Az Angelica sinensisből származó összes flavonoid kulcskomponensének feltárása az anti-reumatoid artritiszben a spektrális hatáskapcsolat és a komponensek kiütése alapján
A Lamiophlomis Herba (LH), egy hagyományos kínai gyógyszer, a Lamiaceae családba tartozó Lamiophlomis rotata (Benth.) Kudo növény szárított föld feletti része. A tibetiek általánosan használt gyógynövény, amelyet hagyományos kínai gyógyszerként is gyakran alkalmaznak. A Kínai Népköztársaság gyógyszerkönyvének 2020-as kiadása szerint a vérkeringést elősegítő, vérzéscsillapító, szélűző és fájdalomcsillapító hatású. Használható esések okozta sérülések, reuma és sárgavíz-betegség kezelésére. Tibeti gyógyászati neve "Daba" és "Dabuba", amelyeket olyan tibeti orvosi művekben jegyeztek fel, mint a "Yue Wang Yao Jian", "Four Medical Classics", "Jing Zhu Ben Cao" stb. Alkalmazásának története eddig 1200 évre nyúlik vissza; a "Jingzhu Bencao" feljegyzi, hogy "a Du Yi Wei megszilárdítja az esszenciát és elvezeti a sárga vizet", ami azt jelzi, hogy a Du Yi Wei használható a "sárga víz betegség" kezelésére. A klinikai megnyilvánulások alapján a tibeti orvoslásban feljegyzett "sárga víz betegség" a hagyományos kínai orvoslásban a "bi szindrómához" sorolható. A "bi szindrómából" kialakult "csont bi" és "li jie betegség" szorosabban kapcsolódik a modern orvostudományban a "reumatoid artritisz (RA)" klinikai jellemzőihez. Ezért a Du Yi Wei alkalmas az RA kezelésére, és a meglévő kutatások azt is kimutatták, hogy a Du Yi Wei RA-ellenes hatással rendelkezik.
Az RA egy autoimmun betegség, amelyet krónikus és többszörös ízületi gyulladások jellemeznek. Patológiai jellemzői közé tartozik a synovialis sejtek tumorszerű burjánzása és az érhomályok kialakulása, a fibroblasztszerű synoviociták (FLS) a fő effektor sejtek. Az RA patogenezise jelenleg még mindig nem tisztázott. Előfordulási aránya és rokkantsági aránya magas, és általában látens. A betegség késői stádiumában különböző mértékű irreverzibilis rokkantsághoz vezethet, amely az Egészségügyi Világszervezet által meghatározott modern refrakter betegség. A klinikai gyakorlatban az RA kezelésére általánosan használt kémiai gyógyszerek közé tartoznak a nem szteroid gyulladáscsökkentők, az immunszuppresszánsok, a glükokortikoidok és a biológikumok. Az első három kémiai gyógyszer jelentős mellékhatásokkal jár, míg a biológiai szerek drága ára korlátozza hosszú távú alkalmazásukat. Ezért különösen szükséges új, alacsony mellékhatásokkal és stabil terápiás hatással rendelkező klinikai RA-ellenes gyógyszerek kifejlesztése.
A kutatócsoport először alkalmazta a hálózati farmakológiát a Du Yi Wei farmakológiai hatóanyag-alapjának és hatásmechanizmusának feltárására az RA kezelésében. Megállapították, hogy a Du Yi Wei RA-ra gyakorolt terápiás hatása 23 összetevőjéhez kapcsolódik, amelyek közül a flavonoidok közel 40%-t tesznek ki, ami azt jelzi, hogy a flavonoidok fontos szerepet játszanak a Du Yi Wei RA-ellenes folyamatában, különösen a luteolin; És azt javasolják, hogy a Du Yi Wei RA-ellenes hatásának fő mechanizmusa a PI3K Akt jelátviteli útvonal gátlásával a szinoviális sejtek apoptózisának kiváltása lehet. Eközben a Du Yi Wei anti-RA hatását és farmakológiai anyagának alapját patkány adjuváns artritisz modellen keresztül vizsgálták, és az eredmények azt mutatták, hogy a Du Yi Wei összes flavonoidja jó anti-RA hatással rendelkezik. A Du Yi Wei összes flavonoidja lehet az egyik fő farmakológiai anyag az anti RA hatásért, de a Du Yi Wei összes flavonoidjának kulcsfontosságú anti RA összetevői még mindig nem tisztázottak és további kutatást igényelnek. Ezért e tanulmány célja az Angelica sinensis összes flavonoidjában lévő kulcsfontosságú RA-ellenes komponensek feltárása spektrális hatáskapcsolatok és komponens knockout technikák segítségével, azzal a céllal, hogy elméleti alapot és hivatkozási alapot biztosítson az Angelica sinensis klinikai alkalmazásához az RA kezelésében.

Megbeszélés és következtetés
Az Angelica sinensisben található összes flavonoidok ujjlenyomatának előzetes vizsgálatát nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás diódasoros detektorral (HPLC-DAD) végeztük. Az Angelica sinensis összes flavonoidminták egyes tételeinek ujjlenyomat-spektrumai és a megállapított kontroll-ujjlenyomat-spektrumok közötti hasonlóság nagyobb volt, mint 0,9, ami azt jelzi, hogy az Angelica sinensis összes flavonoidminták különböző tételeiben található kémiai komponensek konzisztensek voltak. A kutatócsoport megvizsgálta az Angelica sinensisben lévő összes flavonoidok különböző koncentrációinak és beadási idejének hatását az FLS sejtek életképességére a korai szakaszban. Ennek alapján a CCK-8 módszerrel 64 μ g/ml koncentrációban 48 órán keresztül kezelték az FLS sejteket, hogy megvizsgálják az Angelica sinensisben lévő összes flavonoidok különböző tételeinek az FLS sejtek életképességére gyakorolt hatását. Az eredmények azt mutatták, hogy az Angelica sinensisben található összes flavonoidok mind a 13 tétele jelentősen gátolni tudta az FLS sejtek életképességét. Az Angelica sinensisben lévő összes flavonoidok ujjlenyomat-spektruma és a sejthatékonysági kísérletek eredményei alapján szürke relációs analízist és részleges legkisebb négyzetek (PLS) regresszióanalízist alkalmaztunk az Angelica sinensisben lévő összes flavonoidok spektrum-hatás kapcsolatának megállapítására az RA ellen. Az eredmények azt mutatták, hogy az Angelica sinensis összes flavonoidjában a verbaszkozid és a verbaszkozid komponensei jelentős szerepet játszottak az RA elleni hatékonyságban. A vékonyréteg-kromatográfia alapján az Angelica sinensis összes flavonoidjának magas verbaszkozid-tartalmát hatékonyan kiiktatták, és az egyes minták FLS sejtek életképességére gyakorolt hatását CCK-8 módszerrel határozták meg. Az eredmények azt mutatták, hogy a teljes komponens és a célkomponens minták jelentősen gátolni tudták az FLS sejtek életképességét, míg a negatív célkomponens minta nem gyakorolt jelentős gátló hatást az FLS sejtek életképességére. Ugyanakkor összehasonlítottuk a verbaszkozid és a verbaszkozid ekvimoláris mennyiségének az RA-FLS sejtek életképességére gyakorolt hatását. Az eredmények azt mutatták, hogy mind a verbaszkozid, mind a verbaszkozid szignifikánsan gátolni tudta az FLS sejtek életképességét, de a verbaszkozid csoport és a verbaszkozid csoport között nem volt szignifikáns különbség.
Összefoglalva, e vizsgálat eredményei azt mutatják, hogy a verbaszkozid és a verbaszkozid összetevői jelentős szerepet játszanak az Angelica sinensis összes flavonoidjának RA-ellenes hatékonyságában. Az Angelica sinensisben lévő összes flavonoidok ujjlenyomat-elemzésével kombinálva a verbaszkozid tartalma jelentősen magasabb, mint a verbaszkozidé, ami azt jelzi, hogy a verbaszkozid (C21H20O11) az Angelica sinensisben lévő összes flavonoidok kulcsfontosságú összetevője az anti RA szempontjából. Ez tudományos alapot nyújthat a Du Yi Wei-ből származó összes flavonoidok klinikai alkalmazásához az RA kezelésében. Az ozmanthus glikozidok széles körben jelen vannak különböző gyógynövényekben, és jelentős hatással rendelkeznek gyulladáscsökkentő, antioxidáns, rákellenes és hipoglikémiás szempontból, minimális toxikus mellékhatásokkal. Bár a verbaszkozid komponensei viszonylag gyakoriak, a verbaszkozid RA-ellenes hatásairól jelenleg nincs elegendő irodalom. Ebben a tanulmányban a CCK-8 módszert használták a verbaszkozid RA-FLS sejtek életképességére gyakorolt hatásának vizsgálatára, és egyértelműen kimutatták, hogy a verbaszkozid gátló hatással van az FLS sejtek életképességére. Ezt követően egy patkány artritisz modellt lehet létrehozni az in vivo hatékonyság ellenőrzésére, és a hatásmechanizmusa megmagyarázható, ami több hivatkozást és alapot biztosít az Angelica sinensis teljes flavonoidjainak klinikai alkalmazásához az RA kezelésében.