A Ficus microcarpa és rokon fajainak azonosítása ITS2 szekvencia és HPLC ujjlenyomat alapján
A Ficus pandurata Hance, más néven tejfa vagy tejmag, a Moraceae családba tartozó Ficus nemzetségbe tartozó növény. Elsősorban Guangdong, Guangxi, Jiangxi, Hainan, Fujian, Hunan, Hubei, Jiangxi, Anhui, Zhejiang és más helyeken elterjedt. A "Dictionary of Traditional Chinese Medicine", a "Fujian Medicinal Records" és a "Jiangxi Folk Herbal Formula Testing" szerint a Ficus microcarpa gyökér- és levélrészeit gyógyszerként használják. Enyhe természetű, édes és enyhén hűvös ízű, és nem mérgező. Hőtisztító, a lépet élénkítő, étvágygerjesztő, a qi-t tápláló és folyadékot termelő, valamint a nedvességet és a pangást eloszlató hatása van. A szelek és a nedvesség eloszlatására, méregtelenítésre, malária kezelésére és a szoptatás elősegítésére használják. Például a "Jiangxi Folk Herbal Formula Testing" feljegyzi, hogy a Ficus microcarpa gyökér és a Malan mérsékelt mennyisége használható a sárgaság kezelésére, ha szájon át, tiszta vízzel főzetben veszik be; A banyan gyökér, a Brahma gyökér, a Stephania tetrandra, az Acanthopanax senticosus gyökér és az ürömszár megfelelő mennyisége használható az ágyéki gerincfájdalom kezelésére a Baijiu és az azonos térfogatú víz keverékével. Guangdongban a Ficus microcarpa hosszú étkezési és gyógyászati múltra tekint vissza, és mély tömegbázissal rendelkezik, amely a helyi jellegzetes tonikus étrend és a diétás gyógyászat nyersanyagainak fontos részévé vált. A modern kutatások kimutatták, hogy a Ficus microcarpa olyan hatóanyagokat tartalmaz, mint a triterpenoidok, flavonoidok, kumarinok és fenolsavak. Ezek közül a bergamott-lakton különböző farmakológiai tevékenységekkel rendelkezik, mint például daganatellenes, vércukorszint-szabályozó, álmatlanságot javító, csontritkulás megelőzésére és kezelésére, öregedésgátló, gyulladáscsökkentő és antiallergiás hatás; a pszoralénnek farmakológiai hatásai vannak, mint például csontritkulás elleni, idegvédő, daganatellenes, ösztrogénszerű, gyulladáscsökkentő, stb; mindkettő csontritkulás elleni hatású, bőséges és könnyen hozzáférhető, és a Ficus microcarpa reprezentatív hatóanyagai.
Jelenleg a Ficus microcarpa gyógynövénykeverékek három fő típusa van forgalomban: Ficus microcarpa var. holophylla, Ficus microcarpa var. angustifolia és Ficus microcarpa var. hirta. A Quanyuan Qinye Ficus és a Tiaoye Ficus a Qinye Ficus változatai, a három közül átmeneti levélformával; Ezenkívül mind a Ficus microcarpa, mind a Ficus microcarpa gyökerét gyógyszerként használják, és tejes aromájuk van. A piacon gyakran tejfagyökér néven árulják őket, ami a gyógyászati anyagok egyenetlen minőségét eredményezi. Jelenleg a Ficus microcarpa modern kutatása elsősorban a farmakognózissal, a kémiai összetétellel és a farmakológiai aktivitással foglalkozik, és nincsenek jelentések a Ficus microcarpa minőségi szabványairól. A DNS-vonalkód azonosítás egy molekuláris biológiai azonosítási módszer, amely egy szabványos, viszonylag rövid DNS-szekvenciát használ a faj azonosítására. Ez a módszer nagy jelentőséggel bír az új kínai gyógyászati erőforrások fejlesztésének és felhasználásának előmozdításában, a kínai gyógyászati azonosító tehetségek hiányának enyhítésében, a kínai gyógyászati piacok forgalmának irányításában, valamint a rejtett vetőmag-problémák kezelésében, amelyeket a morfológia nehezen tud leküzdeni. A HPLC-ujjlenyomat megbízható módszer a hagyományos kínai gyógyászat kromatográfiás technikákkal nyert kémiai összetevőinek eredetiségének azonosítására, a minőségi konzisztencia értékelésére és stabilitására az anyagcsoportok általános hatásának megértésén alapuló kromatográfiás technikák segítségével. Ebben a kísérletben az ITS2 szekvenciákat használták a Ficus microcarpa és a vele rokon fajok molekuláris azonosítására. HPLC-ujjlenyomat-spektrumokat hoztunk létre a pszoralén és a bergamott-lakton tartalmának különbségeinek meghatározására, valamint a Ficus microcarpa és a vele rokon, különböző eredetű fajok azonosítására. Ez tudományos alapot nyújt a Ficus microcarpa gyógyászati anyagok minőségellenőrzéséhez és értékeléséhez.

A kísérletben elemezték a Ficus microcarpa és rokon fajainak ITS2-szekvenciáját, K2P genetikai távolságát, NJ fa klaszterezési elemzését és másodlagos szerkezetét. Mind az NJ fa klaszterezési analízis, mind a másodlagos szerkezet hatékonyan képes megkülönböztetni a Ficus microcarpa-t és a vele rokon fajokat. A K2P-fajokon belüli és a fajok közötti genetikai távolság azonban bizonyos korlátokat mutat a Ficus microcarpa és a vele rokon fajok azonosításában, és az azonosításhoz az NJ fa klaszterező elemzés és a másodlagos szerkezet kombinációja szükséges.

A kísérletben olyan kromatográfiás körülményeket vizsgáltak, mint a különböző extrakciós oldószerek, detektálási hullámhosszok, oszlophőmérsékletek, mobilfázis-rendszerek és kromatográfiás oszlopok. Az eredmények azt mutatták, hogy 95% etanolos extrakció, XBridge Peptid BEH C18 (5 μ m, 4,6 mm × 250 mm) kromatográfiás oszlop, 330 nm detektálási hullámhossz, 30 ℃ oszlophőmérséklet, 1,0 ml/perc áramlási sebesség és metanol-pH8 foszfát pufferoldat mobilfázis használatával az egyes színspektrumok csúcsformái és elválasztási foka jó volt. Megállapítottuk a Ficus microcarpa és a vele rokon fajok HPLC-ujjlenyomat-spektrumát, betölti a Ficus microcarpa HPLC jellegzetes spektrumainak tanulmányozásában keletkezett hiányt. A Ficus microcarpa és a vele rokon fajok ujjlenyomat-spektrumai jelentős különbségeket mutatnak a jellemző csúcsok számában és a relatív retenciós időben, ami intuitív módon megkülönbözteti a Ficus microcarpa-t a vele rokon fajoktól, és alkalmazható a Ficus microcarpa minőségének értékelésére. A különböző eredetű Ficus microcarpa-ban összesen 10 kromatográfiás csúcs található, amelyek többsége nem volt kimutatható a Ficus microcarpa-ban és a Ficus microcarpa-ban. A közeli rokon fajok és a Ficus microcarpa közötti hasonlóság kisebb, mint 0,807; A Ficus microcarpa és a rokon fajok között jelentős különbség van a pszoralén és a bergamott-lakton tartalmában. A Ficus microcarpa és a Ficus microcarpa tartalma szignifikánsan alacsonyabb, mint a Ficus microcarpaé, ami a Ficus microcarpa és a rokon fajok közötti minőségi különbségre utal. Fontos gyakorlati útmutató értékkel bír a pszoralén- és bergamotlakton-tartalomnak a Ficus microcarpa minőségellenőrzési indikátorként való használatához. Ezért az ujjlenyomat-spektrum, a hasonlóság és a tartalom meghatározása objektíven és pontosan megkülönbözteti a Ficus microcarpa gyógyászati anyagok eredetiségét, ami hatékonyan használható a Ficus microcarpa gyógyászati anyagok minőségellenőrzésére és eredetiségének azonosítására.

Összefoglalva, a Ficus microcarpa és rokon fajainak DNS-vonalkódját és HPLC-ujjlenyomatát megállapították. A módszer egyszerű, megbízható, stabil és jól megismételhető, ami használható a Ficus microcarpa és rokon fajainak ujjlenyomat-kutatására és hiteles azonosítására. Ugyanakkor tudományos alapot biztosít a Ficus microcarpa minőségének további javításához.
A PPI-hálózatban 42 fontos célpontot választottak ki a fokozati rangsor alapján, amelyek főként 5 kategóriába sorolhatók: fehérje-tirozin-foszfatázok (PTPN1, PTPN2, PTPN6, PTPN11 stb.), foszfatidil-inozitol-3-kinázok (PIK3R1, PIK3CB, PIK3CA stb.), mitogén aktivált fehérje kinázok (MAPK1, MAPK3, MAPK8, MAPK14 stb.), ciklinfüggő kinázok (CDK1, CDK2, CDK4 stb.) és egyéb fontos célpontok (VEGFA, HSP90AA1, LCK stb.). Ezek a fontos célpontok referenciát nyújthatnak az UC célzott terápiájához.