A szárított mandarinhéj öregedési mechanizmusának feltárása kiterjedt célzott metabolizmus-technológia és nagy áteresztőképességű szekvenálási technológia alapján
A csenpi a Rutaceae családba tartozó Citrus reticulata Blanco és termesztett fajtáinak szárított és érett gyümölcshéja. Hatásai a qi szabályozására és a lép erősítésére, a nedvesség kiszárítására és a váladék feloldására irányulnak, és az idős hagyományos kínai orvoslás tipikus képviselője. A Chenpi név először a "Dietary Therapy Materia Medica" című könyvben jelent meg, és a szakirodalom feljegyzi, hogy az öregedési idő változó. A "Lei Gong Pao Zhi Lun" megállapítja: "A Lei Gong Pao Zhi Lun: A "Daily Materia Medica" feljegyzi, hogy "az érlelt mandarinhéj még jobb". A "A Lei Gong ágyúégetés gyógyászati tulajdonságainak magyarázata" című könyv megállapítja: A "Yitang Sanshi" feljegyzései: "A Chenpi-t minden második évben kell érlelni; A "Yitang Sanshi" feljegyzései: "Az új narancshéjnak erős aurája van, és kiterjedt termelést igényel. Két-három év kell ahhoz, hogy kiválónak lehessen tekinteni.
A hagyományos kínai gyógyászat öregítése a kínai gyógyszer új gyógyszerből megfelelő tárolási módszerek után öregedett gyógyszerré történő átalakulását jelenti, ami a hagyományos kínai gyógyászat klinikai igényeinek jobb kielégítése érdekében a teljesítményében és hatékonyságában bekövetkező változásokat eredményez. A történelem során a hagyományos kínai orvoslás öregítéséről mindig is folytak viták. A "Shennong Bencao Jing" feljegyzi, hogy "vannak igaz és hamis gyógyszerek, valamint új és régi gyógyszerek, és mindegyiknek megvan a maga módszere", ami arra utal, hogy az "új" és a "régi" gyógyszerek mindegyike saját jellemzőkkel és hatásszabályokkal rendelkezik. Ez a Jing feljegyzi a narancshéjat, de nem említi, hogy az öregedett-e. A "Annotations on the Classic of Materia Medica of Shennong" először hat fő öregített gyógyszert javasolt: "Minden farkasbogyó, citrusféle, narancshéj, pinellia ternata, efedra és wuzhuyu, amely hosszú távú érlelést igényel, jó. A későbbi generációkban az orvosszakértők tovább bővítették a hagyományos kínai orvoslás körét. A Compendium of Materia Medica szerint: "A rebarbara, a fatolvajok, a macskamenta, a koriandervirág, a sáskavirág stb. szintén alkalmasak a hosszú távú öregedésre, nem csak a hatféle; A Qing-dinasztia idejéig a "Bencao Congxin" című könyv megállapította: "A legjobb az öregített gyógynövényeket használni, akár az erejük csökkentésére, akár a tűzenergiájuk eltávolítására". Közel 40 ízesítésű érlelt gyógynövényt tartalmaz. Napjainkban a hagyományos kínai orvoslás is hangsúlyozza, hogy bizonyos kínai gyógyszereket az optimális felhasználás érdekében érlelni kell. Látható, hogy a hagyományos kínai orvoslás öregítése a klinikai gyakorlat összefoglalóján alapul. A szakirodalmi feljegyzésekben azonban nincs mélyreható magyarázat az öregedési mechanizmusról.

Számos kutatási jelentés született a hagyományos kínai gyógyászat öregedési mechanizmusáról, mint például a Wu Zhu Yu, Qi Ai Ye, Ma Huang, Chen Pi stb., amelyek elsősorban a kémiai összetétel és a farmakológiai hatások összehasonlítására összpontosítanak a különböző öregedési időkben. A minőségi kutatás nem mélyreható, és a következtetések nem következetesek. A kutatócsoport az öregedéssel és a minőséggel kapcsolatos mikroorganizmusok ötletét használta referenciaként a füstölt dohányban, a teában és a Baijiuban. A korábbi kutatás megállapította, hogy a mandarinhéjhoz kötődő mikroorganizmusok növekedése és anyagcseréje az öregedés során szorosan összefügg a flavonoidok és más hatóanyagok változásával. Úgy vélték, hogy a mandarinhéjhoz kapcsolódó domináns mikroorganizmus, az Aspergillus niger anyagcseréje elősegíti a flavonoidok mennyiségének növekedését. Liu tanulmányozta a mikrobiális anyagcsere és a hatóanyagok átalakulásának mechanizmusát az öregített mandarinhéjban, és az eredmények azt mutatták, hogy a mikroorganizmusok részt vesznek a mandarinhéj öregedési folyamatában, és képesek átalakítani a mandarinhéjban lévő vegyületeket, hogy növeljék a hatóanyagok tartalmát. Továbbá, az öregített mandarinhéj felületén található baktériumok és gombák sokfélesége változik a különböző öregedési idők függvényében. Úgy vélik, hogy a mikroorganizmusok a mandarinhéj öregedési folyamata során változásokat okozhatnak a farmakológiai anyagbázisban. Számos tanulmány megerősítette a mikroorganizmusok és a kémiai összetevők közötti összefüggést a mandarinhéj öregedési folyamata során, de nincs jelentés a mandarinhéjban a csatolt mikroorganizmusok és a másodlagos metabolitok közötti kölcsönhatás átfogó elemzéséről a metabolizmus és a nagy áteresztőképességű szekvenálás alapján. Ez a cikk az első, amely az UPLC-ESI-MS/MS széleskörűen célzott metabolizmus-technológiát alkalmazza az öregedett mandarinhéj másodlagos metabolitjainak elemzésére 1 év és 3 év tárolás után, átfogóan feltárva a másodlagos metabolitokat, a közös metabolitokat és a differenciált metabolitokat az összehasonlító csoportmintákban; A nagy áteresztőképességű szekvenálási technológia alapján átfogóan feltárta a mintában lévő összehasonlító csoportban a csatolt mikroorganizmusok közösségi szerkezetét és változásait, és szűrte a differenciális mikroorganizmusokat; korrelációs elemzést végzett a metabolizmus által kimutatott differenciális metabolitok és a nagy áteresztőképességű szekvenálással azonosított differenciális mikroorganizmusok összehasonlítása között. A kutatási eredmények elméleti alapot nyújtanak a mandarinhéj öregedési mechanizmusának mélyreható vizsgálatához.

Mintavétel. Az ebben a kísérletben használt kísérleti minták azonos eredetű, azonos tételből és különböző tárolási évekből származó, szabványosan tárolt mandarinhéjak. A szabványos tárolás a származási helyen történő helyszíni tárolás, rendszeres szezonális kezeléssel és a hőmérséklet- és páratartalom-változások nyilvántartásával. Ez egy jó módszer a minták nyomon követhetőségére és gyűjtésére, amellyel elkerülhető a pontatlan környezet és az évjárat hatása.

A másodlagos anyagcseretermékek elemzése. A metabolomikai technológia átfogóan és tudományosan elemezheti a hagyományos kínai gyógyászat teljes kémiai összetételét, és széles körben használják a kínai gyógyászati fajták, például a ginzeng, a Scutellaria baicalensis, az Angelica dahurica, a Paeonia lactiflora és a Paeonia lactiflora minőségének értékelésében. Ez a cikk kiterjedt célzott metabolomikai technikákat alkalmaz, hogy átfogóan kimutassa a másodlagos metabolitokat az öregített mandarinhéjban 1 év és 3 év tárolás után. A PCA-elemzés, az OPLS-DA-elemzés és a hőtérkép-elemzés egyértelműen meg tudja különböztetni a különböző évekből származó mintákat. A vegyületek retenciós idejének és jellemző ionjainak (Q1 és Q3) integrálásával összesen 386 másodlagos metabolitot sikerült kinyerni az adatbázisból, köztük 79 fenolsavat, 143 flavonoidot, 4 antrakinont, 17 lignánt és kumarint, 3 tannint, 47 alkaloidot, 6 terpént és 87 egyéb osztályt. A hagyományos nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás (HPLC) és folyadékkromatográfia-tömegspektrometriás (LC-MS) technikákkal összehasonlítva előnye, hogy nagyszámú vegyületet azonosít, és képes tükrözni a szárított mandarinhéjban lévő másodlagos metabolitok teljes spektrumát. Az egyes vegyületek relatív tartalmának pontossága érdekében ez a kísérlet különböző mintákból származó metabolit tömegspektrometriás elemzési adatokat kapott, integrálta az összes anyag tömegspektrometriás csúcsának csúcsterületét, és integrálta és korrigálta az azonos metabolit különböző mintákban lévő tömegspektrometriás csúcsait. Ez a kísérlet a klinikai és farmakológiai kísérletek tervezési módszereire utal. A szárított mandarinhéj egyéves tárolását használták kontrollcsoportként, és a szárított mandarinhéj minták hároméves tárolását használták kísérleti csoportként. A ≥ 2 vagy ≤ 0,5 és VIP ≥ 1 hajtásváltozással rendelkező differenciális metabolitokat választottuk ki. Ha a csoportok közötti metabolitok közötti különbség több mint 2-szeres vagy kevesebb mint 0,5-szeres és VIP ≥ 1, a különbség szignifikánsnak tekinthető. Ennek eredményeképpen összesen 79 differenciális metabolitot vizsgáltunk, amelyek közül a felfelé szabályozott különbségekkel és magas relatív tartalmi rangsorral rendelkező vegyületek a szárított mandarinhéj minőséggel kapcsolatos metabolitjainak tekinthetők. Az öregített mandarinhéj másodlagos anyagcseretermékeiben 1 év és 3 év érlelés után differenciálisan változó 20 vegyület közül a felfelé szabályozott vegyületek a következők: 3,5-dihidroxi-3-metilvalerinsav, 5,7-dihidroxi-1 (3H)-izobenzofurán-one, szinapin, p-hidroxibenzoil-borkősav, 3 ', 4', 7-trihidroxiflavon, katechin, limonin, dihidrobaibei alkaloid B, kvercetin-O-rutinozin-hexóz és C-hexozil-aureozin-O-szinapiril-hexóz. Közülük a katechin, a limonin, a 3 ', 4', 7-trihidroxiflavon antibakteriális, gyulladáscsökkentő, antioxidáns, rákellenes és egyéb hatásokkal rendelkezik, amelyek mindegyike potenciális minőségértékelőként használható. Ikonikus vegyületek. A betegségek hagyományos kínai orvoslással történő kezelése több komponens, célpont és útvonal jellemzőivel rendelkezik. A hagyományos kínai orvoslás minőségértékelésének és minőségellenőrzésének kulcsa, hogy a számos összetevő közül hogyan szűrjük ki a betegségek kezelésére szolgáló célkomponenseket. Ezek közül széles körben használják az olyan módszereket, mint a kismolekulás vegyületek adatainak előrejelzése, a szérum gyógyszerkémia és a növényi metabolizmus. E kísérlet eredményei azt mutatják, hogy az ésszerű csoportosítás előfeltétele mellett az UPLC-ESI-MS/MS széleskörű célzott metabolizmus-technológia alkalmazása hatékonyan szűrheti a szárított mandarinhéj minőségével kapcsolatos metabolitokat. A szűrt vegyületek aktivitását azonban még tovább kell ellenőrizni a szárított mandarinhéj hagyományos funkcióival való kombinálással.
A mandarinhéj öregedési mechanizmusa. Hagyományosan úgy tartják, hogy az öregített mandarinhéj jó. Széles körben jelentették azonban, hogy a mandarinhéj öregedési folyamata során a mikroorganizmusok metabolikus átalakulása befolyásolja a héj kémiai összetevőit, ezáltal elősegítve a hatóanyagok felhalmozódását és a jó öregített mandarinhéj céljának elérését. Ez az eredmény összhangban van a mandarinhéj összes flavonoid-tartalmának az öregített mandarinhéjban tapasztalt növekedésével. Ez a cikk korrelációs elemzést végez a metabolizmus által kimutatott eltérő metabolitok és a nagy áteresztőképességű szekvenálással azonosított eltérő mikroorganizmusok között. Az eredmények azt is megerősítik, hogy a domináns baktérium nemzetségek, mint az Aspergillus, a Penicillium és a Penicillium jelentősen befolyásolhatják a szárított mandarinhéj hatóanyagait, ami összhangban van az irodalmi jelentésekkel. A kutatócsoport előzetes kutatásai azt találták, hogy a szárított mandarinhéj öregedési folyamata során a felülethez kötődő domináns mikrobák csoportjai folyamatosan fejlődnek. Az öregedési idő növekedésével a domináns mikroorganizmusok a Zasmidiumról, Cladosporiumról, Symmetrospora-ról és Fusariumról Cladosporiumra, Aureobasidiumra, Aspergillusra és Xeromycesre változnak. A Xeromyces bisporus, az 1 évig és 3 évig tárolt minták közötti különbséget jelentő mikroorganizmus, a száraz penészgombával szemben toleránsabb faj. Azok a mikroorganizmusok, amelyek alacsony vízaktivitású körülmények között is képesek túlélni, alkalmazkodni tudnak a rendkívül alacsony vízaktivitású (0,61) életkörülményekhez, ami megfelel az öregített mandarinhéj rendkívül száraz állapotának. Ugyanakkor a kísérleti eredmények azt mutatták, hogy a különböző mikroorganizmusok, mint például a Fusarium, az Aspergillus és a Fusarium, egyidejűleg befolyásolhatják a különböző hatóanyagok és aromakomponensek, például a hesperidin, a vanillinsav, a puerarin és a savas komponensek relatív tartalmát. Ezért az átfogó megítélés azt mutatja, hogy a szárított mandarinhéj mintáiban lévő különböző mikroorganizmusok elősegíthetik a hatóanyagok, például a heszperidin és más flavonoidok relatív növekedését, miközben az aromakomponensek relatív növekedését vagy csökkenését is megváltoztathatják a szárított mandarinhéj szagának szabályozása érdekében. Ezért a "jó az öregített mandarinhéj" tudományos konnotációja szorosan összefügghet a differenciális mikroorganizmusok másodlagos anyagcseretermékek relatív tartalmára gyakorolt hatásával.