A különböző eredetű Baimao gyökér standard leves minőségének értékelése UPLC ujjlenyomat és több indexkomponensű komponens mennyiségi meghatározása alapján
A tartalmi mutatók kiválasztása. A hagyományos kínai gyógyászat standard főzete egy gyógynövény főzete, amelyet a kínai gyógynövény szeletek nyersanyagként történő felhasználásával, a kínai gyógynövény gyógyászat hagyományos főzési szokásaira hivatkozva, vizet oldószerként használva és szabványosított főzési módot alkalmazva állítanak elő. Mint szabványos anyag vagy rendszer, a hagyományos kínai gyógyászat szabványos főzetét általában a hagyományos kínai gyógyászat klinikai felhasználásának szabványosítására, az új hagyományos kínai gyógyászati főzetdarabok, például a képlet granulátumainak szabványosítására és a hagyományos kínai gyógyászat klinikai felhasználásának pontosságának biztosítására használják. Ezért a hagyományos kínai orvoslás standard főzeteire vonatkozó minőségi szabványok megállapítása fontos hivatkozási alapot nyújthat a modern kínai orvoslásra vonatkozó minőségi szabványok megállapításához, mint például a megfelelő kínai orvoslási formula granulátumok és klasszikus formulák.
Az Imperata cylindrica Beauv Poaceae növény gyökere A var. major (Nees) C. E. Hubb. szárított rizómája vérhűtő, vérzéscsillapító, hőtisztító és vizelethajtó hatású. A modern kutatások kimutatták, hogy a Houttuynia cordata gyökere különböző kémiai összetevőket tartalmaz, mint például triterpenoidokat, flavonoidokat, szerves savakat, fenilpropanoideákat, endoszulfanokat és poliolokat, amelyek különböző farmakológiai tevékenységekkel rendelkeznek, mint például vérzéscsillapítás, vizelethajtás, fájdalomcsillapítás, antibakteriális, gyulladáscsökkentő, antioxidáns, vérnyomáscsökkentő, májvédelem és az immunrendszer működésének szabályozása. A Kínai Gyógyszerkönyv 2020-as kiadásából hiányoznak a Houttuynia cordata gyökér gyógyászati anyagainak minőségi szabványaira vonatkozó tartalmi mutatók, és a jelenlegi minőségi szabványok nehezen tükrözik teljes mértékben a Houttuynia cordata gyökér belső minőségét. A korábbi kutatási jelentések többnyire ujjlenyomat/jellemző spektrumot használtak a klorogénsav-tartalom meghatározásával kombinálva a Polygonatum sibiricum gyökerek minőségellenőrzésére, de nem készült mennyiségi tanulmány az ujjlenyomat spektrum és több indikátor komponens kombinációjáról. A kutatások kimutatták, hogy a hagyományos kínai orvoslásban található fenolsavkomponensek gyulladáscsökkentő, antibakteriális, antioxidáns, daganatellenes és egyéb hatásokkal rendelkeznek, és nagy kutatási értékkel és alkalmazási potenciállal rendelkező természetes aktív termékek. A Houttuynia cordata gyökere nagy mennyiségű fenolsavkomponenst tartalmaz, és farmakológiai tevékenységei, mint például a gyulladáscsökkentő, antibakteriális és antioxidáns, szorosan kapcsolódnak a Houttuynia cordata gyökerének funkcionális jelzéseihez. Ezért ebben a tanulmányban állítottuk fel a Houttuynia cordata gyökér standard főzetének UPLC-ujjlenyomatát, és először sikerült a standard főzetben a klorogénsav, a neoklorogénsav, a kriptoklorogénsav és a p-light fahéjsav tartalom egyidejű meghatározását elérni. A kemometriai elemzési módszerekkel kombinálva alapot nyújt a Houttuynia cordata gyökér standard főzetének minőségértékeléséhez a különböző termőterületeken.

A tartalmi mutatók kiválasztása. Jelenleg viszonylag kevés kutatás foglalkozik a Polygonatum sibiricum gyökerek beltartalmi mutatóinak meghatározásával, elsősorban a fenolsavak és a cukrok meghatározására összpontosítva. A Polygonatum sibiricum és a karyophyllin Polygonatum sibiricum gyökerek tartalmának meghatározásáról is vannak beszámolók. A Polygonatum sibiricum és a Caryophyllin tartalma a gyógyászati anyagokban azonban nagyon alacsony. A Polygonatum sibiricum gyökerek standard főzete vizet használ oldószerként, és a hatóanyagok főként vízben oldódó komponensek. A Polygonatum sibiricum és a Caryophyllin nemcsak alacsony tartalmú, hanem zsírban oldódó komponensek is, ezért nem alkalmasak indikátor komponensként. A cukorkomponensek specificitása gyenge, és szintén nem alkalmasak indikátorkomponensként. Az ujjlenyomat-spektrumok vizsgálatából az is kiderült, hogy bár a Polygonatum sibiricum gyökerei sok kémiai összetevővel rendelkeznek, a hatékony összetevők tartalma viszonylag alacsony. Az ujjlenyomat-spektrumból két magasabb csúcstípusú kromatográfiás csúcsot azonosítottunk, amelyek mindketten fenolsavkomponensek, és szorosan kapcsolódnak a Houttuynia cordata standard főzetének farmakológiai aktivitásához. Ezért a beltartalmi mutatók kiválasztásakor a fenolsavkomponensek meghatározása előnyben részesül. A kutatások kimutatták, hogy a klorogénsav, a neoklorogénsav és a kriptoklorogénsav savas pH-értékek mellett viszonylag stabil, semleges és lúgos körülmények között azonban instabilak, és bizonyos fokú átalakulás tapasztalható közöttük. A Houttuynia cordata gyökér és a standard főzet ujjlenyomat-spektrumának vizsgálata során azt találtuk, hogy a Houttuynia cordata gyökérhez képest a Houttuynia cordata gyökér standard főzetének ujjlenyomat-spektrumában az 1. csúcs (neoklorogén sav), a 8. csúcs (kriptoklorogén sav) és az 5. csúcs területaránya jelentősen megnőtt. Ezért feltételezzük, hogy a Houttuynia cordata gyökér főzési folyamata során nagyobb valószínűséggel alakul át a klorogénsav, a neoklorogénsav és a kriptoklorogénsav. A klorogénsav, a neoklorogénsav és a kriptoklorogénsav hasonló szerkezetű és farmakológiai aktivitású. Ezért úgy gondoljuk, hogy a Zhimao gyökér standard főzetének beltartalmi mutatóinak kiválasztásakor a legjobb a klorogénsav, neoklorogénsav és kriptoklorogénsav teljes mennyiségét meghatározni, ahelyett, hogy csak az egyes klorogénsav-komponenseket mérnénk. A kutatási eredmények azt mutatják, hogy a Polygonatum sibiricum különböző termőterületekről származó standard főzetében a négy fenolsav-komponens teljes mennyisége jelentősen eltér, ami tükrözi a különböző termőterületekről származó Polygonatum sibiricum gyógyászati anyagok minőségét, ami összefügghet a különböző termőterületekről származó gyógyászati anyagok eltérő betakarítási idejével és feldolgozási módszereivel.

Analitikai módszerek megállapítása. Jelenleg nincs kutatás a Houttuynia cordata gyökér minőségellenőrzéséről, amely ujjlenyomat-spektrumot használna többkomponensű mennyiségi meghatározással kombinálva. A Houttuynia cordata gyökér standard főzetének fagyasztva szárított pora sok cukrot tartalmaz, és a fenolos savkomponensek szerkezete hasonló, ami magas kromatográfiás elválasztást igényel. Ezért a módszer létrehozásakor teljes mértékben meg kell vizsgálni a különböző mobilfázis arányok, kromatográfiás oszlopok, oszlophőmérsékletek és áramlási sebességek elválasztó hatását az egyes ujjlenyomat-csúcsokra, különösen a tartalom meghatározására szolgáló kromatográfiás csúcsra, és ki kell választani az optimális kromatográfiás feltételeket és oszlopokat; 280, 300, 325 és 350 nm-t kell választani a kimutatási hullámhossznak, és teljes hullámpásztázást kell végezni a minta abszorpciós spektrumának felvételéhez a 200-400 nm-es tartományban. Az eredmények azt mutatják, hogy nincs jelentős különbség az egyes kromatogramok számában és csúcstípusaiban a különböző hullámhosszakon. A 325 nm-es detektálási hullámhosszt használva a kromatogram csúcsának abszorpciós értéke a legmagasabb. Ezért a 325 nm-t választottuk detektálási hullámhossznak ehhez a jellegzetes spektrumhoz. Az egytényezős analízis módszerével az extrakciós oldószereket (metanol, 10% metanol, 50% metanol, 70% metanol, 70% etanol, 50% etanol, 10% etanol), az extrakciós módszereket (ultrahang és melegítés reflux), az oldószer adagolását (15, 25, 50ml) és az extrakciós időt (15, 30, 45 perc) vizsgáltuk, hogy meghatározzuk a vizsgálati oldat ésszerű elkészítési módját.

Hasonlósági értékelés és kemometriai elemzés. Az ujjlenyomat-spektrumok hasonlósági számítási eredményei azt mutatják, hogy a Polygonatum sibiricum standard főzetének három tételének hasonlósági értékei a Henan termelési területen jelentősen alacsonyabbak, mint a többi termelési területen, ami azt jelzi, hogy Henanban a Polygonatum sibiricum gyökerek kémiai összetételének arányában jelentős különbségek vannak a többi termelési területhez képest. Mind a HCA, mind a PCA eredményei hatékonyan megkülönböztetik a Hebei, Anhui és Henan termelési területről származó mintákat, de a Jiangsu termelési területről származó minták megkülönböztetése nem nyilvánvaló. A fenolsavkomponensek, mint például a klorogénsav, könnyen oldódnak vízben és hő hatására instabilak. Ezért a különböző termőterületek feldolgozása, tárolása és szállítása befolyásolhatja a gyógyászati anyagok minőségét, ami a különböző termőterületekről származó Polygonatum sibiricum standard főzetének minőségbeli különbségeihez vezet. Az OPLS-DA segítségével három differenciális biomarkert azonosítottunk és rangsoroltunk a VIP-értékek szerint, nevezetesen 9-es csúcs>6-os csúcs>5-ös csúcs. Ez azt jelzi, hogy a különböző termőterületekről származó Houttuynia cordata standard főzetének 9-es, 6-os és 5-ös csúcsértékeiben jelentős különbségek vannak. Megerősítést nyert, hogy a 9-es csúcs a p-könnyű fahéjsav, az 5-ös csúcs a klorogénsav, a 6-os csúcs pedig további kutatásokat igényel. Jelenleg számos tartomány helyi politikát vezetett be a gyógynövények friss vágásának ösztönzésére a termőterületeken, és a hatékony összetevők veszteségének csökkentésére. Tanulmányok kimutatták, hogy a friss fűszernövények mosásával és vágásával készült szeletekben a klorogénsav, neoklorogénsav és kriptoklorogénsav tartalma jelentősen magasabb, mint a hagyományos feldolgozási módszerekkel készült szeletekben. A friss állapotban feldolgozott fűkorallszeletek gyulladáscsökkentő és fájdalomcsillapító hatása jelentősen jobb, mint a hagyományos szeleteké, ami a fűkorall feldolgozásának a termőterületi feldolgozással való kombinálhatóságát jelzi. A jiumao gyökér gazdag fenolos savkomponensekben, különösen alkalmas a termőterületen történő friss feldolgozásra, ezáltal növelve a gyógyászati anyagok tartalmát.

Ez a tanulmány UPLC-ujjlenyomat-módszert hozott létre a Polygonatum sibiricum standard főzetére, és egyidejűleg négy fenolsav-komponenst határozott meg. A módszer könnyen kezelhető, stabil, megbízható és jó megismételhetőséggel rendelkezik, és fontos referenciát biztosít a Polygonatum sibiricum standard főzet, a gyógyászati anyagok, a főzetdarabok és a kapcsolódó készítmények minőségének értékeléséhez.