum n-butanol frakciójából, és az 1-8 vegyületeket először izolálták Polygonatum sibiricumból. Jelenleg a Polygonatum sibiricum magjából izolált fő vegyületek a triterpenoidok, és a kutatócsoport eddig 23 lignánt izolált a Polygonatum sibiricumból. A szakirodalmi kutatások azt találták, hogy a Leonurusból és a Leonurusból izolált monomer vegyületek főként terpenoidok, de a Leonurusban található lignánokról kevés jelentés született. Ezért feltételezhető, hogy a lignánok a Leonurus és a Leonurus közötti differenciális anyagok.

Az acetaminofen, más néven paracetamol, egy anilin alapú lázcsillapító és fájdalomcsillapító gyógyszer. Túlzott használata könnyen májkárosodást vagy akár májelégtelenséget okozhat, főként azáltal, hogy a májsejtekben mitokondriális diszfunkciót és sejt apoptózist okoz, ami súlyos májtoxicitást eredményez. Ezért az APAP-ot gyakran használják a gyógyszer okozta májkárosodás modellezésére. Ebben a kísérletben az APAP-ot használták egy in vitro májkárosodási modell létrehozására, és az izolált vegyületeket májsejtvédő aktivitás szempontjából vizsgálták. Az eredmények azt mutatták, hogy az 1. és 3. vegyület jelentősen gátolta az APAP által kiváltott májsejtkárosodást, 10,23 ± 2,45 μ mol/l és 5,20 ± 1,28 μ mol/l EC50 értékkel. Eközben fluoreszcens festési kísérletekkel megfigyelték, hogy a 3. vegyület képes gátolni az apoptózist a HL-7702 sejtekben.

A sejtek apoptózisának intrinzikus útját a B-sejtes limfóma (Bcl-2) család fehérjéi szabályozzák, amelyek egy fehérje-fehérje kölcsönhatási hálózatot alkotnak, és a mitokondriumok külső membránjának permeabilitását befolyásolva szabályozzák a sejt apoptózisát. A Bcl-2 és a Bax a sejtek apoptózisát szabályozó kulcsfehérjék párja. A Bcl-2 egy antiapoptotikus fehérje, amely fokozza a májsejtek ellenállását a legtöbb DNS-károsító faktorral szemben, míg a Bax egy proapoptotikus fehérje, amely a mitokondriális membrán fokozott permeabilitását idézi elő, és citokróm c-t szabadít fel, ami a sejt apoptózisához vezet. A Bcl-2 és a Bax fehérje expressziójának aránya tükrözi a sejtek túlélési képességét, miután apoptózissal stimulálták őket. A 3. vegyület sejtapoptózis-gátló mechanizmusának további feltárása érdekében Western blot technológiát alkalmaztunk a Bcl-2 és Bax fehérjék expressziós szintjének kimutatására. Az eredmények azt mutatták, hogy a 3-as vegyület képes felszabályozni a Bcl-2 fehérje expresszióját, leszabályozni a Bax fehérje expresszióját és növelni a Bcl-2/Bax arányt, ami arra utal, hogy a 3-as vegyület a Bcl-2 és Bax fehérjék expressziós szintjének szabályozásával apoptózisellenes hatást fejthet ki, ezáltal védő hatást gyakorolva a májsejtekre.

Ez a tanulmány feltárta a Radix Polygonatum sibiricum májsejtvédő aktivitásának farmakológiai anyagalapját és hatásmechanizmusát, ami alapot nyújt a Radix Polygonatum sibiricum hagyományos hatékonyságának megvilágításához, és megkönnyíti a jövőben a gyógyászati erőforrások ésszerű fejlesztését és felhasználását. A kutatócsoport eddig hat májsejtvédő hatású lignánt izolált a Fructus Ranunculiból, köztük a frutoligid A fruleoligid B、lariciresinol-4-O-β-D-glükozid、lariciresinol-4′-O-β-D-glükozid、 (+) - izoquercetin -9 '- O - β - D-glükozid, artemisinin. A "Compendium of Materia Medica" szerint a kínai farkasbogyó jó májtisztító és látásjavító hatású, de jelenleg csak korlátozott kutatások vannak a májtisztító és látásjavító hatás anyagi alapjairól és hatásmechanizmusáról. A kutatócsoport kutatásai során kiderült, hogy a kínai farkasbogyóban lévő lignánok jó májsejtvédő hatással rendelkeznek, ami a kínai farkasbogyó májtisztító és látásjavító hatásának hatóanyagi alapja lehet.