Investigaci\u00f3n sobre el m\u00e9todo de detecci\u00f3n de alto rendimiento de la ergotione\u00edna del lingzhi
\nLa ergotione\u00edna (EGT), tambi\u00e9n conocida como sal interna de 2-tio-Lhistidina trimetil, es un amino\u00e1cido natural que abunda en muchos animales y plantas. S\u00f3lo se sintetiza en algunos microorganismos (actinomicetos, estreptomicetos), hongos y ciertas cianobacterias, y no puede ser sintetizado por los propios organismos animales. El cuerpo humano s\u00f3lo puede ingerir EGT de los alimentos y acumular altas concentraciones de EGT en diversas c\u00e9lulas y tejidos a trav\u00e9s del transportador de cationes org\u00e1nicos altamente espec\u00edfico novel tipo-1 (OCTN1). El EGT se considera un potente antioxidante, y Servillo et al. exploraron su mecanismo antioxidante, creyendo que tiene un mecanismo redox \u00fanico, y propusieron un efecto antioxidante \u00fanico del EGT en las c\u00e9lulas. El potencial est\u00e1ndar de oxidaci\u00f3n-reducci\u00f3n del EGT es de -0,06V, mientras que el potencial de otros tioles se sit\u00faa generalmente entre -0,32V y -0,2V. Por lo tanto, el EGT es m\u00e1s estable que otros antioxidantes en entornos de pH fisiol\u00f3gico y es menos propenso a la oxidaci\u00f3n espont\u00e1nea. La investigaci\u00f3n ha demostrado que el EGT tiene m\u00faltiples funciones fisiol\u00f3gicas importantes, como los efectos antiinflamatorios; la funci\u00f3n de protecci\u00f3n celular conseguida mediante la protecci\u00f3n del ADN; la funci\u00f3n antidepresiva conseguida mediante la promoci\u00f3n de la diferenciaci\u00f3n neuronal y la neurog\u00e9nesis; la funci\u00f3n de protecci\u00f3n ocular conseguida mediante la resistencia al estr\u00e9s oxidativo; La funci\u00f3n de protecci\u00f3n cardiovascular y cerebrovascular conseguida mediante la interrupci\u00f3n de la expresi\u00f3n de mol\u00e9culas de adhesi\u00f3n relacionadas con la aterosclerosis; EGT tiene una amplia gama de perspectivas de aplicaci\u00f3n en industrias como la medicina, la alimentaci\u00f3n y la cosm\u00e9tica debido a sus efectos preventivos y terap\u00e9uticos en enfermedades neurodegenerativas conseguidos mediante la inhibici\u00f3n de la toxicidad, y su seguridad inherente.<\/p>\n
Los m\u00e9todos de producci\u00f3n de EGT incluyen la s\u00edntesis qu\u00edmica, la extracci\u00f3n de hongos comestibles y la fermentaci\u00f3n microbiana. Debido al elevado coste y al complejo proceso de los dos primeros, la fermentaci\u00f3n profunda de hifas de hongos comestibles es actualmente el modo principal de producci\u00f3n industrial de EGT. Sin embargo, las cepas naturales tienen una baja producci\u00f3n de EGT, y es necesario cultivar cepas industriales de alto rendimiento de EGT mediante t\u00e9cnicas de cultivo. Los m\u00e9todos de cultivo de cepas industriales de hongos comestibles incluyen la cr\u00eda por mutag\u00e9nesis, la cr\u00eda por hibridaci\u00f3n, la cr\u00eda por ingenier\u00eda gen\u00e9tica y la cr\u00eda por fusi\u00f3n de protoplastos. Sin embargo, cada m\u00e9todo de cultivo requiere m\u00faltiples pruebas de contenido de EGT a gran escala. Cabe se\u00f1alar que la importancia de las pruebas de contenido de EGT en el proceso de cr\u00eda es m\u00e1s para comparar el contenido entre las muestras. En la actualidad, los m\u00e9todos de detecci\u00f3n de EGT incluyen la cromatograf\u00eda l\u00edquida de alto rendimiento, la electroforesis capilar de alto rendimiento y la electroforesis en capa fina. El m\u00e9todo m\u00e1s utilizado es la cromatograf\u00eda l\u00edquida de alto rendimiento, que puede detectar con precisi\u00f3n el contenido de EGT de sistemas materiales complejos. Sin embargo, la cromatograf\u00eda l\u00edquida de alto rendimiento tiene sus defectos obvios, es decir, necesita explorar diferentes condiciones de detecci\u00f3n para diferentes muestras. Adem\u00e1s, debido al tard\u00edo tiempo de pico de EGT y a las costosas muestras est\u00e1ndar, el cribado de muestras de alto rendimiento a partir de un gran n\u00famero de muestras en reproducci\u00f3n puede conducir a un largo tiempo de detecci\u00f3n y a un alto coste, lo que dificulta enormemente el desarrollo y la investigaci\u00f3n de aplicaciones de EGT. Por lo tanto, es urgente establecer un m\u00e9todo de detecci\u00f3n r\u00e1pida de alto rendimiento que pueda determinar con precisi\u00f3n la concentraci\u00f3n de EGT entre las muestras.
\nDebido a sus fuertes propiedades antioxidantes y a su moderada reducibilidad a iones de hierro divalente (ni se ve afectado por el contacto con el ox\u00edgeno del aire ni se reduce debido a su d\u00e9bil reducibilidad), el EGT puede reaccionar con iones de hierro divalente para formar quelatos incoloros, mientras que los iones de tiocianato reaccionan con iones de hierro divalente para formar complejos rojos. Bas\u00e1ndose en estas caracter\u00edsticas, se seleccion\u00f3 el tiocianato de hierro como agente reductor en este estudio, y se utiliz\u00f3 el est\u00e1ndar de ergotamina para reaccionar con el tiocianato de hierro con el fin de establecer un sistema de detecci\u00f3n de alto rendimiento para la ergotamina. Al mismo tiempo, el sistema de detecci\u00f3n de alto rendimiento se valid\u00f3 variando los rendimientos de EGT de diferentes cepas de Ganoderma lucidum. Los resultados de este estudio proporcionar\u00e1n nuevos m\u00e9todos e ideas para el cribado de microorganismos EGT de alto rendimiento y la obtenci\u00f3n de nuevas cepas EGT de alto rendimiento.<\/p>\n
Bas\u00e1ndose en las propiedades fisicoqu\u00edmicas fuertemente reductoras de la ergotione\u00edna, antes de construir el sistema EGT de tiocianato de hierro, se realizaron experimentos para construir el sistema de permanganato pot\u00e1sico alcalino, el sistema de verde de bromocresol, el sistema de azul de metileno de botella azul, el sistema de guayacol y el sistema EGT de cloruro f\u00e9rrico. Los resultados mostraron que el sistema de permanganato pot\u00e1sico alcalino fall\u00f3 debido a su baja estabilidad; el desarrollo del color del sistema de verde de bromocresol fall\u00f3 debido a la dependencia del pH; en el sistema de azul de metileno de botella azul, debido a la fuerte reducibilidad del azul de metileno en estado reducido, tambi\u00e9n se oxida f\u00e1cilmente a azul de metileno cuando entra en contacto con el ox\u00edgeno del aire, lo que resulta en el fracaso del experimento sin ning\u00fan fen\u00f3meno; el sistema de guayacol tambi\u00e9n fall\u00f3 debido a la fuerte reducibilidad y a la interferencia del contacto con el ox\u00edgeno; el sistema de cloruro f\u00e9rrico fall\u00f3 debido a la baja reproducci\u00f3n del color. El sistema de tiocianato de hierro EGT puede utilizarse para el estudio de m\u00e9todos de detecci\u00f3n de alto rendimiento para EGT.<\/p>\n
Durante la construcci\u00f3n del sistema de detecci\u00f3n de hierro por tiocianato EGT, se descubri\u00f3 que las sustancias fen\u00f3licas residuales en la soluci\u00f3n de extracci\u00f3n afectar\u00edan a la reacci\u00f3n de color del sistema y reducir\u00edan su sensibilidad cuando la muestra analizada se extrajera utilizando el m\u00e9todo ordinario de extracci\u00f3n de crudo EGT, es decir, la extracci\u00f3n de volumen constante por soplado de nitr\u00f3geno con precipitaci\u00f3n de alcohol. Por lo tanto, despu\u00e9s de la extracci\u00f3n a volumen constante con soplado de nitr\u00f3geno, es necesario a\u00f1adir a la soluci\u00f3n de extracci\u00f3n en bruto una etapa de eliminaci\u00f3n de fenol con cloroformo.
\nEl Ganoderma lucidum es un hongo medicinal tradicional y preciado en China, que contiene diversas sustancias bioactivas y funciones fisiol\u00f3gicas. Su contenido de ergotione\u00edna es relativamente alto entre muchos hongos comestibles, pero como cepa producida comercialmente, su rendimiento sigue siendo bajo. Por lo tanto, el cultivo de una nueva cepa de Ganoderma lucidum con alta producci\u00f3n de ergotione\u00edna es de gran importancia y valor de aplicaci\u00f3n pr\u00e1ctica. Bas\u00e1ndose en las razones anteriores, nuestro laboratorio ha obtenido un lote de productos de pseudofusi\u00f3n a trav\u00e9s de la regeneraci\u00f3n, aislamiento e identificaci\u00f3n de protoplastos de fusi\u00f3n. Todos los productos de fusi\u00f3n de Ganoderma lucidum utilizados en el proceso de validaci\u00f3n de este m\u00e9todo proceden de esta fuente.
\nEl m\u00e9todo establecido en este estudio se basa en las propiedades f\u00edsicas y qu\u00edmicas del propio EGT, y el sistema de detecci\u00f3n es sensible y estable. Es adecuado para la comparaci\u00f3n r\u00e1pida de grandes cantidades de muestras en el proceso de cultivo de cepas de fermentaci\u00f3n industrial productoras de EGT. En teor\u00eda, s\u00f3lo se necesita una simple optimizaci\u00f3n de la extracci\u00f3n de la muestra de EGT para lograr una detecci\u00f3n r\u00e1pida de alto rendimiento del contenido de EGT en la gran mayor\u00eda de las cepas, rompiendo las limitaciones de la investigaci\u00f3n original de EGT y proporcionando nuevos m\u00e9todos e ideas para el desarrollo general y la investigaci\u00f3n de la aplicaci\u00f3n de EGT.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Research on High throughput Detection Method of Lingzhi Ergothionein Ergothioneine (EGT), also known as 2-thio-Lhistidine trimethyl inner salt, is a natural amino acid that is abundant in many animals and plants. It is only synthesized in some microorganisms (actinomycetes, streptomyces), fungi, and certain cyanobacteria, and cannot be synthesized by animal organisms themselves. The human body […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n