Többváltozós aktív komponensek elemzése a háromlevelű sziklamászó szőlő különböző részeiben az UFLC-QTRAP-MS/MS technológia segítségével
A San Ye Qing a szőlőfélék családjába tartozó Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg (THDG) gyökere vagy egész növénye. Gyógyászati felhasználása hosszú múltra tekint vissza, és egyike az "Új Zhejiang Nyolc Íznek". Hőtisztító és méregtelenítő, a vérkeringést elősegítő és a szelet elűző hatású. Elsősorban magas lázas görcsök, tüdőgyulladás, asztma, májgyulladás, reuma, scrofula és esés okozta sérülések esetén használják. A modern farmakológiai kutatások kimutatták, hogy a San Ye Qing olyan farmakológiai hatásokkal rendelkezik, mint a daganatellenes, antioxidáns, gyulladáscsökkentő, antibakteriális, lázcsillapító, fájdalomcsillapító és immunszabályozó hatás.
A Háromlevelű sziklacsúcsra mászó szőlő elsősorban a Jangce folyó déli részén nő, és régóta használják gyógyászati célokra Zhejiang népi területein. Egész növénye és gyökere felhasználható. Az utóbbi években a tanulmányok jelentős különbségeket találtak a különböző gyógyhatású részei között a kémiai összetétel és a farmakológiai aktivitás tekintetében. Például a föld feletti kivonat antioxidáns aktivitása jelentősen magasabb, mint a föld alatti kivonaté, míg a föld alatti kivonat hidroxilgyök-lebontó aktivitása jelentősen magasabb, mint a föld feletti kivonaté. Mivel a San Ye Qing jelenleg csak a helyi hagyományos kínai gyógyászati szabványokban és előírásokban szerepel, az indikátorkomponensei nem egyértelműen meghatározottak. Az elmúlt években a kutatások kimutatták, hogy a San Ye Qing flavonoidjai, fenolsavai, polifenoljai, poliszacharidjai és egyéb hatóanyagai mellett a tanninok, aminosavak és nukleozidok is rendelkeznek potenciális élettani aktivitással. Ezek közül a tannin komponensek, mint például a B2 antocianinok gátló hatással vannak a gyomorrákra, az aminosav komponensek jó terápiás hatással vannak a májkárosodásra, a nukleozid komponensek pedig jó antibakteriális és vírusellenes hatással rendelkeznek. Jelenleg a Háromlevelű sziklamászó szőlő különböző részeinek hatóanyagaival kapcsolatos kutatások elsősorban az összes flavonoidokra, az összes fenolsavakra és az összes poliszacharidokra összpontosítanak, és kevés a több hatóanyag-kategória egyidejű tartalmi meghatározása. A különböző részek minőségértékelésének és ellenőrzésének elemzési módszerei főként a nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát, a gázkromatográfia-tömegspektrometriát és a folyadékkromatográfia-tömegspektrometriás technológiát foglalják magukban. Ezért a Háromlevelű sziklamászó szőlő különböző részeinek minőségellenőrzéséhez és az erőforrások ésszerű felhasználásához szükséges referenciaadatok biztosítása érdekében gyors módszert kell létrehozni a különböző részek hatóanyagtartalmának meghatározására és a minőségértékelés elvégzésére.
Az ultragyors, nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás, háromszoros kvadrupolos lineáris ioncsapda tömegspektrometria (UFLC-QTRAP-MS/MS) technológia nagy elválasztó képességgel, nagy szelektivitással és nagy érzékenységgel rendelkezik, és gyorsan szétválaszthatja és azonosíthatja a vegyes vegyületeket. Alkalmas a Trifolium repens többkomponensű komplex rendszereinek elválasztására és elemzésére. Ezért ez a tanulmány a Háromlevelű sziklamászó szőlő gyökereit, szárát és leveleit használta kísérleti tárgyként, és egyidejűleg 60 hatóanyagot határozott meg az UFLC-QTRAP-MS/MS technológiával. Többváltozós statisztikai elemzési módszereket, mint például a főkomponens-elemzést (PCA), a parciális legkisebb négyzetek regresszióanalízisét (PLS-DA) és a varianciaanalízist használtuk a különböző részek hatóanyagai közötti különbségek megkülönböztetésére és feltárására, és szürke relációs elemzést (GRA) alkalmaztunk a különböző részek minőségének értékelésére. E tanulmány eredményei módszertani hivatkozásokat nyújthatnak a Háromlevelű sziklamászó szőlő különböző gyógyhatású részeiben lévő különböző hatóanyagok gyors mennyiségi meghatározásához és minőségellenőrzéséhez, és megalapozhatják az erőforrások ésszerű fejlesztését és felhasználását.

A kutatási eredmények azt mutatják, hogy a Háromlevelű sziklaszőlő gyökereinek, szárának és leveleinek minőségében jelentős különbségek vannak, és egyes összetevők tartalmában is jelentős különbségek mutatkoznak. Nyolc vegyületet választottunk ki PLS-DA, VIP-érték és varianciaanalízis segítségével hatóanyag-markerekként a különböző részek megkülönböztetésére. Közülük a vitexin, az izovitexin, a paeoniflorin és az izopaeoniflorin magas és alacsony tendenciát mutatott a levelek, a szárak és a gumók tartalmában, és mind flavonoid szénglikozid vegyületek voltak. A flavonoid szénglikozidok erős DPPH-gyökfogó képessége miatt a kísérlet eredményei is adathivatkozással szolgálhatnak ahhoz a következtetéshez, hogy a Háromlevelű sziklamászó szőlő föld feletti részének antioxidáns aktivitása magasabb, mint a föld alatti részé. Ezenkívül a proantocianidin B2-tartalom a szárakban 5029,22 μ g/g, ami 4-szer, illetve 15-ször magasabb, mint a gyökerekben és a levelekben. Jelentős antioxidáns és tumorellenes aktivitással is rendelkezik, ami azt jelzi, hogy a proantocianidin komponensek fontos szerepet játszhatnak a növény különböző részeinek anyagcsere-aktivitásában. A szürke relációs analízis relatív korrelációs (ri) értéke felhasználható a gyökér-, szár- és levélminták minőségi osztályainak rangsorolására. A végeredmény azt mutatja, hogy a levélminták (S7-S12) magasabb rangsorolást kaptak, ami azt jelzi, hogy minőségük jobb, mint a szár- és gyökérmintáké.

Összefoglalva, ez a tanulmány egy ultragyors, nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás, háromszoros kvadrupolos lineáris ioncsapda tömegspektrometriát (UFLC-QTRAP-MS/MS) alkalmazó módszert hozott létre 60 hatóanyag egyidejű meghatározására a Háromlevelű sziklamászó szőlő különböző részeiben, valamint összehasonlította és értékelte a különböző részeket többváltozós statisztikai elemzéssel. A tartalom meghatározásának eredményei azt mutatják, hogy a különböző részekben bőséges típusú hatóanyagok találhatók, amelyek közül a levelekben a több hatóanyag össztartalma magasabb, mint a szárakban és a gumókban. Ezenkívül a többváltozós statisztikai elemzés, például a főkomponens-elemzés jelentős különbségeket mutatott a Háromlevelű sziklamászó szőlő különböző részeinek hatóanyagai között, és nyolc szignifikánsan eltérő komponenst mutatott ki, nevezetesen a vitexint, az izovitexint, az ikarint, az izoikarint, a proantocianidin B2-t, a tirozint, a fenilalanint és a leucint. A szürke korrelációs elemzés azt mutatja, hogy a levélrészek minősége viszonylag jobb, ezt követi a szár és a gumók minősége. A tanulmány eredményei módszertani támpontot nyújtanak a Háromlevelű sziklaszőlő különböző részeiben található hatóanyagok meghatározásához és minőségellenőrzéséhez, és megalapozzák az erőforrások ésszerű fejlesztését és felhasználását.