A hagyományos kínai gyógyászat a vér pangásának eltávolítására és a kollaterálisok aktiválására javítja a vese gyulladását a cukorbetegségben szenvedő nefropátia patkányokban a makrofág beszivárgás és aktiválás gátlásával a TAK1 / JNK útvonalon keresztül
A diabéteszes nefropátia (DN) a cukorbetegség gyakori és súlyos szövődménye, és világszerte a végstádiumú vesebetegség elsődleges oka. Jelenleg a DN kezelése elsősorban a nátriumbevitel korlátozását, a vércukorszint szabályozását, a vérnyomás csökkentését és a renin-angiotenzin rendszer (RAS) blokkolását foglalja magában. Bár ez bizonyos mértékig késleltetheti a DN progresszióját, hatékonysága nem ideális. Egyre több bizonyíték utal arra, hogy a gyulladásos válasz fontos szerepet játszik a diabéteszes nefropátia kialakulásában és fejlődésében, és a makrofágok infiltrációja és aktivációja központi láncszem a vese gyulladásában. A TAK1/JNK jelátviteli útvonal fontos útvonal, amely szabályozza a makrofágok beszivárgását és aktiválódását. Ezért a TAK1/JNK jelátviteli útvonal blokkolása hatékony stratégia a DN megelőzésére és kezelésére.

Kutatócsoportunk úgy véli, hogy a "vér pangása akadályozza a kollaterálisokat" a diabéteszes nefropátia alapvető patogenezise, és a hagyományos kínai orvoslás hozzáadása a vér pangásának eltávolítására és a kollaterálisok elősegítésére a szindróma megkülönböztetése és kezelése alapján a diabéteszes nefropátia kezelésének alapelvévé vált. A vér pangásának megszüntetésére és a vérkeringés elősegítésére szolgáló hagyományos kínai orvoslás számos gyógyszert tartalmaz. Több mint 20 év klinikai gyakorlat és ismételt szűrés után kutatócsoportunk végül öt kínai gyógyszert, nevezetesen a Chuanxiong, Danshen, Dilong, Pióca és Skorpiót határozta meg, mint a DN kezelésének viszonylag rögzített alapgyógyszereit. Korábbi kutatásaink megerősítették, hogy a vér pangásának megszüntetésére és a vérkeringés elősegítésére szolgáló hagyományos kínai gyógyszerek gátolják a vese RAS aktiválódását DN patkányokban, csökkentik a podocita pórus membrán fehérje és citoszkeletális fehérje veszteségét, és késleltetik a DN progresszióját. Jelenleg azonban nincs kutatás ennek a gyógyszernek a gyulladásos válaszára vonatkozóan DN állapotban. Ennek fényében ez a tanulmány az SD patkányokat veszi kutatási tárgynak, hogy megfigyelje a hagyományos kínai orvoslás hatásait a vér pangásának eltávolítására és a kollaterálisok elősegítésére a makrofágok beszivárgására, aktiválására és a TAK1 / JNK jelátviteli útvonalra a DN patkányok veseszövetében, tovább tisztázva a hagyományos kínai orvoslás célpontjait a vér pangásának eltávolítására és a kollaterálisok elősegítésére, és kísérleti alapot nyújtva a klinikai alkalmazáshoz.

40 SD patkányból 10 patkányt véletlenszerűen kiválasztottak normál csoportnak (C csoport), a többi 30 patkányt pedig egyszeri intraperitoneális sztreptozotocin (STZ, 40 mg/kg) injekcióval etették, magas cukor- és zsírtartalmú étrenddel kombinálva, hogy cukorbetegség-modelleket hozzanak létre. A sikeresen modellezett patkányokat véletlenszerűen egy modellcsoportra (M csoport) és egy kínai gyógynövényes gyógyszercsoportra (Z csoport) osztottuk. A Z csoport hagyományos kínai gyógyászati beavatkozást kapott. 16 hét elteltével 24 órás vizeletfehérje-kvantitást (24 órás UTP) végeztek minden patkánycsoportban; ELISA-módszerrel kimutatták a monocita kemoattraktáns protein-1 (MCP-1), az interleukin-1 β (IL-1 β) és a tumor nekrózis faktor - α (TNF - α) expresszióját a szérumban; Vese szövetet gyűjtöttünk, és immunfluoreszcenciával kimutattuk a makrofág marker fehérje CD68 és a klasszikus aktivált makrofág marker fehérje, az indukálható nitrogén-oxid szintáz (iNOS) expresszióját. Western blotot használtunk a TAK1/JNK jelátviteli útvonalhoz kapcsolódó fehérjék, köztük a transzformáló növekedési faktor aktivált kináz-1 (TAK1), p-TAK1, c-Jun N-terminális kináz (JNK) és p-JNK expressziójának kimutatására.

Az elmúlt években a hagyományos kínai orvoslás mélyebben megértette a diabéteszes nefropátiát, a legtöbb orvos a vér pangásán alapulva érvel. A szomjúságtól szenvedve a Qi hiánya és a vér szállításának képtelensége késleltetett véráramláshoz vezet, ami idővel fokozatosan vérstasishoz vezet; a Yin hiánya és a túlzott tűz a testnedvek szenvedését okozhatja, ami elégtelen testnedveket és rossz vérkeringést eredményez. Ez idővel vér pangáshoz vezethet. A "Vérszindróma elmélet: Blood Stasis" (Vérstázis) kimondja: "Amikor a vér pangása a meridiánok és a szervek között jelentkezik, ez képezi a betegség gyökerét". Az "Orvosi iskola alapvető olvasmányai" kimondja: "A vér pangásának felhalmozódása igazságos, az idő múlásával, éjjel-nappal felhalmozódik". Ha a vér pangása fennáll és nem gyógyul, azt meridián- és járulékos betegségek okozzák. A DN lefolyása hosszadalmas, így a lefolyása megfelel a hagyományos kínai orvoslásban szereplő változásoknak, mint például az aggregáció és a kialakulás, az idővel való felhalmozódás, valamint a sztázis és a kollaterálisok elzáródása. A "kollaterálisokat elzáró vérstázis" elve a kezdetektől a végéig áthatja a DN-t, és ez az alapvető patogenezise. A vérkeringés elősegítésének, a vér pangásának megszüntetésének és a kollaterálisok elzáródásának feloldásának módszere a DN alapvető kezelési elve lett. Ezt a vér pangását azonban nehéz feloldani a felhalmozódása miatt, ami a hagyományos véraktiváló és pangást megszüntető gyógyszerek hatókörén kívül esik. Ezért a kutatócsoportunk a hagyományos véraktiváló és sztázis eltávolító gyógyszerek, mint a Danshen és a Chuanxiong használata alapján piócákat, földigilisztákat, skorpiókat és más speciális gyógyszereket adott hozzá a meridiánok kotrására és a paraziták eltávolítására. A Danshen a vérkeringés elősegítésére és a vér pangásának megszüntetésére szolgáló alapvető gyógyszer, amelynek fő hatóanyagai a szalvianolsavak és a tansinonok. A modern farmakológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a Danshen képes szabályozni a glükóz- és lipidanyagcserét DN-betegekben és kísérleti állatokban, gátolja az oxidatív stresszt, a gyulladást és a fibrózist, valamint védi a vesefunkciót. A Chuanxiong a vérkeringést és a qi-keringést elősegítő hatású. Fő hatóanyagai a ligusztrazin és a ferulasav. A modern farmakológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a Chuanxiong különböző biológiai tevékenységekkel rendelkezik, például gátolja a vérlemezkék aggregációját és a trombózist, csökkenti a vér viszkozitását, csökkenti a mezangiumsejtek proliferációját és gátolja az endotélsejtek proliferációját. A piócák hatékonysága a vér megtörése, a vér pangásának megszüntetése és a menstruáció elősegítése. A piócák fő hatóanyaga a hirudin, amely antikoaguláns, antitrombotikus, lipidcsökkentő, gyulladáscsökkentő hatású, gátolja az epiteliális-mesenchimális átmenetet, csökkenti a vese tubuláris epitélsejtek apoptózisát és enyhíti a vesefibrózist. A földigilisztáknak a vérkeringést és a diurézist elősegítő hatásai vannak a vesebetegségek kezelésében. A Lumbricus földigiliszta kinázt tartalmaz, amelynek hatásai javítják a fibrinolitikus rendszer egyensúlyhiányát, gátolják a vérlemezke-aktivációt, szabályozzák a lipidanyagcsere-zavarokat, és gátolják a glomeruláris mezangiumsejtek proliferációját és az extracelluláris mátrix túlzott felhalmozódását. A skorpió hatására eloszlatja a szelet, felszabadítja a meridiánokat és feloldja a csomókat. A modern farmakológiai vizsgálatok kimutatták, hogy a skorpió antikoagulál, antitrombotikus, elősegíti a fibrinolízist, növeli a vese véráramlását és csökkenti a proteinuriát. Ezen öt gyógynövény kombinációja képes feloldani a meridiánok elzáródását és megszüntetni a vér pangását.

A legújabb vizsgálatok kimutatták, hogy a makrofágok beszivárgása a DN gyulladásos válasz egyik jellegzetes megnyilvánulása. Makrofág infiltrációt találtak mind a DN betegeknél, mind a DN állatmodellekben, és az infiltráció mértéke pozitívan korrelált a DN proteinuriával és a vesefunkció zavarával. A kutatások kimutatták, hogy a vesebetegség kialakulásának irányát meghatározó fő tényező nem a makrofág infiltráció mennyisége, hanem a makrofágok aktivációs állapota a helyi szövetekben. A vesekárosodást követően a vérben lévő monociták a veseszövetbe vándorolnak és makrofágokká differenciálódnak. A makrofágok egy adott mikrokörnyezetben két különböző aktivációs fenotípusra tesznek szert, nevezetesen klasszikusan aktivált makrofágokra (M1) és nem klasszikusan aktivált makrofágokra (M2). Az M1 makrofágok közvetítik a vesegyulladást és a fibrózist az iNOS, kemokinek (MCP-1, IL-8) és pro-inflammatorikus faktorok (TNF - α, IL-1 β) szekréciójával; az M2 gyulladásgátló faktorokat termel, mint például az IL-1 és IL-10, amelyek gyulladásgátló és szövetjavító funkcióval rendelkeznek. Az INOS az M1 makrofágok aktiválódásának markere. A vesekárosodás korai szakaszában elsősorban az M1 makrofágok infiltrálódnak, és olyan gyulladásos faktorokat szabadítanak fel, mint az MCP-1, IL-1 β, TNF - α, ROS stb., ami kiváltja és fokozza a gyulladásos választ. Ebben a vizsgálatban a normál csoporttal összehasonlítva a patkányok modellcsoportja a CD68 pozitív makrofágok aggregációjának növekedését mutatta a veseszövetben, az M1 makrofág aktivációs marker iNOS expressziójának növekedését, és a gyulladásos faktorok, mint az MCP-1, IL-1 β, TNF - α szintjének növekedését. A vér pangásának megszüntetésére és a vérkeringés elősegítésére szolgáló kínai növényi gyógyszer gátolhatja a vese makrofágok beszivárgását, aktiválódását és gyulladásos faktorainak felszabadulását DN patkányokban, ezáltal csökkentve a vesegyulladást.

A makrofágok beszivárgása és aktivációja a DN veseszövetben szorosan összefügg a TAK1/JNK jelátviteli útvonallal. A JNK a mitogén aktivált fehérje kináz családba (MAPK) tartozik. Minden MAPK-család három kinázból áll, amelyek egymás után hatnak: MAPKK-kináz (MAPKKK), MAPK-kináz (MAPKK) és MAPK. Az aktivált MAPKKK képes foszforilálni a MAPKK-t és aktiválni azt. Az aktivált MAPKK foszforilálja a MAPK-t és aktiválja azt. Az aktivált MAPK transzlokálódhat a sejtmagba, hogy szabályozza a célgének transzkripcióját. Az elmúlt években állat- és sejtkísérletek megerősítették, hogy a JNK útvonal elősegíti a vese gyulladásos válaszát. A TAK1 a MAPKKK családba tartozó szerin/treonin kináz, amely a JNK előtt helyezkedik el, és fontos jelátviteli molekula a JNK jelátvitelben. A TAK1/JNK jelátviteli útvonal aktiválódása megfigyelhető olyan vesebetegségekben, mint a DN, az IgA nefropátia és a veseátültetéses iszkémia/reperfúzió, és szorosan összefügg a gyulladásos válasz progressziójával. UUO egerekben a TAK1/JNK jelátviteli útvonal gátlása csökkentheti a makrofág infiltrációt, gátolhatja az M1 makrofágok aktiválódását és csökkentheti a gyulladásos faktorok szintjét. Ebben a vizsgálatban a normál csoporthoz képest a TAK1/JNK jelátviteli útvonal jelentősen aktiválódott a DN patkányokban. A vér pangásának megszüntetésére és a vérkeringés elősegítésére szolgáló kínai növényi gyógyszer jelentősen csökkentheti a TAK1/JNK jelátviteli útvonalhoz kapcsolódó fehérjék expresszióját és gátolhatja a TAK1/JNK jelátviteli útvonal aktiválódását.

Összefoglalva, kutatási eredményeink azt mutatják, hogy a hagyományos kínai orvoslás a vér pangásának megszüntetésére és a vérkeringés elősegítésére javíthatja a proteinuriát és enyhítheti a vese gyulladását DN patkányoknál. A hatásmechanizmus a TAK1/JNK jelátviteli útvonal által közvetített makrofág infiltráció, aktiváció és gyulladásos faktorok felszabadulásának gátlásával függhet össze.