Le polysaccharide GiP-B1 de Glycyrrhiza uralensis active les macrophages RAW264.7 via la voie de signalisation TLR4\/MyD88\/NF - \u03ba B
\nLe syst\u00e8me immunitaire inn\u00e9 est une ligne de d\u00e9fense importante de l'organisme pour r\u00e9sister \u00e0 l'invasion des pathog\u00e8nes, et les r\u00e9cepteurs Toll (TLR), ainsi que les cellules pr\u00e9sentatrices d'antig\u00e8nes telles que les macrophages et les cellules dendritiques exprimant les TLR, sont des composants importants du syst\u00e8me immunitaire inn\u00e9. Les recherches sur l'implication des TLR dans la reconnaissance immunitaire des macrophages, la r\u00e9gulation de la transduction des signaux et l'initiation de la r\u00e9ponse immunitaire ont montr\u00e9 que tous les membres de la famille TLR, \u00e0 l'exception du TLR3, peuvent reconna\u00eetre des ligands tels que les lipopolysaccharides (LPS), se lier au facteur de diff\u00e9renciation my\u00e9lo\u00efde 88 (MyD88), recruter les kinases concern\u00e9es et activer la kinase inhibitrice du facteur nucl\u00e9aire kappa B (IKK), qui phosphoryle l'inhibiteur de NF - \u03ba B (I \u03ba B) qui se lie \u00e0 NF - \u03ba B. Il se dissocie, active NF - \u03ba B dans le noyau, d\u00e9clenche ou inhibe la transcription des g\u00e8nes cibles, r\u00e9gulant ainsi la r\u00e9ponse immunitaire inn\u00e9e.
\nLes polysaccharides, qui constituent une classe efficace de r\u00e9gulateurs de la r\u00e9ponse biologique, activent les r\u00e9ponses immunitaires des macrophages par le biais de m\u00e9canismes li\u00e9s \u00e0 la transduction de la voie de signalisation TLRs\/NF - \u03ba B. La recherche a montr\u00e9 que de nombreux polysaccharides v\u00e9g\u00e9taux peuvent se lier sp\u00e9cifiquement \u00e0 des r\u00e9cepteurs tels que TLR2\/4 \u00e0 la surface des macrophages, activer la voie de signalisation NF - \u03ba B, r\u00e9guler la transcription des cytokines et l'expression des mol\u00e9cules co-stimulantes dans les cellules phagocytaires, et initier des cascades en aval pour activer l'immunit\u00e9 inn\u00e9e et acquise.
\nGlycyrrhiza inflata Bat. est une plante m\u00e9dicinale caract\u00e9ristique du Xinjiang. Ses racines et rhizomes s\u00e9ch\u00e9s ont \u00e9t\u00e9 inclus dans la pharmacop\u00e9e chinoise en tant qu'herbes m\u00e9dicinales. Notre groupe de recherche a confirm\u00e9 que son polysaccharide brut GiP et ses composants purifi\u00e9s favorisent la prolif\u00e9ration des macrophages et des lymphocytes. Le composant purifi\u00e9 GiP-B1, dont la teneur est \u00e9lev\u00e9e, est un polysaccharide acide avec une cha\u00eene principale poly Rha GalA, dont le poids mol\u00e9culaire relatif est sup\u00e9rieur \u00e0 2,0 \u00d7 106Da et dont la teneur en acide uronique est de 16,8%. Il peut promouvoir de mani\u00e8re significative la prolif\u00e9ration et la phagocytose des macrophages RAW264.7, augmenter la s\u00e9cr\u00e9tion d'IL-1 \u03b2 et de TNF - \u03b1 par les macrophages, et promouvoir la g\u00e9n\u00e9ration de NO et de NOS. L'\u00e9quipe de recherche a ensuite utilis\u00e9 un anticorps monoclonal anti-TLR4 pour intervenir dans les macrophages et a constat\u00e9 que la s\u00e9cr\u00e9tion de TNF - \u03b1, IL-1 \u03b2, 1L-6 et de NO induite par GiP-B1, ainsi que l'expression de l'iNOS, 1L-1 \u03b2, TNF - \u03b1, et 1L-6 mRNA, \u00e9taient inhib\u00e9es \u00e0 des degr\u00e9s divers, ce qui sugg\u00e8re que l'activation des macrophages par GiP-B1 peut \u00eatre li\u00e9e \u00e0 TLR4 et \u00e0 ses voies de signalisation connexes. Afin d'\u00e9tudier la relation entre les macrophages activ\u00e9s par GiP-B1 et la voie de signalisation TLR4\/NF - \u03ba B, cette \u00e9tude a transfect\u00e9 les macrophages RAW264.7 avec l'ARN interf\u00e9rent TLR4 (TLR4 siRNA) in vitro pour explorer si l'intervention de GiP-B1 peut activer les macrophages par la voie de signalisation NF - \u03ba B m\u00e9di\u00e9e par TLR4, afin d'\u00e9lucider le m\u00e9canisme mol\u00e9culaire des macrophages activ\u00e9s par GiP-B1.<\/p>\n
Les macrophages sont d'importants ex\u00e9cuteurs de l'immunit\u00e9 inn\u00e9e dans l'organisme. En tant que cellules phagocytaires sp\u00e9cialis\u00e9es dans les tissus, ils peuvent reconna\u00eetre des motifs mol\u00e9culaires associ\u00e9s aux pathog\u00e8nes (PAMP) conserv\u00e9s \u00e0 la surface des micro-organismes pathog\u00e8nes gr\u00e2ce \u00e0 des r\u00e9cepteurs de reconnaissance des motifs (PRR) tels que les TLR exprim\u00e9s \u00e0 leur surface. Par des voies de signalisation en aval, ils r\u00e9gulent l'expression de divers g\u00e8nes de r\u00e9ponse immunitaire pour \u00e9liminer les pathog\u00e8nes. La recherche a montr\u00e9 que de nombreux polysaccharides v\u00e9g\u00e9taux naturels peuvent servir de ligands pour le TLR4, facilitant la signalisation des macrophages par des voies d\u00e9pendantes et non d\u00e9pendantes de MyD88, favorisant l'entr\u00e9e de NF - \u03ba B dans le noyau et se liant \u00e0 des s\u00e9quences de reconnaissance sp\u00e9cifiques sur les promoteurs de l'ADN, m\u00e9diant l'expression de cytokines telles que IL-1, IL-6, TNF - \u03b1, etc. Ces cytokines agissent \u00e9galement comme des stimulateurs de NF - \u03ba B, activant davantage NF - \u03ba B pour provoquer des r\u00e9ponses inflammatoires soutenues et activer les r\u00e9ponses immunitaires adaptatives.
\nEn tant que plante source de la r\u00e9glisse traditionnelle chinoise, les principales substances m\u00e9dicinales de la r\u00e9glisse \u00e0 fruits gonfl\u00e9s comprennent non seulement des chalcones ayant une activit\u00e9 anticanc\u00e9reuse, mais aussi des polysaccharides ayant une activit\u00e9 antioxydante, une activit\u00e9 inhibitrice de l'alpha glucosidase et une activit\u00e9 r\u00e9gulatrice du syst\u00e8me immunitaire. Les recherches pr\u00e9liminaires de notre groupe de recherche ont r\u00e9v\u00e9l\u00e9 que le polysaccharide brut GiP et ses composants purifi\u00e9s de Glycyrrhiza uralensis ont pour effet de favoriser la prolif\u00e9ration des macrophages et des lymphocytes. Parmi eux, le composant purifi\u00e9 GiP-B1, dont la teneur est plus \u00e9lev\u00e9e, a un effet promoteur significatif sur la prolif\u00e9ration, la phagocytose et la s\u00e9cr\u00e9tion de cytokines des macrophages RAW264.7. Le groupe de recherche pr\u00e9liminaire a utilis\u00e9 un anti-TLR4 pour traiter les cellules et a d\u00e9couvert que son m\u00e9canisme d'action est li\u00e9 \u00e0 l'activation de la voie de signalisation TLR4\/NF - \u03ba B apr\u00e8s l'intervention de l'\u00e9chantillon. Cet article utilise la technologie siRNA pour r\u00e9duire au silence le g\u00e8ne TLR4, et constate que GiP-B1 favorise la prolif\u00e9ration des macrophages RAW264.7 et inhibe la s\u00e9cr\u00e9tion des cytokines TNF- \u03b1, IL-1 \u03b2 et IL-6. Cela indique que TLR4 est impliqu\u00e9 dans l'effet de GiP-B1 sur la prolif\u00e9ration des macrophages RAW264.7 et la s\u00e9cr\u00e9tion de cytokines, c'est-\u00e0-dire que l'activation des macrophages par GiP-B1 est li\u00e9e \u00e0 TLR4, ce qui est coh\u00e9rent avec les r\u00e9sultats des exp\u00e9riences pr\u00e9c\u00e9dentes de blocage d'anticorps. En outre, d'apr\u00e8s les types de cytokines s\u00e9cr\u00e9t\u00e9es par les macrophages activ\u00e9s par GiP-B1 via TLR4, tels que TNF-\u03b1, IL-1 \u03b2, IL-6, etc., il semble que l'activation des macrophages par GiP-B1 puisse induire une polarisation vers le type M1. Les macrophages de type M1 favorisent non seulement les r\u00e9ponses inflammatoires, mais ont \u00e9galement des capacit\u00e9s de pr\u00e9sentation d'antig\u00e8nes, qui peuvent activer les r\u00e9ponses immunitaires adaptatives des cellules T, induire des r\u00e9ponses immunitaires des cellules Th1 et exercer des fonctions de d\u00e9gagement immunitaire de l'h\u00f4te contre les agents pathog\u00e8nes et les cellules tumorales. Des \u00e9tudes ant\u00e9rieures ont \u00e9galement montr\u00e9 que GiP-B1 avait certains effets antitumoraux in vitro. La question de savoir si son m\u00e9canisme d'action est li\u00e9 \u00e0 la promotion de la polarisation des macrophages par GiP-B1 et s'il peut promouvoir la fonction immunitaire anti-tumorale de l'organisme en r\u00e9gulant les macrophages dans le micro-environnement tumoral doit encore faire l'objet de recherches approfondies.
\nAfin de mieux d\u00e9montrer la relation entre l'activation des macrophages par GiP-B1 et la voie TLR4\/NF - \u03ba B, cette exp\u00e9rience a \u00e9galement \u00e9tudi\u00e9 les changements d'expression de l'ARNm et des prot\u00e9ines des g\u00e8nes r\u00e9gulateurs en amont TLR4, de la mol\u00e9cule d\u00e9pendante MyD88, des g\u00e8nes r\u00e9cepteurs en aval NF \u03ba Bp65, I \u03ba B \u03b1, etc. dans les macrophages r\u00e9gul\u00e9s par GiP-B1 sous l'intervention du siRNA TLR4. Les r\u00e9sultats ont montr\u00e9 qu'en raison de l'inhibition du g\u00e8ne TLR4, le niveau d'expression de l'ARNm de TLR4 a diminu\u00e9, la teneur en NF - \u03ba Bp65 libre dans le noyau a consid\u00e9rablement diminu\u00e9, et l'activation de la voie NF - \u03ba B a \u00e9galement diminu\u00e9 en cons\u00e9quence ; GiP-B1 augmente non seulement l'expression du g\u00e8ne TLR4 dans les macrophages dans des conditions normales, mais aussi l'ARNm et l'expression prot\u00e9ique de la mol\u00e9cule d\u00e9pendante de la signalisation TLR4 MyD88 et des g\u00e8nes en aval NF - \u03ba Bp65 et p-I \u03ba B \u03b1, ainsi que l'ARNm et l'expression prot\u00e9ique de TLR4 et MyD88, NF - \u03ba Bp65, et p-I \u03ba B \u03b1 par interf\u00e9rence ARN, ce qui prouve que GiP-B1 peut agir comme l'un des ligands de TLR4, activer la voie de signalisation TLR4\/NF - \u03ba B d\u00e9pendant de MyD88, activer le facteur de transcription nucl\u00e9aire p65 de la famille NF - \u03ba B, entra\u00eenant la d\u00e9gradation par phosphorylation de l'I \u03ba B et la dissociation de NF - \u03ba B, et promouvoir NF - \u03ba B. Transfert du cytoplasme au noyau, liaison \u00e0 des s\u00e9quences d'ADN sp\u00e9cifiques, r\u00e9gulation de la transcription des cytokines inflammatoires, de la prolif\u00e9ration cellulaire (antiapoptose) et d'autres g\u00e8nes, participation aux r\u00e9ponses inflammatoires, aux r\u00e9ponses immunitaires, etc. GiP-B1 active les macrophages par la voie de signalisation TLR4\/MyD88\/NF - \u03ba B, qui est presque identique \u00e0 la voie d'action des polysaccharides dans les \u00e9tudes susmentionn\u00e9es.
\nEn r\u00e9sum\u00e9, GiP-B1 peut r\u00e9guler la fonction immunitaire des macrophages RAW264.7 par la voie de signalisation TLR4\/NF - \u03ba B, et son effet r\u00e9gulateur est principalement obtenu par la voie d\u00e9pendante de MyD88. Cette exp\u00e9rience fournit des preuves exp\u00e9rimentales de l'activation des macrophages par les polysaccharides de Glycyrrhiza uralensis, ce qui permet d'\u00e9lucider le m\u00e9canisme d'action des polysaccharides de Glycyrrhiza uralensis dans la r\u00e9ponse inflammatoire, la r\u00e9ponse immunitaire et d'autres aspects.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Glycyrrhiza uralensis polysaccharide GiP-B1 activates macrophage RAW264.7 via TLR4\/MyD88\/NF – \u03ba B signaling pathway The innate immune system is an important defense line for the body to resist pathogen invasion, and Toll like receptors (TLRs), as well as antigen-presenting cells such as macrophages and dendritic cells expressing TLRs, are important components of the innate immune […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n