Criblage rapide des principes actifs hypolipid\u00e9miants de la rhubarbe \u00e0 l'aide de mat\u00e9riaux biocompatibles de la membrane de la cellule h\u00e9patique L02 modifi\u00e9e chimiquement
\nLe d\u00e9pistage des ingr\u00e9dients actifs dans la m\u00e9decine traditionnelle chinoise repose principalement sur le suivi de l'activit\u00e9, avec des composants monom\u00e8res comme objets de d\u00e9pistage, ce qui pr\u00e9sente les inconv\u00e9nients d'une charge de travail importante, d'une op\u00e9ration fastidieuse et d'une faible efficacit\u00e9. Par rapport aux m\u00e9thodes traditionnelles de suivi de l'activit\u00e9, la chromatographie sur membrane cellulaire (CMC) est une technique de chromatographie d'affinit\u00e9 biologique qui s'est d\u00e9velopp\u00e9e rapidement ces derni\u00e8res ann\u00e9es et qui pr\u00e9sente les caract\u00e9ristiques d'une reconnaissance sp\u00e9cifique et d'une s\u00e9paration efficace. Le principe de base de la CMC est de lier la membrane cellulaire \u00e0 la surface d'un support en gel de silice pour former une phase stationnaire. Le r\u00e9cepteur de la membrane cellulaire peut se lier sp\u00e9cifiquement aux mol\u00e9cules de m\u00e9dicament, et l'interaction entre les mol\u00e9cules de m\u00e9dicament et les r\u00e9cepteurs de la membrane cellulaire peut \u00eatre \u00e9tudi\u00e9e \u00e0 l'aide d'une analyse chromatographique. La CMC combine les avantages de la technologie chromatographique, de la biologie cellulaire et mol\u00e9culaire et de la pharmacologie des r\u00e9cepteurs pour r\u00e9aliser une simulation dynamique approximative du processus d'action des ingr\u00e9dients pharmaceutiques actifs in vivo dans la colonne chromatographique. Par rapport aux adsorbants couramment utilis\u00e9s, tels que les r\u00e9sines \u00e9changeuses d'ions et les r\u00e9sines d'adsorption macroporeuses, la CMC pr\u00e9sente l'avantage de combiner la s\u00e9paration chromatographique et le criblage d'activit\u00e9. Elle est facile \u00e0 utiliser, rapide et stable, et pr\u00e9sente une sensibilit\u00e9 \u00e9lev\u00e9e, ce qui la rend particuli\u00e8rement adapt\u00e9e au d\u00e9pistage des principes actifs dans des syst\u00e8mes complexes tels que la m\u00e9decine traditionnelle chinoise.
\nLa chromatographie sur membrane cellulaire peut \u00eatre divis\u00e9e en deux cat\u00e9gories : l'adsorption physique et la modification chimique, en fonction des diff\u00e9rentes formes de liaison entre la membrane cellulaire et le support en gel de silice. La chromatographie d'affinit\u00e9 biologique \u00e0 membrane cellulaire par adsorption physique est pr\u00e9par\u00e9e en utilisant l'effet de fusion de la membrane cellulaire elle-m\u00eame et l'effet d'adsorption des groupes hydroxyles de silicium sur la surface du gel de silice ; ce type de force est relativement faible, ce qui fait que la membrane cellulaire se d\u00e9tache facilement du support, entra\u00eenant une courte dur\u00e9e de vie de la colonne chromatographique. La modification chimique de la membrane cellulaire pour la chromatographie d'affinit\u00e9 biologique implique une liaison covalente entre le gel de silice et la membrane cellulaire. Le groupe silanol du gel de silice subit une r\u00e9action de condensation avec l'agent de couplage silane pour introduire des groupes amin\u00e9s, qui se r\u00e9ticulent avec les mol\u00e9cules de glutarald\u00e9hyde. Une extr\u00e9mit\u00e9 du groupe fonctionnel ald\u00e9hyde libre peut \u00eatre obtenue \u00e0 la surface du gel de silice ; la membrane cellulaire contient un grand nombre de groupes amin\u00e9s, qui sont susceptibles de subir des r\u00e9actions de condensation aldoamine \u00e0 temp\u00e9rature ambiante, r\u00e9alisant ainsi la connexion covalente entre le gel de silice et la membrane cellulaire. Dans la chromatographie de bioaffinit\u00e9 \u00e0 membrane cellulaire modifi\u00e9e chimiquement, le gel de silice porteur est li\u00e9 de mani\u00e8re covalente \u00e0 la membrane cellulaire, qui est relativement stable, et la membrane cellulaire ne se d\u00e9tache pas facilement, ce qui prolonge la dur\u00e9e de vie de la colonne de chromatographie.<\/p>\n
La rhubarbe est une plante m\u00e9dicinale authentique de la province de Gansu et l'un des m\u00e9dicaments traditionnels chinois couramment utilis\u00e9s dans la pratique clinique. Elle a des effets pharmacologiques tels que l'antibact\u00e9rien, l'antitumoral, l'anti-inflammatoire, l'antiviral et l'hypolipid\u00e9miant. De nombreux chercheurs et groupes de recherche ont confirm\u00e9 l'effet hypolipid\u00e9miant de la rhubarbe dans des \u00e9tudes ant\u00e9rieures, et notre groupe de recherche a s\u00e9lectionn\u00e9 l'extrait d'\u00e9thanol 30% comme partie efficace pour l'hypolipid\u00e9mie chez les rats hyperlipid\u00e9miques, mais la base de sa substance pharmacologique sp\u00e9cifique n'est pas encore claire ; Le groupe de recherche a \u00e9galement pr\u00e9par\u00e9 un mat\u00e9riel de chromatographie d'affinit\u00e9 biologique \u00e0 adsorption physique sur la membrane des cellules h\u00e9patiques L02, mais son d\u00e9tachement de la membrane cellulaire est s\u00e9v\u00e8re et son utilisation est limit\u00e9e. C'est pourquoi, dans cette exp\u00e9rience, le gel de silice modifi\u00e9 par l'APTES a \u00e9t\u00e9 utilis\u00e9 comme support pour pr\u00e9parer le mat\u00e9riel de chromatographie d'affinit\u00e9 biologique de la membrane des cellules h\u00e9patiques L02. La cible \u00e0 la surface de la membrane cellulaire a \u00e9t\u00e9 utilis\u00e9e pour adsorber sp\u00e9cifiquement les composants chimiques de l'extrait d'\u00e9thanol 30% de rhubarbe. Une analyse CLHP a \u00e9t\u00e9 effectu\u00e9e sur les changements dans les pics chromatographiques de chaque composant chimique avant et apr\u00e8s l'adsorption. Sur la base du taux de changement de la surface du pic chromatographique, les composants actifs hypolipid\u00e9miants de la rhubarbe ont \u00e9t\u00e9 rapidement s\u00e9lectionn\u00e9s ; et l'\u00e9tude de la r\u00e9utilisabilit\u00e9 du mat\u00e9riel a fourni de nouvelles id\u00e9es pour le criblage \u00e0 haut d\u00e9bit de la base de substance de l'effet hypolipid\u00e9miant de la rhubarbe.<\/p>\n
Le gel de silicone subit des r\u00e9actions de r\u00e9ticulation et de condensation avec l'APTES et le glutarald\u00e9hyde, et est li\u00e9 de mani\u00e8re covalente \u00e0 la membrane cellulaire pour pr\u00e9parer le mat\u00e9riau de bio-affinit\u00e9 de la membrane cellulaire L02 modifi\u00e9e avec l'APTES comme support. La microscopie \u00e9lectronique \u00e0 balayage et la spectroscopie infrarouge confirment la r\u00e9ussite de la pr\u00e9paration. Le mat\u00e9riau de bio-affinit\u00e9 de la membrane cellulaire L02 modifi\u00e9 par l'APTES a \u00e9t\u00e9 utilis\u00e9 pour adsorber l'extrait d'\u00e9thanol 30% de rhubarbe, et les r\u00e9sultats ont montr\u00e9 que 11 composants pouvaient \u00eatre li\u00e9s de mani\u00e8re sp\u00e9cifique ; Y compris 4 anthraquinone glycosides, 5 anthraquinone glycosides, et 2 composants inconnus, parmi lesquels l'aloe emodin \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-glucoside, rhein \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-glucoside, emodin \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-glucoside, et le composant inconnu 1 sont les principaux composants sp\u00e9cifiques qui peuvent \u00eatre utilis\u00e9s comme ingr\u00e9dients actifs potentiels pour la v\u00e9rification de l'activit\u00e9 hypolipid\u00e9miante. Cependant, en raison des nombreuses cibles \u00e0 la surface des membranes cellulaires, ce mat\u00e9riau ne convient que pour le criblage pr\u00e9liminaire des ingr\u00e9dients actifs hypolipid\u00e9miants ; et dans une \u00e9tape ult\u00e9rieure, LC-MS\/MS doit \u00eatre utilis\u00e9 pour l'identification structurelle pr\u00e9liminaire de deux composants inconnus. Compar\u00e9 \u00e0 l'adsorption physique des mat\u00e9riaux de bio-affinit\u00e9 de la membrane cellulaire L02, ce mat\u00e9riau introduit des liaisons chimiques covalentes dans une certaine mesure, \u00e9vitant le d\u00e9tachement de la membrane cellulaire et prolongeant les dur\u00e9es d'utilisation. Il peut \u00eatre utilis\u00e9 pour le d\u00e9pistage rapide des ingr\u00e9dients actifs de la rhubarbe pour r\u00e9duire les lipides sanguins, et peut \u00e9galement servir de r\u00e9f\u00e9rence pour le d\u00e9pistage rapide d'autres ingr\u00e9dients actifs pour r\u00e9duire les lipides sanguins.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Rapid screening of lipid-lowering active ingredients in rhubarb using chemically modified L02 liver cell membrane biocompatible materials The screening of active ingredients in traditional Chinese medicine mainly relies on activity tracking, with monomer components as the screening objects, which has the disadvantages of large workload, cumbersome operation, and low efficiency. Compared with traditional activity tracking […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n