Recherche sur la m\u00e9thode de d\u00e9tection \u00e0 haut d\u00e9bit de l'ergothion\u00e9ine de Lingzhi
\nL'ergothion\u00e9ine (EGT), \u00e9galement connue sous le nom de sel interne de 2-thio-Lhistidine trim\u00e9thyle, est un acide amin\u00e9 naturel abondant chez de nombreux animaux et plantes. Il n'est synth\u00e9tis\u00e9 que par certains micro-organismes (actinomyc\u00e8tes, streptomyc\u00e8tes), des champignons et certaines cyanobact\u00e9ries, et ne peut \u00eatre synth\u00e9tis\u00e9 par les organismes animaux eux-m\u00eames. Le corps humain ne peut ing\u00e9rer l'EGT qu'\u00e0 partir de la nourriture et accumuler de fortes concentrations d'EGT dans diverses cellules et tissus par l'interm\u00e9diaire du transporteur de cations organiques de type 1 (OCTN1), tr\u00e8s sp\u00e9cifique. L'EGT est consid\u00e9r\u00e9 comme un antioxydant puissant, et Servillo et al. ont \u00e9tudi\u00e9 son m\u00e9canisme antioxydant, estimant qu'il poss\u00e8de un m\u00e9canisme d'oxydor\u00e9duction unique, et ont propos\u00e9 un effet antioxydant unique de l'EGT dans les cellules. Le potentiel d'oxydo-r\u00e9duction standard de l'EGT est de -0,06V, alors que le potentiel des autres thiols est g\u00e9n\u00e9ralement compris entre -0,32V et -0,2V. Par cons\u00e9quent, l'EGT est plus stable que d'autres antioxydants dans des environnements \u00e0 pH physiologique et est moins sujet \u00e0 l'oxydation spontan\u00e9e. La recherche a montr\u00e9 que l'EGT a de multiples fonctions physiologiques importantes, telles que les effets anti-inflammatoires, la fonction de protection cellulaire obtenue en prot\u00e9geant l'ADN, la fonction antid\u00e9pressive obtenue en favorisant la diff\u00e9renciation neuronale et la neurogen\u00e8se, la fonction de protection oculaire obtenue en r\u00e9sistant au stress oxydatif ; La fonction de protection cardiovasculaire et c\u00e9r\u00e9brovasculaire obtenue en interrompant l'expression des mol\u00e9cules d'adh\u00e9sion li\u00e9es \u00e0 l'ath\u00e9roscl\u00e9rose. L'EGT a un large \u00e9ventail de perspectives d'application dans des industries telles que la m\u00e9decine, l'alimentation et les cosm\u00e9tiques en raison de ses effets pr\u00e9ventifs et th\u00e9rapeutiques sur les maladies neurod\u00e9g\u00e9n\u00e9ratives obtenus par l'inhibition de la toxicit\u00e9, et de sa s\u00e9curit\u00e9 inh\u00e9rente.<\/p>\n
Les m\u00e9thodes de production de l'EGT comprennent la synth\u00e8se chimique, l'extraction de champignons comestibles et la fermentation microbienne. En raison du co\u00fbt \u00e9lev\u00e9 et de la complexit\u00e9 des deux premi\u00e8res m\u00e9thodes, la fermentation en profondeur des hyphes de champignons comestibles est actuellement le mode principal de production industrielle de l'EGT. Cependant, les souches naturelles produisent peu d'EGT et il est n\u00e9cessaire de cultiver des souches industrielles d'EGT \u00e0 haut rendement par le biais de techniques de s\u00e9lection. Les m\u00e9thodes de culture des souches industrielles de champignons comestibles comprennent la s\u00e9lection par mutagen\u00e8se, la s\u00e9lection par hybridation, la s\u00e9lection par g\u00e9nie g\u00e9n\u00e9tique et la s\u00e9lection par fusion de protoplastes. Cependant, chaque m\u00e9thode de s\u00e9lection n\u00e9cessite de nombreux tests \u00e0 grande \u00e9chelle sur la teneur en EGT. Il convient de noter que l'importance des tests de teneur en EGT dans le processus de s\u00e9lection r\u00e9side davantage dans la comparaison de la teneur entre les \u00e9chantillons. \u00c0 l'heure actuelle, les m\u00e9thodes de d\u00e9tection de l'EGT comprennent la chromatographie liquide \u00e0 haute performance, l'\u00e9lectrophor\u00e8se capillaire \u00e0 haute performance et l'\u00e9lectrophor\u00e8se en couche mince. La m\u00e9thode la plus r\u00e9pandue est la chromatographie liquide \u00e0 haute performance, qui permet de d\u00e9tecter avec pr\u00e9cision la teneur en EGT de syst\u00e8mes mat\u00e9riels complexes. Cependant, la chromatographie liquide \u00e0 haute performance pr\u00e9sente des inconv\u00e9nients \u00e9vidents, \u00e0 savoir qu'elle n\u00e9cessite d'explorer diff\u00e9rentes conditions de d\u00e9tection pour diff\u00e9rents \u00e9chantillons. En outre, en raison du pic tardif de l'EGT et du co\u00fbt \u00e9lev\u00e9 des \u00e9chantillons standard, la s\u00e9lection d'\u00e9chantillons \u00e0 haut rendement \u00e0 partir d'un grand nombre d'\u00e9chantillons en \u00e9levage peut entra\u00eener un temps de d\u00e9tection long et un co\u00fbt \u00e9lev\u00e9, ce qui entrave consid\u00e9rablement le d\u00e9veloppement et la recherche d'applications de l'EGT. Il est donc urgent d'\u00e9tablir une m\u00e9thode de d\u00e9tection rapide \u00e0 haut d\u00e9bit permettant de d\u00e9terminer avec pr\u00e9cision la concentration d'EGT entre les \u00e9chantillons.
\nEn raison de ses fortes propri\u00e9t\u00e9s antioxydantes et de sa r\u00e9ductibilit\u00e9 mod\u00e9r\u00e9e aux ions ferreux divalents (ni affect\u00e9e par le contact avec l'oxyg\u00e8ne de l'air, ni r\u00e9duite en raison d'une faible r\u00e9ductibilit\u00e9), l'EGT peut r\u00e9agir avec les ions ferreux divalents pour former des ch\u00e9lates incolores, tandis que les ions thiocyanates r\u00e9agissent avec les ions ferreux divalents pour former des complexes rouges. Sur la base de ces caract\u00e9ristiques, le thiocyanate de fer a \u00e9t\u00e9 choisi comme agent r\u00e9ducteur dans cette \u00e9tude, et l'ergotamine standard a \u00e9t\u00e9 utilis\u00e9e pour r\u00e9agir avec le thiocyanate de fer afin d'\u00e9tablir un syst\u00e8me de d\u00e9tection \u00e0 haut d\u00e9bit pour l'ergotamine. Parall\u00e8lement, le syst\u00e8me de d\u00e9tection \u00e0 haut d\u00e9bit a \u00e9t\u00e9 valid\u00e9 en faisant varier les rendements en EGT de diff\u00e9rentes souches de Ganoderma lucidum. Les r\u00e9sultats de cette \u00e9tude fourniront de nouvelles m\u00e9thodes et id\u00e9es pour le criblage de micro-organismes EGT \u00e0 haut rendement et la s\u00e9lection de nouvelles souches EGT \u00e0 haut rendement.<\/p>\n
Sur la base des propri\u00e9t\u00e9s physicochimiques fortement r\u00e9ductrices de l'ergothion\u00e9ine, avant de construire le syst\u00e8me EGT thiocyanate fer, des exp\u00e9riences ont \u00e9t\u00e9 men\u00e9es pour construire le syst\u00e8me permanganate de potassium alcalin, le syst\u00e8me vert de bromocr\u00e9sol, le syst\u00e8me bleu de m\u00e9thyl\u00e8ne, le syst\u00e8me guaiacol et le syst\u00e8me EGT de chlorure ferrique. Les r\u00e9sultats ont montr\u00e9 que le syst\u00e8me de permanganate de potassium alcalin a \u00e9chou\u00e9 en raison de sa faible stabilit\u00e9 ; le d\u00e9veloppement de la couleur du syst\u00e8me de vert de bromocr\u00e9sol a \u00e9chou\u00e9 en raison de la d\u00e9pendance du pH ; dans le syst\u00e8me de bleu de m\u00e9thyl\u00e8ne en bouteille, en raison de la forte r\u00e9ductibilit\u00e9 de l'\u00e9tat r\u00e9duit du bleu de m\u00e9thyl\u00e8ne, il est \u00e9galement facilement oxyd\u00e9 en bleu de m\u00e9thyl\u00e8ne lorsqu'il est en contact avec l'oxyg\u00e8ne de l'air, ce qui entra\u00eene l'\u00e9chec de l'exp\u00e9rience sans aucun ph\u00e9nom\u00e8ne ; le syst\u00e8me de ga\u00efacol a \u00e9galement \u00e9chou\u00e9 en raison de la forte r\u00e9ductibilit\u00e9 et de l'interf\u00e9rence du contact avec l'oxyg\u00e8ne ; le syst\u00e8me de chlorure ferrique a \u00e9chou\u00e9 en raison d'un faible rendu des couleurs. Le syst\u00e8me de thiocyanate de fer de l'EGT peut \u00eatre utilis\u00e9 pour l'\u00e9tude des m\u00e9thodes de d\u00e9tection \u00e0 haut d\u00e9bit de l'EGT.<\/p>\n
Lors de la construction du syst\u00e8me EGT de d\u00e9tection du fer thiocyanate, il a \u00e9t\u00e9 constat\u00e9 que les substances ph\u00e9noliques r\u00e9siduelles dans la solution d'extraction affectaient la r\u00e9action color\u00e9e du syst\u00e8me et r\u00e9duisaient sa sensibilit\u00e9 lorsque l'\u00e9chantillon test\u00e9 \u00e9tait extrait \u00e0 l'aide de la m\u00e9thode d'extraction brute EGT ordinaire, \u00e0 savoir l'extraction \u00e0 volume constant par pr\u00e9cipitation \u00e0 l'alcool et soufflage \u00e0 l'azote. Par cons\u00e9quent, apr\u00e8s l'extraction \u00e0 volume constant par soufflage d'azote, une \u00e9tape d'\u00e9limination du ph\u00e9nol au chloroforme doit \u00eatre ajout\u00e9e \u00e0 la solution d'extraction brute.
\nGanoderma lucidum est un champignon m\u00e9dicinal traditionnel et pr\u00e9cieux en Chine, qui contient diverses substances bioactives et fonctions physiologiques. Sa teneur en ergothion\u00e9ine est relativement \u00e9lev\u00e9e parmi de nombreux champignons comestibles, mais sa production commerciale reste faible. Par cons\u00e9quent, la culture d'une nouvelle souche de Ganoderma lucidum produisant beaucoup d'ergothion\u00e9ine rev\u00eat une grande importance et une grande valeur d'application pratique. Sur la base des raisons susmentionn\u00e9es, notre laboratoire a obtenu un lot de produits de pseudo-fusion par r\u00e9g\u00e9n\u00e9ration, isolation et identification de la fusion de protoplastes. Les produits de fusion de Ganoderma lucidum utilis\u00e9s dans le processus de validation de cette m\u00e9thode sont tous d\u00e9riv\u00e9s de cette source.
\nLa m\u00e9thode \u00e9tablie dans cette \u00e9tude est bas\u00e9e sur les propri\u00e9t\u00e9s physiques et chimiques de l'EGT lui-m\u00eame, et le syst\u00e8me de d\u00e9tection est sensible et stable. Elle convient \u00e0 la comparaison rapide de grandes quantit\u00e9s d'\u00e9chantillons dans le processus de s\u00e9lection des souches de fermentation industrielle productrices d'EGT. En th\u00e9orie, seule une simple optimisation de l'extraction de l'EGT de l'\u00e9chantillon est n\u00e9cessaire pour r\u00e9aliser une d\u00e9tection rapide \u00e0 haut d\u00e9bit de la teneur en EGT dans la grande majorit\u00e9 des souches, ce qui permet de d\u00e9passer les limites de la recherche originale sur l'EGT et de fournir de nouvelles m\u00e9thodes et id\u00e9es pour le d\u00e9veloppement global et la recherche sur l'application de l'EGT.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Research on High throughput Detection Method of Lingzhi Ergothionein Ergothioneine (EGT), also known as 2-thio-Lhistidine trimethyl inner salt, is a natural amino acid that is abundant in many animals and plants. It is only synthesized in some microorganisms (actinomycetes, streptomyces), fungi, and certain cyanobacteria, and cannot be synthesized by animal organisms themselves. The human body […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n