HPLC-ujjlenyomat létrehozása, kémiai mintafelismerő elemzés és az aloe vera beltartalmának meghatározása
Az Aloe vera a liliomfélék családjába és az Aloe nemzetségbe tartozó fontos ehető gyógynövény. Évelő, örökzöld, húsos, lágyszárú, hideg természetű, keserű ízű növény. Az ősi receptek feljegyezték, hogy a máj hőjének tisztítására, a bélmozgás elősegítésére, a csomók eloszlatására és a gyűrűsféreg kezelésére alkalmas. Az aloe verának több mint 500 fajtája létezik, amelyek közül az Aloe vera (L.) Burm. f. a leggyakrabban használt gyógynövényfajta, és termékeit széles körben használják különböző területeken, például az élelmiszeriparban (beleértve az egészséges élelmiszereket), a gyógyászatban, a kozmetikumokban stb. Az elmúlt években az aloe vera hazai és nemzetközi kutatása elsősorban a fajták összehasonlító elemzésére, az elválasztásra és tisztításra, a tömegspektrometriás elemzésre, a beltartalom meghatározására és a farmakológiai hatásokra összpontosított. A kutatások kimutatták, hogy az aloe vera fő hatóanyagai az antron, antrakinon és kromon vegyületek. Ezen kívül vannak olyan kémiai összetevők, mint a poliszacharidok, glikozidok, aminosavak és szerves savak, amelyek antibakteriális, gyulladáscsökkentő, daganatellenes, vírusellenes és antiallergiás hatással rendelkeznek.

Jelenleg az ujjlenyomat és a kémiai mintafelismerés kombinációja hatékony módszer a hagyományos kínai gyógyászati anyagok minőségének értékelésére. Az ujjlenyomat-spektrumok elsősorban a gyógyászati anyagok integritására összpontosítanak, közös mintákat állapítanak meg, közös csúcsokat azonosítanak, és objektíven és átfogóan feltárják a gyógyászati anyagokban lévő hatóanyagok lehetséges típusait és mennyiségeit; a kémiai mintafelismerési technológia a gyógynövények közötti különbségeket hangsúlyozza, és az ujjlenyomat-adatok integrálásával és korrekciójával tovább szűkíti a gyógynövényekben lévő hatóanyagok körét; a kettő kombinációja megvalósíthatja a gyógyászati anyagok általános leírását és egyedi elemzését, ami pontosabban és objektívebben tükrözi a hagyományos kínai gyógyászat minőségi különbségeit. Az aloe vera gyógyászati anyagok fő gyógyászati összetevői olyan vegyületek, mint az aloin és az aloe emodin, de a hatékony összetevők és azok tartalma olyan tényezők függvényében változik, mint a származási hely, a növekedési környezet, a talaj és a szüreti időszak, ami bizonyos nehézségeket okoz az aloe vera gyógyászati anyagok minőségének és biztonságosságának értékelésében. Ezenkívül a Kínai Gyógyszerkönyvben (2020-as kiadás) az aloe vera gyógyászati anyagokra vonatkozó tartalmi meghatározási tételek az aloin tartalmán alapulnak, és az indikátor komponensek egyediek, ami megnehezíti a gyógyászati anyagok minőségének ellenőrzését. Ezért a kapcsolódó készítmények előállítása és fejlesztése előtt elengedhetetlen az aloe vera gyógyászati anyagok ujjlenyomat- és kombinált kémiai mintafelismerési kutatásának elvégzése.

Ebben a tanulmányban nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát (HPLC) alkalmaztak 12 különböző eredetű aloe vera gyógyászati anyagtétel ujjlenyomat-spektrumának meghatározására, és kombinálták a hasonlóságelemzést, a klaszterelemzést, a főkomponens-elemzést (PCA) és az ortogonális részleges legkisebb négyzetek diszkrimináns analízisét (OPLS-DA) a kémiai összetételük jellemzőinek tanulmányozására. Átvizsgáltuk azokat a markereket, amelyek befolyásolhatják a gyógyászati anyagok minőségi különbségeit, és ugyanezzel a módszerrel határoztuk meg hat marker (aloin D, aloin A, aloin B, 7-O-metil aloin A, aloin és aloe emodin) tartalmát a 12 tétel aloe vera gyógyászati anyagban. A cél az előállítási forrásból származó gyógyászati anyagok minőségének biztosítása, valamint tudományos alapot nyújtani az aloe vera gyógyászati anyagok minőségellenőrzéséhez és szabványjavításához. A reprezentatív eredmények a következők.

Ez a vizsgálat összehasonlította a forró reflux módszer és az ultrahangos módszer hatását a jellegzetes kromatográfiás csúcsok extrakciós sebességére. Az eredmények azt mutatták, hogy az ultrahangos kezelés magas extrakciós hatékonysággal, rövid idővel, alacsony veszteséggel és egyszerű működéssel rendelkezik. Ugyanakkor megvizsgálták az extrakciós oldószerek (metanol, etanol) és koncentráció, az extrakciós idő és a folyadék-anyag arány hat indikátor komponens extrakciós sebességére gyakorolt hatását az aloe vera gyógyászati anyagokban. Az eredmények azt mutatták, hogy a 20 percig tartó ultrahangos extrakció 75 ml 50% metanolos vizes oldattal volt a legjobb. Vizsgáltunk olyan mobilfázis rendszereket, mint az acetonitril hangyasav vizes oldat, acetonitril foszforsav vizes oldat és metanol foszforsav víz. Az eredmények azt mutatták, hogy amikor a gradiens elúciót metanol-acetonitril 0,3% foszforsav vizes oldattal végeztük mobilfázisként, az egyes indikátorkomponensek csúcsformái szimmetrikusak voltak, az elválasztási fok jó volt, a futási idő rövid volt, és a hatás a legjobb volt. A különböző kromatográfiás csúcsok csúcsformáit és felbontását különböző detektálási hullámhosszon (254, 280, 310, 330, 360 nm) összehasonlítottuk. Az eredmények azt mutatták, hogy a hat indikátorkomponens abszorpciós intenzitása 254 nm-en magas volt, az alapvonal stabil volt, és a felbontás jó volt. Ezért a 254 nm-t választottuk detektálási hullámhossznak.
Az aloe vera gyógyászati anyagok 12 tételének ujjlenyomat-spektrumában összesen 23 közös csúcsot azonosítottak. A hasonlósági eredményekből látható, hogy a Guangxi termelési terület 0,5-nél kisebb hasonlóságát leszámítva az összes többi 0,93-nál nagyobb, ami azt jelzi, hogy a piacon értékesített aloe vera gyógyászati anyagok kémiai összetételének típusai és tartalma a különböző termelési területek miatt nagymértékben eltérnek. A klaszterelemzés eredményei szerint az aloe vera gyógyászati anyagok 12 tétele 3 kategóriába sorolható, ami összhangban van a főkomponens-elemzés eredményeivel. Az aloe vera gyógyászati anyagok minőségi különbségeit befolyásoló öt kromatográfiás csúcsot ortogonális részleges legkisebb négyzetek diszkriminancia-analízisével szűrni kezdtük, és tartalmukat ugyanezzel a HPLC-módszerrel határoztuk meg. Mivel az aloe emodin az aloe vera gyógyászati anyagok egyik fő bioaktív vegyülete is, a tartalom meghatározásánál indikátorkomponensként is szerepelt. Az elemzési eredmények azt mutatják, hogy a hat indikátorkomponens tartalma között jelentős különbségek vannak. Ez a különbség különböző tényezőknek tudható be, mint például a földrajzi környezet, az éghajlati viszonyok, a betakarítási időszak, a talaj- és szántóföldi gazdálkodás, az ültetési mód stb., amelyek befolyásolják a másodlagos anyagcseretermékek felhalmozódását a gyógyászati anyagokban, ami a gyógyászati anyagok hasonlóságában és tartalmában különbségekhez vezet; Másodszor, az aloe vera gyógyászati anyagok koncentrált anyagok formájában jelennek meg, és a koncentrációs módszer, a szárítási folyamat és a mintavétel helye szintén jelentős különbségeket okozhat a gyógyászati anyagok kémiai összetételében.

Ebben a tanulmányban a különböző eredetű aloe vera gyógyászati anyagok összetételének különbségeit elemezték kvantitatív ujjlenyomat-spektroszkópia és kémiai mintázat többváltozós megkülönböztető módszer segítségével, és meghatározták hat indikátor komponens tartalmát. Ez intuitív módon értékelheti a különböző eredetű aloe vera gyógyászati anyagok minőségének konzisztenciáját, és tükrözheti a kémiai összetételbeli különbségeket is, tudományos hivatkozási alapot nyújtva az aloe vera gyógyászati anyagok minőségellenőrzéséhez és a kapcsolódó termékek fejlesztéséhez a jövőben.