A Bombyx mori minőségértékelésének vizsgálata HPLC-ujjlenyomattal kombinált kémiai mintafelismerés révén
A Bombyx mori a klinikai gyakorlatban az egyik leggyakrabban használt állati gyógyszer, amelyet elsősorban olyan betegségek kezelésére használnak, mint a máj szélflegma, görcsök, csecsemőkori riadalom, tetanusz stb. Forrása a selyemhernyó Bombyx mori Linnaeus 4.-5. stádiumú lárváinak szárított teste, amelyek Beauveria bassiana (Bals.) Vuillart-val fertőzöttek és elpusztultak. Kémiai vizsgálatok kimutatták, hogy fő hatóanyagai fehérjék, aminosavak, flavonoidok és egyéb összetevők. A modern farmakológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a Bombyx mori fehérjében gazdag kivonata epilepsziaellenes, immunmoduláló és gátló hatású A G7 tumort hordozó egerek daganatos növekedése fokozott védőhatással bír, elősegíti a Parkinson-kóros egerek MPTP által kiváltott motoros károsodásának helyreállítását, megakadályozza a dopamin kimerülését stb.
Mivel a selyemhernyó egyetlen táplálékkal rendelkezik, az a jellemzője, hogy kizárólag eperfa levelekkel táplálkozik, meghatározza az eperfa levelekben található fő flavonoidok gazdag és változatos felszívódását, átalakulását és anyagcseréjét a szervezetében. A kutatások kimutatták, hogy a Fusarium oxysporummal való fertőzés után a selyemhernyókban a flavonoidok biotranszformáción mennek keresztül. Például az olyan flavonoidok, mint a kvercetin és a kaempferol 4-O-metilglükozilációs reakció révén kvercetin-7-O - β - D-4-O-metilglükoziddá és kaempferol-7-O - β - D-4-O-metilglükoziddá alakulnak át. Xing és munkatársai megállapították, hogy a halál időpontjának növekedésével a flavonoidok tartalma és átalakulása is különbözik a szervezetben, és azt feltételezték, hogy a kvercetin-7-O - β - D-4-O-metilglükozid és a kaempferol-7-O - β - D-4-O-metilglükozid használható az egyik minőségellenőrzési indikátorként. Ezért a flavonoidok fontos mutatóként szolgálhatnak a selyemhernyók minőségének értékeléséhez.

Az ujjlenyomat-spektrum és a kémiai mintafelismerés kombinációja hatékony módszer a hagyományos kínai gyógyszerek minőségének értékelésére, amelyet széles körben alkalmaznak a hagyományos kínai gyógyszerek, a kínai gyógyszerek főzetdarabjainak, a képlet granulátumainak stb. minőségértékelésében. Jelenleg a selyemhernyókkal kapcsolatos ujjlenyomat-spektrumokról különböző tanulmányok készültek, beleértve az ultraibolya ujjlenyomatot, az infravörös ujjlenyomatot, a HPLC, a HPCE és a fehérje ujjlenyomat-spektrumokat. Az összetételi kategóriák a vízben oldódó komponensekre, lipidben oldódó komponensekre, alkoholban oldódó komponensekre stb. terjednek ki. Problémát jelent azonban a gyenge elválasztási hatékonyság és a korlátozott azonosító csúcsok, ami megnehezíti minőségi jellemzőik jellemzését. A kutatók kimutatták, hogy a Sichuanban termelt selyemhernyók jobb minőségűek és magasabb a Beauveria bassiana szintje, mint más régiókban, például Guangxiban, Yunnanban és Zhejiangban. Bár készült néhány kutatási jelentés a Bombyx mori kémiai összetételéről és minőségellenőrzéséről, jelenleg nincs jó minőségellenőrzési módszer a Bombyx mori összetett összetétele és alacsony tartalma miatt. Ezért ebben a tanulmányban nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát használtak 20 különböző eredetű selyemhernyó gyógyászati anyagtétel ujjlenyomat-spektrumának létrehozására, és differenciálási kutatást végeztek a kémiai azonosítási módok, például a hasonlósági elemzés, a klaszterelemzés és a főkomponens-elemzés kombinálásával. A Kínai Gyógyszerkönyv 2020-as kiadásában a selyemhernyó tételre vonatkozó követelményekre hivatkozva meghatározták a nedvességtartalmat, az összes hamutartalmat, a savban oldhatatlan hamutartalmat és a kivonatot. A Beauveria bassiana hatóanyag-tartalmat a kutatócsoport korábbi módszerével határozták meg, azzal a céllal, hogy átfogóan értékeljék a különböző eredetű gyógyászati anyagok minőségét, tudományos alapot biztosítsanak a selyemhernyó gyógyászati anyagok minőségellenőrzéséhez és szabványjavításához, és referenciát nyújtsanak más gyógyászati anyagok kutatásához.

Ez a kísérlet az előkezelési feltételeket, mint például az extrakciós módszert, az extrakciós oldószert és az extrakciós időt vizsgálta, és megállapította, hogy az extrakciós módszer (reflux extrakció, ultrahangos extrakció) az ultrahangos extrakcióhoz, az extrakciós oldószer (metanol, 80% metanol, acetonitril és víz) a 80% metanolhoz, az extrakciós idő (15, 30, 45 perc) pedig a 30 perchez volt optimális. A selyemhernyó megállapított ujjlenyomata 0,92 és 0,99 közötti hasonlóságot mutatott, ami viszonylag magas, és alapot nyújt a selyemhernyó minőségének értékeléséhez.
A kutatóintézetünk által létrehozott ujjlenyomat-spektrum elsősorban a Bombyx mori gyógyászati anyagaiban található flavonoidokra összpontosít. Wang és munkatársai hálózati farmakológiai és molekuláris dokkolási technikákat használtak az eredmények vizsgálatához, amelyek azt mutatták, hogy a kvercetin, a kaempferol és más komponensek lehetnek a Bombyx mori szél- és görcsoldó képességének fő anyagi alapkomponensei. Több tanulmány is kimutatta, hogy a kvercetin és a kaempferol az epilepszia kezelésének egyik fő hatóanyaga. A szél és a görcsök enyhítésének egyik legfontosabb gyógynövényeként a Bombyx mori hatásának egyik anyagalapja a flavonoidok lehetnek. Ezen túlmenően ez a tanulmány korrelációs elemzést is végzett az egyes közös csúcsok területe és a gyógyászati anyagok jellemzői, kivonata, teljes hamutartalma és fehér muskardintartalma között. Az eredmények azt mutatták, hogy a keresztmetszeti jellemzők pozitívan korreláltak a felületi jellemzőkkel, a gyógyászati anyag hosszával és a fehér muszkardintartalommal, és pozitívan korreláltak az 1., 2., 3., 4., 6. és 7. csúcsok csúcsterületeivel. Összehasonlítás után az 1., 2., 4., 6. és 7. csúcsokat rutin, hiperozid, asztragalozid, kvercetin és kaempferol néven azonosították, amelyek az eperfa levelek fő flavonoidjai. Ez azt jelzi, hogy a flavonoidok átalakulása a selyemhernyók kialakulása során a keresztmetszet "üvegtestéhez" kapcsolódik. Erős összefüggés van a gyógynövények minősége és a képződés között, ami szintén megerősíti a "fehér szín, egyenes csíkok, fekete és fényes keresztmetszet a selyemhernyók számára előnyös" minőségi jellemző pontot az ősidők óta.

Összefoglalva, az ebben a cikkben megállapított ujjlenyomat spektrum nemcsak a selyemhernyó "Xifeng Zhijing" farmakológiai hatásának lehetséges anyagi alapkomponenseit tartalmazza, hanem bizonyos korrelációval rendelkezik magának a selyemhernyó gyógyászati anyagnak a minőségi mutatóival is, ami átfogóan tükrözi a selyemhernyó gyógyászati anyag minőségét, és tudományos alapot biztosít a selyemhernyó gyógyászati anyag minőségellenőrzéséhez. A Cordyceps sinensis gyógyászati anyagokra vonatkozó minőségellenőrzési szabványokban teljes mértékben figyelembe kell venni, hogy ez egy komplex "baktérium rovarlevél", és több mutatót kell használni a minőség átfogó értékelésére, a gyógyászati anyagok tudományosabb és ésszerűbb minőségi szabványának megállapítására.