A Sophora alopecuroides gyulladáscsökkentő hatásának és mechanizmusának vizsgálata a lipopoliszacharid által kiváltott gyulladásra RAW264.7 sejtekben
A gyulladás egy védekező válaszreakció, amely akkor lép fel, amikor a szervezetet káros belső és külső ingerek, például kórokozók támadják meg vagy fertőzik meg. Immunválaszt vált ki a szervezet védelme érdekében. Ha az immunrendszer túlzottan vagy folyamatosan aktiválódik, az egy sor gyulladással kapcsolatos betegséghez vezethet, mint például reumás ízületi gyulladás, gyulladásos bélbetegség, daganatok stb., ami végül tartós vagy átmeneti gyulladást eredményez. A makrofágok központi szerepet játszanak a gyulladásos válaszok elindításában, fenntartásában és enyhítésében, és tartós felhalmozódásuk és aktivációjuk krónikus gyulladásra utal. A lipopoliszacharid (LPS) képes aktiválni a makrofágokat és elősegíteni a gyulladásos mediátorok, például a tumor nekrózis faktor alfa (TNF - α), interleukin-1 β (IL-1 β), interleukin-6 (IL-6), nitrogén-oxid (NO) stb. kiválasztását. Ezeknek a gyulladásos mediátoroknak a túlzott felszabadulása szervi károsodáshoz és krónikus betegségekhez vezethet. Az NF - κ B fontos szerepet játszik az olyan folyamatok szabályozásában, mint a sejt apoptózis és a gyulladásos válasz, és fontos célpontja a gyulladáscsökkentő terápiának.

A Sophora alopecuroides L, más néven Sophora alopecuroides a hüvelyesek családjába, a Sophora nemzetségbe tartozó növény. Északnyugat-Kína és Közép-Ázsia különböző tartományaiban elterjedt, és hő- és méregtelenítő, fájdalom- és gyulladáscsökkentő, nedvességszárító és vérhasmegelőző funkcióval rendelkezik. Kína északnyugati régiójában fontos gyógynövény. A Sophora alopecuroides elsősorban alkaloidokat, flavonoidokat, szerves savakat, poliszacharidokat, illóolajokat, szteroidokat, fenolokat és egyéb összetevőket tartalmaz. Az alkaloidok gyulladáscsökkentő, rákellenes, antibakteriális és immunszabályozó hatásúak, a flavonoidok gyulladáscsökkentő, vírusellenes, antioxidáns hatásúak, a poliszacharidok pedig immunszabályozó és daganatellenes funkcióval rendelkeznek, amelyek hatékonyan javíthatják a szervezet immunitását, és fontos szerepet játszanak a daganatellenes és immunerősítésben. A fenti tanulmányok mind a Sophora alopecuroides egy bizonyos kémiai összetételű csoportján alapulnak, és a hagyományos kínai orvoslás a többkomponensű, többcélú és több útvonalú kombinált hatások jellemzőivel rendelkezik, amelyek alacsonyabb gyógyszeradagokkal ugyanazt vagy még jobb terápiás hatást érhetnek el, beleértve a hatékony részkompatibilitást és a hatékony összetevő kompatibilitást. Ezért meg kell vizsgálni, hogy a Sophora alopecuroides különböző kémiai összetételű csoportjai fokozhatják-e a hatékonyságot. Ez a cikk az LPS által indukált RAW 264.7 sejteket gyulladásos modellként a Sophora alopecuroides gyulladáscsökkentő gyógyszerek szűrésére, és feltárja a hagyományos vízbontó kivonatot (WDE), a vizes ultrahangos kivonatot (WUE), a 75% etanolos reflux kivonatot (ERE), 75% etanolos ultrahangos kivonatot (EUE), valamint a Sophora alopecuroides teljes alkaloid-kivonatát (TAE), teljes flavonoid-kivonatát (TFE), teljes poliszacharid-kivonatát (TPE) és a különböző hatékony részek kilenc kombinációját. A gyulladáscsökkentő hatás és hatásmechanizmus (1:1:1, 1:2:2, 1:3:3, 2:1:2, 2:2:3, 2:3:1, 3:1:3, 3:2:1, 3:3:2, 3:3:2).

A makrofágok részt vesznek a szervezet immunválaszában. LPS stimulálásakor a makrofágok jelátviteli utakat (pl. NF - κ B) indítanak el, amelyek elősegítik a pro-inflammatorikus mediátorok, pl. NO, TNF - α, IL-1 β, IL-6 stb. termelését. Az NO túlzott termelése szorosan összefügg a gyulladás kialakulásával. A TNF - α és az IL-6 szintjének növekedése elősegítheti a sejtek által történő több pro-inflammatorikus citokin kiválasztását. Az IL-6 egy fontos pro-inflammatorikus citokin, amely a B-sejtek és a T-sejtek aktiválódását indukálhatja, és részt vehet a szervezet immunválaszában. Az IL-1 β akut vagy krónikus gyulladásban felszabályozódik. A vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy a RAW 264.7 LPS-kezelést követően a NO, TNF - α, IL-6 és IL-1 β felszabadulása jelentősen megnőtt, ami egy in vitro gyulladásos modell sikeres létrehozását jelzi. A Sophora alopecuroides WDE, WUE, EUE, ERE és ezek TAE, TFE, TPE mind képesek gátolni a NO, TNF - α, IL-6 és IL-1 β termelődését az LPS által stimulált RAW 264.7 sejtekben, amelyek közül a TFE, EUE, ERE A TAE gátló hatása jelentősebb A TFE és TPE különböző arányú keverése után azt találtuk, hogy különböző mértékben képesek gátolni a TNF - α felszabadulását. Közülük az 1:1:1 és 1:1:2 kombinációk kivételével a többi hét kombináció jobb gátló hatással volt a TNF - α felszabadulására, mint önmagukban. A 2:1:2 kombinációnak volt a legjobb gátló hatása, ami jelentős szinergista hatást mutatott.

A Sophora alopecuroides gyulladáscsökkentő hatásának molekuláris mechanizmusának feltárása érdekében ez a tanulmány WB-t használt az IkB α, NF - κ B p65 és a p-IkB α, p-NF - κ B p65 kulcsfehérjék expressziójának kimutatására az NF - κ B jelátviteli útvonalban. Az NF - κ B a gyulladás kulcsfontosságú szabályozó faktor, amely számos kulcsfontosságú gyulladásos mediátor, például az IL-1 β, IL-6, TNF - α stb. transzkripcióját képes szabályozni. Az LPS a TLR4 receptorokhoz kötődve aktiválja az NF - κ B jelátviteli útvonalat, amely fontos láncszem a makrofágok gyulladásos mediátorok felszabadításának indukálásában. Amikor a sejteket stimulálják, az NF - κ B-hez kötődő IkBa gátló fehérje az IkB α kináz hatására gyorsan foszforilálódik p-IkB α-vá, ami aktív p-NF - κ B p65-öt szabadít fel a sejtmagba, ezáltal elősegítve a gyulladással kapcsolatos faktorok szintézisét és szekrécióját. Az utóbbi években számos jelentés született az alkaloidok, flavonoidok és poliszacharidok gyulladáscsökkentő hatásairól. A vizsgálatok például azt találták, hogy a Sophora flavescens alkaloidok képesek enyhíteni az LPS által kiváltott gyulladást a RAW 264.7 makrofágokban az IkB α foszforiláció és a p-NF - κ B p65 nukleáris transzlokáció gátlásával. Zhao és munkatársai megállapították, hogy a Sophora flavescens összes alkaloidja az NF - κ B aktiváció gátlásával enyhítheti a dextrán-szulfát által kiváltott vastagbélgyulladást. Vizsgálatok kimutatták, hogy a hagyományos kínai gyógyászatban található flavonoidok csökkenthetik az IkB α és p65 fehérjék foszforilációs szintjét az NF - κ B jelátviteli útvonalban, hogy gyulladáscsökkentő hatást fejtsenek ki. Li és munkatársai megállapították, hogy a Sophora flavescens teljes flavonoidjai a JAK2/STAT3 jelátviteli útvonal aktivációjának gátlásával immunmoduláló hatást fejthetnek ki a fekélyes vastagbélgyulladásra, a Cistanche poliszacharidok pedig gátolhatják a JAK2/STAT3 jelátviteli útvonal aktivációját. Az NF - κ B MAPK és a STAT3 aktivációját az LPS által kiváltott gyulladás gátlására használják RAW 264.7 makrofágokban, míg Qu és munkatársai tanulmánya kimutatta, hogy a Pinus koraiensisből származó poliszacharidok az Nrf2/HO-1 jelátviteli útvonal szabályozásával képesek gátolni az LPS által kiváltott gyulladást. Jelenleg viszonylag kevés kutatás foglalkozik az alkaloidok, flavonoidok és poliszacharidok kombinációjának gyulladásra gyakorolt hatásával. Ez a tanulmány azt találta, hogy a Sophora alopecuroidesben lévő TAE, TFE és TPE kombinációjának alkalmazásakor az NF - κ B p65 és IkB α fehérjék foszforilációja jelentősen csökkent, és a p-IkB α és a p-NF - κ B p65 fehérjék expressziója gátolt. Ez azt jelzi, hogy a Sophora alopecuroides teljes biomassza, az összes flavonoidok és az összes poliszacharidok kombinációja enyhítheti az LPS által kiváltott gyulladást a RAW 264.7 makrofágokban az NF - κ B útvonal aktiválódásának gátlásával.

Összefoglalva, ez a tanulmány elsősorban a Sophora alopecuroides hagyományos WDE, WUE, EUE, ERE és különböző hatékony részeik TAE, TFE, TPE és kilenc kombináció (1:1:1:1, 1:2:2, 1:3:3, 2:1:2, 2:2:3, 2:3:1, 3:1:3, 3:2:1, 3:3:2) gyulladáscsökkentő hatását hasonlította össze in vitro. Megállapítottuk, hogy a TAE, TFE, TPE (2:1:2) kombinációja volt a legjobb gátló hatással az LPS által kiváltott gyulladásra a RAW 264.7 sejtekben, és gyulladáscsökkentő hatást fejtett ki in vitro az NF - κ B gyulladásos útvonal aktiválódásának gátlásával. Ez a kísérlet csak a gyulladáscsökkentő szerek szűrését fejezte be sejtszinten, és csak a Sophora alopecuroides különböző farmakológiai részeinek kompatibilitási kombinációit vizsgálta. Vannak azonban még olyan problémák, mint a komplex kémiai összetétel, a nem egyértelmű farmakológiai összetevők és a hatások anyagi alapja, amelyek további kutatást igényelnek.