A büdös bazsarózsából származó feniletanolos glikozidok azonosítása és in vitro emberi tüdő adenokarcinóma A549 sejtek elleni mechanizmusának vizsgálata
A tüdőrák a hörgők nyálkahártyáján és mirigyeiben előforduló rosszindulatú daganat. A Nemzeti Rákközpont által szolgáltatott adatok szerint 2022-ben a tüdőrák előfordulási aránya Kínában 10,6% lesz, a halálozási arány pedig 24%, ami az első helyet jelenti a rosszindulatú daganatok halálozási arányában Kínában, és a női betegek aránya évről évre nő, és általában fiatalabbak lesznek. A hagyományos kínai orvoslás, többkomponensű és többcélú előnyei miatt, késleltetheti a tumor progresszióját, fokozhatja a tumorsejtek érzékenységét a sugár- és kemoterápiára, csökkentheti a műtét utáni fertőzéseket, és különböző utakon keresztül minimalizálhatja a sugár- és kemoterápia által okozott mellékhatásokat, ezáltal elérheti a tumor kiújulásának és áttétképződésének megelőzését és kezelését, valamint a hosszú távú stabil tumorokat. A Stinky Peony egy hatékony hagyományos kínai gyógyszer, amelyet a Hunan népi gyógyászatban fedeztek fel a rosszindulatú daganatok kezelésére, és amelyet több mint 40 éves ismételt klinikai és tudományos kutatási gyakorlat során választottak ki. A Stinky peony enyhe természetű, csípős és keserű ízű, és a "szél és nedvesség eloszlatása, méregtelenítés és a vér pangásának eloszlatása, a duzzanat és a fájdalom csökkentése" hatású. A Hunan régióban széles körben használják a különböző daganatok, különösen a tüdőrák kezelésében. A büdös pünkösdi rózsa hatékony összetevői és mechanizmusai a daganatellenes kezelésben azonban még nem tisztázottak. A kutatócsoport előzetes kísérletei során megállapították, hogy a Paeonia lactiflora gazdag feniletanolos glikozidokban és jó daganatellenes aktivitással rendelkezik. Ebben a tanulmányban tovább azonosítjuk a Paeonia lactiflora feniletanolos glikozidjait, és feltárjuk az A549 sejtek proliferációjának in vitro gátlásának mechanizmusát, hogy tovább tanulmányozzuk a Paeonia lactiflora feniletanolos glikozidjainak tumorellenes hatását és mechanizmusát, és megalapozzuk a hatékony és alacsony toxicitású hagyományos kínai gyógyszerkészítmények kifejlesztését.

A tüdőrák a hagyományos kínai orvoslásban a "tüdőhalmozódás" és a "tüdőkő" kategóriájába tartozó, a hörgők nyálkahártyáján és mirigyeiben előforduló rosszindulatú daganat. A kortárs orvosszakértők úgy vélik, hogy a tüdőrák folyamatos növekedése a környezetszennyezésnek vagy a hosszú távú dohányzásnak köszönhető, ami a mérgező kórokozók felhalmozódásához vezet a tüdőben. A tüdő qi mozgása megszakad, és a toxinok, a qi és a vér kombinációja idővel tüdőfelhalmozódáshoz vezet. A legalapvetőbb kóros mechanizmus a rákos toxin, a flegma és a vér pangása, a hiány és a felesleg kombinációja a fő kóros változások. Ouyang Qi professzor, a Hu Xiang Ouyang vegyes betegségek iskolájának örököse, a hagyományos kínai orvoslás elismert gyakorlója, Ouyang Qi professzor tapasztalataira támaszkodva a tüdőrák kezelésében és a műtét utáni kiújulás megelőzésében, úgy véljük, hogy a tüdőrák etiológiája és patogenezise a patogén toxinok behatolásának, az elégtelen pozitív qi-nek köszönhető, ami a tüdőfunkció elvesztéséhez, a flegma felhalmozódásához és a stagnáláshoz vezet idővel, ami a qi és a vér yin és yang hiányát eredményezi a szervezetben, ami végül a tüdőrák kialakulásához vezet. A tüdőrák fő patogenezisét a patogén tényezők, mint például a kórokozó tényezők, a flegma, a véralvadás és a toxinok felhalmozódása, valamint a qi stagnálása és a vér pangása jellemzi. A kezelés elve a vér pangásának méregtelenítése és megszüntetése, a váladék eltávolítása és a csomók szétoszlatása. A büdös bazsarózsa a Clerodendrum bungei Steud, a Verbenaceae családba tartozó növény szára és levele. Kínában széles körben elterjedt, és bőséges gyógyászati forrásokkal rendelkezik. Természete nyugodt, csípős és kesernyés ízű. Az ősi irodalom feljegyzi, hogy funkciói: "a szél és a nedvesség eloszlatása, a vér pangásának méregtelenítése és eloszlatása, a duzzanat csökkentése és a fájdalom enyhítése", ami összhangban van a tüdőrák esetében a "vér pangásának méregtelenítése és eltávolítása, a váladék eltávolítása és a csomók eloszlatása" kezelési elvével. A kutatások kimutatták, hogy mind a büdös pünkösdi rózsa vegyület, mind a kivonata jó daganatellenes aktivitással rendelkezik, különösen a legjobb daganatellenes aktivitással a tüdőrák ellen. Az előzetes kutatás során a kutatócsoport több folyadékminőségi elemzést végzett a büdös bazsarózsa főzetén és különböző kivont összetevőin, és megállapította, hogy a büdös bazsarózsa fő összetevői feniletanolos glikozidok, amelyek között a fő összetevők a levélszerű és heterogén levélszerű glikozidok. Kísérleti szűrés és bizonyítás után megállapították, hogy a büdös bazsarózsa feniletanolos glikozidjai jó daganatellenes hatással rendelkeznek. Ezért feltételezhető, hogy a főként levélszerű és heterogén levélszerű glikozidokból álló feniletanolos glikozidok lehetnek a büdös bazsarózsa tumorellenes hatásának fő összetevői.

Az EphA2 az Eph-család, a receptor-tirozin-kinázok (RKT-k) legnagyobb alcsaládjának fő tagja, és számos rosszindulatú daganatban, különösen a magas malignitású és erős inváziós és metasztázisképességű tumorokban túlterjed, és részt vesz a tüdőrák inváziójában és metasztázisában. A kutatások azt találták, hogy az EphA2 receptorok jelentősen expresszálódnak a tüdőrákos betegekben és a tüdőrákos sejtvonalakban, és minél magasabb az expressziós szint, annál rosszabb a betegek prognózisa. Tüdőrákszövetekben az epidermális növekedési faktor (EGFR) foszforilált EphA2 S897 mutációját figyelték meg, és a sejtmembránon 19-es exon deléciót találtak. Az EphA2 kétféle biológiai hatást fejt ki: ligandfüggő és ligandfüggetlen. Egyrészt, amikor az EphrinA1 ligandum kötődik az EphA2 receptorhoz, az EphA2 internalizáción megy keresztül, majd ubikvitináció révén lebomlik; Ugyanakkor az EphA2-t a tirozinkináz aktiválja foszforilációra, míg az EphA2 S897 helye defoszforilálódik, ezáltal gátolja az olyan jelátviteli utakat, mint a PI3K/ATK és a Ras/MAPK, és ligandumfüggő tumorellenes hatást fejt ki. Másrészt, amikor az EphrinA1 ligandum alacsony expressziójú és az EphA2 magas expressziójú, az EphA2 foszforilálódik és aktiválódik az S897-helyen keresztül, míg tirozin-foszforilációs szintje csökken, ezáltal aktiválva a PI3K/ATK/mTOR és a Pyk2/c-Src jelátviteli utakat, ligandumfüggetlen tumorellenes hatást kifejtve. A ligandtól független EphA2 jelátvitel elősegítheti a tumor proliferációját és metasztázisát, fokozhatja a tumor gyógyszerrezisztenciáját, és fenntarthatja a tumor őssejt-szerű tulajdonságait. Látható, hogy az EphA2 kettős aktivitással rendelkezik: ligandum aktiválta rákellenes és nem ligandum aktiválta rákellenes aktivitással, és az EphA2 S897 helyének defoszforilációja vagy foszforilációja az a kapcsoló, amely a két ellentétes biológiai hatást szabályozza. Az EphA2 S897 defoszforilációja az EphrinA1 ligandumhoz kapcsolódik, míg az EphA2 S897 foszforilációja az ATK-hoz, amely a legkorábbi és elismert fontos tényező. Az ATK foszforilációja fontos tényező az EphA2 faktor sejtmigrációt és inváziót elősegítő hatásában, míg az EphrinA1 ligandum EphrinA1-hez való kötődése gátolja az ATK aktiválódását és elnyomja a tumorsejtek migrációját. Vannak jelentések arról, hogy az EphA2 egyszerre az ATK upstream negatív szabályozója és downstream effektorja. A PI3K/ATK/mTOR útvonal aktiválása, az EphrinA1s ligand hiányával párosulva, az EphA2 tumorszuppresszorból pro tumorfaktorrá alakul át, amelyet az ATK foszforilál és elősegíti a malignus tumor kialakulását. A jelentések szerint az EphA2 a Wnt - β - katenin útvonalon keresztül elősegíti az EMT progresszióját a gyomorrákos sejtekben.

A kutatócsoport korábbi kutatásai kimutatták, hogy a büdös bazsarózsa kivonata jelentősen csökkentheti az EMT-vel kapcsolatos Vimentin, Slug, Snail, Twist és Cmyc faktorok expresszióját tüdőrákban, és gátolja a tüdőrák EMT folyamatát a Wnt - β - catenin útvonal szabályozásával. Ebben a vizsgálatban azt találtuk, hogy a Paeonia lactiflora feniletanolos glikozidok kivonatai jelentősen gátolják az A549 sejtek proliferációját, migrációját és invázióját, valamint elnyomják az EphA2, mTOR, p-mTOR, β - katenin, GSK-3 β, P-GSK-3 β és P-ATK fehérjék expresszióját. Ezek közül különösen jelentős a P-ATK downregulációja, és az EphA2 fehérje downregulációja az EphrinA1 expresszióját is felszabályozhatja. A büdös bazsarózsa feniletanolos glikozid kivonata indukálhatja az EphA2 kötődését az EphrinA1 ligandummal, elősegítheti a ligandum EphrinA1 függő rákellenes útvonalat, és az EphA2, P-ATK, mTOR és más tényezők gátlásával, az EphA2/ATK/mTOR jelátviteli útvonal blokkolásával tumorellenes hatást fejthet ki. A P-EphA2 növekedése a ligandumfüggőségnek köszönhető. Bár az EphA2 S897-es helye defoszforiláción megy keresztül, az EphA2 tirozinkináz foszforilációval aktiválódik, így a teljes P-EphA2 felszabályozódhat. A daganatellenes mechanizmus azonban nagyon összetett, és a tumorsejtek sorsát nem egyetlen útvonal határozza meg. Ez a tanulmány kísérleti bizonyítékot szolgáltat a büdös bazsarózsa tumorellenes molekuláris mechanizmusának meghatározásához és az EphA2 célpontokat célzó, rendkívül hatékony és alacsony toxicitású hagyományos kínai gyógyszerkivonatok kifejlesztéséhez.