El polisac\u00e1rido GiP-B1 de Glycyrrhiza uralensis activa los macr\u00f3fagos RAW264.7 a trav\u00e9s de la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n TLR4\/MyD88\/NF - \u03ba B
\nEl sistema inmunitario innato es una importante l\u00ednea de defensa del organismo para resistir la invasi\u00f3n de pat\u00f3genos, y los receptores tipo Toll (TLR), as\u00ed como las c\u00e9lulas presentadoras de ant\u00edgenos como los macr\u00f3fagos y las c\u00e9lulas dendr\u00edticas que expresan TLR, son componentes importantes del sistema inmunitario innato. Las investigaciones sobre la implicaci\u00f3n de los TLR en el reconocimiento inmunitario de los macr\u00f3fagos, la regulaci\u00f3n de la transducci\u00f3n de se\u00f1ales y el inicio de la respuesta inmunitaria han demostrado que todos los miembros de la familia TLR, excepto TLR3, pueden reconocer ligandos como los lipopolisac\u00e1ridos (LPS), unirse al factor de diferenciaci\u00f3n mieloide 88 (MyD88), reclutar quinasas relevantes, y activar la quinasa inhibidora del factor nuclear kappa B (IKK), que fosforila el inhibidor de NF - \u03ba B (I \u03ba B) que se une a NF - \u03ba B. Y se disocia, activa NF - \u03ba B en el n\u00facleo, iniciar o inhibir la transcripci\u00f3n de genes diana, regulando as\u00ed la respuesta inmune innata.
\nLos polisac\u00e1ridos, como clase eficaz de reguladores de la respuesta biol\u00f3gica, activan las respuestas inmunitarias de los macr\u00f3fagos mediante mecanismos relacionados con la transducci\u00f3n de la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n TLRs\/NF - \u03ba B. La investigaci\u00f3n ha descubierto que muchos polisac\u00e1ridos vegetales pueden unirse espec\u00edficamente a receptores como TLR2\/4 en la superficie de los macr\u00f3fagos, activar la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n NF - \u03ba B, regular la transcripci\u00f3n de citocinas y la expresi\u00f3n de mol\u00e9culas coestimuladoras en las c\u00e9lulas fagoc\u00edticas, e iniciar cascadas descendentes para activar la inmunidad innata y adquirida.
\nGlycyrrhiza inflata Bat. es un recurso vegetal medicinal caracter\u00edstico de Xinjiang. Sus ra\u00edces y rizomas secos se han incluido en la farmacopea china como hierbas medicinales. Nuestro grupo de investigaci\u00f3n ha confirmado que su polisac\u00e1rido GiP crudo y sus componentes purificados promueven la proliferaci\u00f3n de macr\u00f3fagos y linfocitos. El componente purificado GiP-B1, que tiene un alto contenido, es un polisac\u00e1rido \u00e1cido con una cadena principal poli Rha GalA, con un peso molecular relativo superior a 2,0 \u00d7 106Da y un contenido de \u00e1cido ur\u00f3nico de 16,8%. Puede promover significativamente la proliferaci\u00f3n y la fagocitosis de los macr\u00f3fagos RAW264.7, aumentar la secreci\u00f3n de IL-1 \u03b2 y TNF - \u03b1 por los macr\u00f3fagos, y promover la generaci\u00f3n de NO y NOS. El equipo de investigaci\u00f3n utiliz\u00f3 adem\u00e1s un anticuerpo monoclonal anti-TLR4 para intervenir en los macr\u00f3fagos y descubri\u00f3 que la secreci\u00f3n de TNF - \u03b1, IL-1 \u03b2, 1L-6, y NO inducida por GiP-B1, as\u00ed como la expresi\u00f3n de iNOS, 1L-1 \u03b2, TNF - \u03b1, y 1L-6 ARNm, se inhibieron en diversos grados, lo que sugiere que la activaci\u00f3n de los macr\u00f3fagos por GiP-B1 puede estar relacionada con TLR4 y sus v\u00edas de se\u00f1alizaci\u00f3n relacionadas. Con el fin de investigar la relaci\u00f3n entre los macr\u00f3fagos activados por GiP-B1 y la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n TLR4\/NF - \u03ba B, en este estudio se transfectaron macr\u00f3fagos RAW264.7 con ARN interferente TLR4 (ARNsi TLR4) in vitro para explorar si la intervenci\u00f3n de GiP-B1 puede activar los macr\u00f3fagos a trav\u00e9s de la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n NF - \u03ba B mediada por TLR4, con el fin de dilucidar el mecanismo molecular de los macr\u00f3fagos activados por GiP-B1.<\/p>\n
Los macr\u00f3fagos son importantes ejecutores de la inmunidad innata en el organismo. Como c\u00e9lulas fagoc\u00edticas tisulares especializadas, pueden reconocer patrones moleculares asociados a pat\u00f3genos (PAMP) conservados en la superficie de microorganismos pat\u00f3genos a trav\u00e9s de receptores de reconocimiento de patrones (PRR) como los TLR expresados en su superficie. A trav\u00e9s de v\u00edas de se\u00f1alizaci\u00f3n descendentes, regulan la expresi\u00f3n de varios genes de respuesta inmunitaria para eliminar los pat\u00f3genos. La investigaci\u00f3n ha demostrado que muchos polisac\u00e1ridos de plantas naturales pueden servir como ligandos para TLR4, facilitando la se\u00f1alizaci\u00f3n de macr\u00f3fagos a trav\u00e9s de v\u00edas dependientes y no dependientes de MyD88, promoviendo la entrada de NF - \u03ba B en el n\u00facleo y la uni\u00f3n a secuencias de reconocimiento espec\u00edficas en promotores de ADN, mediando la expresi\u00f3n de citoquinas como IL-1, IL-6, TNF - \u03b1, etc. Estas citoquinas tambi\u00e9n act\u00faan como estimuladores de NF - \u03ba B, activando a\u00fan m\u00e1s NF - \u03ba B para causar respuestas inflamatorias sostenidas y activar respuestas inmunes adaptativas.
\nComo planta fuente del regaliz de la medicina tradicional china, las principales sustancias medicinales del regaliz de fruto hinchado incluyen no s\u00f3lo chalconas con actividad anticancer\u00edgena, sino tambi\u00e9n polisac\u00e1ridos con actividad antioxidante, inhibidora de la alfa glucosidasa y reguladora inmunol\u00f3gica. En la investigaci\u00f3n preliminar de nuestro grupo de investigaci\u00f3n, se descubri\u00f3 que el polisac\u00e1rido crudo GiP y sus componentes purificados de Glycyrrhiza uralensis tienen el efecto de promover la proliferaci\u00f3n de macr\u00f3fagos y linfocitos. Entre ellos, el componente purificado GiP-B1 con mayor contenido tiene un efecto promotor significativo sobre la proliferaci\u00f3n, la fagocitosis y la secreci\u00f3n de citocinas de los macr\u00f3fagos RAW264.7. El grupo de investigaci\u00f3n preliminar utiliz\u00f3 anti-TLR4 para tratar las c\u00e9lulas y descubri\u00f3 que su mecanismo de acci\u00f3n est\u00e1 relacionado con la activaci\u00f3n de la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n TLR4\/NF - \u03ba B tras la intervenci\u00f3n de la muestra. Este art\u00edculo utiliza la tecnolog\u00eda de siRNA para silenciar el gen TLR4 a trav\u00e9s de TLR4 siRNA, y encuentra que GiP-B1 promueve la proliferaci\u00f3n de macr\u00f3fagos RAW264.7 e inhibe la secreci\u00f3n de citoquinas TNF - \u03b1, IL-1 \u03b2, y IL-6. Esto indica que TLR4 est\u00e1 implicado en el efecto de GiP-B1 sobre la proliferaci\u00f3n de macr\u00f3fagos RAW264.7 y la secreci\u00f3n de citocinas, es decir, la activaci\u00f3n de macr\u00f3fagos por GiP-B1 est\u00e1 relacionada con TLR4, lo que concuerda con los resultados de experimentos previos de bloqueo con anticuerpos. Adem\u00e1s, sobre la base de los tipos de citocinas secretadas por los macr\u00f3fagos activados por GiP-B1 a trav\u00e9s de TLR4, como TNF - \u03b1, IL-1 \u03b2, IL-6, etc., sugiere que la activaci\u00f3n GiP-B1 de los macr\u00f3fagos puede inducir la polarizaci\u00f3n hacia el tipo M1. Los macr\u00f3fagos de tipo M1 no s\u00f3lo promueven respuestas inflamatorias, sino que tambi\u00e9n tienen capacidades de presentaci\u00f3n de ant\u00edgenos, que pueden activar respuestas inmunitarias adaptativas de c\u00e9lulas T, inducir respuestas inmunitarias de c\u00e9lulas Th1 y ejercer funciones de limpieza inmunitaria del hu\u00e9sped contra pat\u00f3genos y c\u00e9lulas tumorales. Estudios anteriores tambi\u00e9n han descubierto que GiP-B1 tiene ciertos efectos antitumorales in vitro. Queda por determinar si su mecanismo de acci\u00f3n est\u00e1 relacionado con el hecho de que GiP-B1 promueve la polarizaci\u00f3n de los macr\u00f3fagos y si puede promover la funci\u00f3n inmunitaria antitumoral del organismo mediante la regulaci\u00f3n de los macr\u00f3fagos en el microentorno tumoral.
\nCon el fin de seguir demostrando la relaci\u00f3n entre la activaci\u00f3n GiP-B1 de los macr\u00f3fagos y la v\u00eda TLR4\/NF - \u03ba B, este experimento tambi\u00e9n estudi\u00f3 los cambios de expresi\u00f3n de ARNm y prote\u00ednas de los genes reguladores aguas arriba TLR4, la mol\u00e9cula dependiente MyD88, los genes receptores aguas abajo NF \u03ba Bp65, I \u03ba B \u03b1, etc. en macr\u00f3fagos regulados por GiP-B1 bajo la intervenci\u00f3n TLR4 siRNA. Los resultados mostraron que debido al silenciamiento del gen TLR4, el nivel de expresi\u00f3n del ARNm TLR4 disminuy\u00f3, el contenido de NF - \u03ba Bp65 libre en el n\u00facleo disminuy\u00f3 significativamente, y la activaci\u00f3n de la v\u00eda NF - \u03ba B tambi\u00e9n disminuy\u00f3 en consecuencia; GiP-B1 no s\u00f3lo aumenta la expresi\u00f3n del gen TLR4 en macr\u00f3fagos en condiciones normales, regula al alza el ARNm y la expresi\u00f3n de prote\u00ednas de TLR4 se\u00f1alizaci\u00f3n dependiente mol\u00e9cula MyD88 y los genes aguas abajo NF - \u03ba Bp65 y p-I \u03ba B \u03b1, sino que tambi\u00e9n regula al alza el ARNm y la expresi\u00f3n de prote\u00ednas de TLR4 y MyD88, NF - \u03ba Bp65 y p-I \u03ba B \u03b1 causada por la interferencia de ARN, lo que demuestra que GiP-B1 puede actuar como uno de los ligandos TLR4, activar la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n TLR4\/NF - \u03ba B dependiente de MyD88, activar el factor de transcripci\u00f3n nuclear p65 en la familia NF - \u03ba B, lo que lleva a la degradaci\u00f3n de la fosforilaci\u00f3n de I \u03ba B y la disociaci\u00f3n de NF - \u03ba B, y promover NF - \u03ba B. Transfiri\u00e9ndose del citoplasma al n\u00facleo, uni\u00e9ndose a secuencias espec\u00edficas de ADN, regulando la transcripci\u00f3n de citoquinas inflamatorias, proliferaci\u00f3n celular (antiapoptosis) y otros genes, participando en respuestas inflamatorias, respuestas inmunes, etc. GiP-B1 activa los macr\u00f3fagos a trav\u00e9s de la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n TLR4\/MyD88\/NF - \u03ba B, que es casi id\u00e9ntica a la v\u00eda de acci\u00f3n de los polisac\u00e1ridos en los estudios antes mencionados.
\nEn resumen, GiP-B1 puede regular la funci\u00f3n inmunitaria de los macr\u00f3fagos RAW264.7 a trav\u00e9s de la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n TLR4\/NF - \u03ba B, y su efecto regulador se consigue principalmente a trav\u00e9s de la v\u00eda dependiente de MyD88. Este experimento proporciona evidencia experimental de la activaci\u00f3n de los macr\u00f3fagos por polisac\u00e1ridos Glycyrrhiza uralensis, que ayuda a dilucidar el mecanismo de acci\u00f3n de polisac\u00e1ridos Glycyrrhiza uralensis en la respuesta inflamatoria, la respuesta inmune, y otros aspectos.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Glycyrrhiza uralensis polysaccharide GiP-B1 activates macrophage RAW264.7 via TLR4\/MyD88\/NF – \u03ba B signaling pathway The innate immune system is an important defense line for the body to resist pathogen invasion, and Toll like receptors (TLRs), as well as antigen-presenting cells such as macrophages and dendritic cells expressing TLRs, are important components of the innate immune […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n