A pórsáfránylevelek összes flavonoidjainak extrakciós és tisztítási folyamatának optimalizálása és akut májkárosító hatásuk vizsgálata
Az Asteraceae növény Carthamus tinctorius L. szárított virága értékes hagyományos kínai gyógynövény, és az egyik legszélesebb körben használt gyógynövény a mongol orvoslás klinikai gyakorlatában. Ez a gyógyszer hűvös természetű, enyhén keserű ízű, és tápláló hatással van a szív- és májmeridiánokra. Jó gyógyszer a vérkeringés elősegítésére, a vér pangásának megszüntetésére és a fájdalom enyhítésére. Hagyományosan a növényi sáfrányvirág felhasználása és kutatása csak a gyógyhatású virágaira összpontosított. A növényi sáfrányvirág virághozama azonban nagyon alacsony, ami azt eredményezi, hogy a gyógyászati részek - "virágok" - betakarítása után keletkező levelek nagy részét kidobják, ami erőforrás-pazarláshoz vezet. A tudósok tanulmányozták a pórsáfrány föld feletti részeinek kémiai összetételét, de a legtöbbjük az alkaloidákra és a terpénekre összpontosít. Viszonylag kevés kutatás foglalkozik azonban a flavonoidokkal, amelyek farmakológiai tevékenységet fejtik ki, például antioxidáns, vírusellenes, májvédő, rákellenes és gyulladáscsökkentő hatásúak. A növényi eredetű flavonoidok természetes és alacsony toxicitású tulajdonságokkal is rendelkeznek, és széleskörű kilátásokkal rendelkeznek a hatékony és biztonságos természetes gyógyszerek, bőrápolási termékek és egészségügyi termékek kifejlesztésében. Jelenleg nincs kutatás a pórsáfránylevelekből származó flavonoidok kivonási és tisztítási folyamatáról és biológiai aktivitásáról. Kapcsolódó vizsgálatok kimutatták, hogy a sáfrányvirág szárának alkoholos kivonata jelentős CCI4 indukált akut májkárosító hatású. Ezért érdemes megvizsgálni, hogy a pórsáfránylevél-kivonatnak van-e májvédő hatása is. Ezért a pórsáfrány nem gyógyászati erőforrásainak teljes körű felhasználása szempontjából ez a kísérlet optimalizálta az extrakciós és tisztítási folyamatot, hogy teljes flavonoidokat nyerjen a Carthamus leaves tinctorius L. levélből,TFCTLL)， És tovább vizsgálja a hepatoprotektív hatását, adatot nyújtva a pórsáfrány nem gyógyászati részeinek teljes körű felhasználásához és farmakológiai aktivitásának kutatásához.

 

Ebben a tanulmányban először használtak kísérleti anyagként sáfránymaghulladék sáfrányleveleket, és a sáfránylevelekből a teljes flavonoidokat fűtési reflux módszerrel extrahálták. Egytényezős kísérletek alapján Box Behnken válaszfelületi tesztet terveztünk a sáfránylevelekből származó összes flavonoidok optimális extrakciós eljárásának optimalizálására. A szilárd-folyadék arányt 1:27-ben, az etanolkoncentrációt 80%-ben, az extrakciós időt pedig 65 percben határozták meg. A tényleges extrakciós arány 4,921% volt, ami 0,014%-vel alacsonyabb volt az elméleti értéknél. Statisztikai elemzést végeztünk az egytényezős és a válaszfelületi eredményeken, és megállapítottuk, hogy a kettő között nincs szignifikáns különbség (P>0,05). Ez a modell jól és stabilan jósol, és használható a pórsáfránylevelekből történő összes flavonoidok kivonására. Az optimális extrakciós eljárással nyert, összes flavonoidot tartalmazó nyers kivonat alacsony extrakciós aránya miatt a pórsáfránylevelekből nyert nyers kivonat további dúsítására és tisztítására van szükség a későbbi aktivitási vizsgálatokhoz.

A makropórusos gyantát az elmúlt években széles körben használták a természetes termékek elválasztására és tisztítására, különösen a flavonoidok dúsítására. Egyszerű működése, szennyezésmentessége, alacsony energiafogyasztása és jó elválasztó hatása miatt széles körben használják a flavonoidok tisztítási kutatásában. A legtöbb flavonoid gyengén poláris, ezért a gyengén poláris és nem poláris gyanták jobb tisztítási hatással vannak a flavonoidokra. Hou és munkatársai az Artemisia annua összes flavonoidjának dúsítását és tisztítását vizsgálták makroporózus adszorpciós gyantával. Statikus adszorpciós kísérleteket végeztek az NKA-9, GPD100, HPD400, HPD600, AB-8, D101, X-5 és GM301 makroporózus adszorpciós gyanták adszorpciós és deszorpciós képességeinek vizsgálatára az összes flavonoidok esetében. Az eredmények azt mutatták, hogy az AB-8 makroporózus adszorpciós gyanta rendelkezett a legjobb adszorpciós és deszorpciós képességgel. A kapcsolódó szakirodalom négyféle makroporózus adszorpciós gyantáról, a HPD-100, HPD-600, D101 és HP-20 makroporózus adszorpciós gyantákról is beszámolt, amelyek jelentős előnyökkel rendelkeznek a flavonoidok adszorpciójában és felbontásában a többi gyantatípushoz képest. Ezért ebben a kísérletben a TFCTLL tisztításához ötféle, az összes flavonoidok dúsítására alkalmas makroporózus adszorpciós gyantát, az AB-8, HPD-100, HPD-600, D101 és HP-20 típusokat választottuk ki. Az optimális tisztítási eljárás elérése után az optimális eljárás szerint kivont sáfránylevelek kivonatát egy előkezelt AB-8 makroporózus gyanta kromatográfiás oszlopon adszorbeáltuk, és 95% etanollal eluáltuk. Az összes flavonoid tisztasága elérte a 61,42%-t, az eluátumot összegyűjtöttük és száraz extraktummá koncentráltuk. Alapot nyújt a későbbi aktivitáskutatáshoz.

Kapcsolódó vizsgálatok kimutatták, hogy a sáfrányvirág szárából származó alkoholos kivonatok jelentős CCI4 által kiváltott akut májkárosodás elleni hatással rendelkeznek. A sáfrányviráglevél-kivonatnak is van májvédő hatása? Ez a vizsgálat négy flavonoidot azonosított a TFCTLL-ben, köztük verbaszkozidot, kvercetin-7-O - β - D-glükozidot, verbaszkozidot és vitexint. A vonatkozó kutatási eredmények azt mutatták, hogy specifikus gyulladáscsökkentő, antioxidáns és fibrózisellenes hatással rendelkezik, amely csökkentheti a szérum ALT és AST aktivitását, gátolja a gyulladásos faktorok, például a TNF - α és az IL-1 β szintjét, gátolja az antioxidáns enzimek és az NF - κ B útvonal aktiválódását, és enyhíti a májkárosodást a lipidanyagcsere szabályozásával, antioxidáns, gyulladáscsökkentő, vaslerakódás csökkentésével, a tumorsejtek proliferációjának szabályozásával, anti apoptózissal, az autofágia elősegítésével és más útvonalakkal. Gyakran használják akut májkárosodás és kapcsolódó betegségek kezelésére.

Az akut májkárosodás a májfunkció hirtelen fellépő, különböző okok miatt rövid időn belül kialakuló kóros májműködési rendellenesség. Klinikai prognózisa rossz, és ha nem avatkoznak be aktívan és nem kezelik, cirrózis és májrák alakulhat ki, ami az emberi életet és egészséget veszélyezteti. Különböző tényezők okozhatnak májkárosodást, beleértve a kémiai májkárosodást, a bakteriális és vírus által kiváltott biológiai májkárosodást. A CCI4 a leggyakrabban használt hepatotoxin a kísérleti állatkísérletekben a kémiai májkárosodás kiváltására, és a CCI4 egyetlen adagja képes előkészíteni az ALI típusú májsejtkárosodást. A májsejtek szerkezetének és működésének károsodását okozhatja, ami az intracelluláris ALT és AST véráramba történő kiáramlásához vezet, ami a vér ALT és AST aktivitásának növekedését eredményezi, ami pozitívan korrelál a májkárosodás mértékével. Ezért az ALT- és AST-aktivitást gyakran használják a májkárosodás mértékének értékelésére. E tanulmány állatkísérleti eredményei azt mutatták, hogy a CCI4 intraperitoneális injekcióját követően a szérumban az ALT, AST és TBA aktivitása jelentősen megnőtt, és májszöveti elváltozások keletkeztek, ami a CCI4 által kiváltott akut májkárosodás egérmodell sikeres létrehozását jelzi. A TFCTLL-lel történő beavatkozás után az ALT, AST és TBA aktivitása az egérszérumban jelentősen csökkent, és a májszöveti elváltozások mértéke enyhült, ami azt jelzi, hogy a TFCTLL védőhatást fejt ki a CCI4 által kiváltott akut májkárosodásra egerekben.

Ez a tanulmány a pórsáfrány gyógyászati erőforrásainak szemszögéből indul ki, a hagyományos nem gyógyászati hulladékokat és melléktermékeket erőforrás-alapú gyógyszerekké alakítja át, teljes mértékben hasznosítja a pórsáfrány gyógyászati anyagokat, és feltárja a pórsáfránylevelek májvédő hatását. Az eredmények azt mutatják, hogy az extrakció és tisztítás után nyert TFCTLL hatással van az akut májkárosodott egerekre. Ez a tanulmány hivatkozási alapot nyújthat a TFCTLL későbbi fejlesztéséhez és felhasználásához, és nagy jelentőséggel bír a sáfrányvirágforrások nagy értékű hasznosítása szempontjából is.