Cribado r\u00e1pido de principios activos hipolipemiantes en ruibarbo mediante materiales biocompatibles de membrana de c\u00e9lulas hep\u00e1ticas L02 modificadas qu\u00edmicamente
\nEl cribado de principios activos en la medicina tradicional china se basa principalmente en el seguimiento de la actividad, con componentes monom\u00e9ricos como objetos de cribado, que tiene las desventajas de una gran carga de trabajo, una operaci\u00f3n engorrosa y una baja eficiencia. En comparaci\u00f3n con los m\u00e9todos tradicionales de seguimiento de actividad, la cromatograf\u00eda de membrana celular (CMC) es una t\u00e9cnica de cromatograf\u00eda de afinidad biol\u00f3gica de r\u00e1pido desarrollo en los \u00faltimos a\u00f1os, que tiene las caracter\u00edsticas de reconocimiento espec\u00edfico y separaci\u00f3n eficiente. El principio b\u00e1sico de la CMC es unir la membrana celular a la superficie de un soporte de gel de s\u00edlice para formar una fase estacionaria. El receptor de la membrana celular puede unirse espec\u00edficamente a las mol\u00e9culas de f\u00e1rmaco, y la interacci\u00f3n entre las mol\u00e9culas de f\u00e1rmaco y los receptores de la membrana celular puede estudiarse mediante an\u00e1lisis cromatogr\u00e1fico. El CMC combina las ventajas de la tecnolog\u00eda cromatogr\u00e1fica, la biolog\u00eda celular y molecular y la farmacolog\u00eda de receptores para lograr una simulaci\u00f3n aproximadamente din\u00e1mica del proceso de acci\u00f3n de los principios activos farmac\u00e9uticos in vivo dentro de la columna cromatogr\u00e1fica; en comparaci\u00f3n con los adsorbentes utilizados habitualmente, como las resinas de intercambio i\u00f3nico y las resinas de adsorci\u00f3n macroporosas, el CMC tiene la ventaja de combinar la separaci\u00f3n cromatogr\u00e1fica con el cribado de actividad. Es f\u00e1cil de manejar, r\u00e1pido y estable, y tiene una alta sensibilidad, por lo que es especialmente adecuado para el cribado de principios activos en sistemas complejos como la medicina tradicional china.
\nCuando se prepara la cromatograf\u00eda de membrana celular, puede dividirse en adsorci\u00f3n f\u00edsica y modificaci\u00f3n qu\u00edmica en funci\u00f3n de las diferentes formas de uni\u00f3n de la membrana celular y el soporte de gel de s\u00edlice. La cromatograf\u00eda de afinidad biol\u00f3gica de membrana celular por adsorci\u00f3n f\u00edsica se prepara utilizando el efecto de fusi\u00f3n de la propia membrana celular y el efecto de adsorci\u00f3n de los grupos hidroxilo del silicio en la superficie del gel de s\u00edlice; este tipo de fuerza es relativamente d\u00e9bil, lo que hace que la membrana celular se desprenda f\u00e1cilmente del soporte, dando lugar a una corta vida \u00fatil de la columna cromatogr\u00e1fica. La modificaci\u00f3n qu\u00edmica de la membrana celular para la cromatograf\u00eda de afinidad biol\u00f3gica implica la uni\u00f3n covalente entre el gel de s\u00edlice y la membrana celular; El grupo silanol del gel de s\u00edlice sufre una reacci\u00f3n de condensaci\u00f3n con el agente de acoplamiento silano para introducir grupos amino, que se entrecruzan con mol\u00e9culas de glutaraldeh\u00eddo. Un extremo del grupo funcional aldeh\u00eddo libre puede obtenerse en la superficie del gel de s\u00edlice; La membrana celular contiene un gran n\u00famero de grupos amino, que son propensos a sufrir reacciones de condensaci\u00f3n de aldoaminas a temperatura ambiente, con lo que se consigue la conexi\u00f3n covalente entre el gel de s\u00edlice y la membrana celular. En la cromatograf\u00eda de bioafinidad con membrana celular modificada qu\u00edmicamente, el gel de s\u00edlice portador est\u00e1 unido covalentemente a la membrana celular, que es relativamente estable, y la membrana celular no se desprende f\u00e1cilmente, lo que prolonga la vida \u00fatil de la columna de cromatograf\u00eda.<\/p>\n
El ruibarbo es una hierba medicinal aut\u00e9ntica de la provincia de Gansu y una de las medicinas tradicionales chinas m\u00e1s utilizadas en la pr\u00e1ctica cl\u00ednica; tiene efectos farmacol\u00f3gicos como antibacteriano, antitumoral, antiinflamatorio, antiviral y reductor de l\u00edpidos. Muchos estudiosos y grupos de investigaci\u00f3n han confirmado el efecto hipolipemiante del ruibarbo en estudios anteriores, y nuestro grupo de investigaci\u00f3n ha examinado el extracto de etanol 30% como la parte eficaz para la reducci\u00f3n de l\u00edpidos en ratas hiperlipid\u00e9micas, pero su base farmacol\u00f3gica espec\u00edfica sustancia todav\u00eda no est\u00e1 claro; El grupo de investigaci\u00f3n tambi\u00e9n prepar\u00f3 una adsorci\u00f3n f\u00edsica L02 membrana celular del h\u00edgado material de cromatograf\u00eda de afinidad biol\u00f3gica, pero su desprendimiento de la membrana celular es grave y su uso es limitado. En vista de ello, en este experimento se utiliz\u00f3 gel de s\u00edlice modificado con APTES como soporte para preparar material de cromatograf\u00eda de afinidad biol\u00f3gica de membrana de c\u00e9lulas hep\u00e1ticas L02. La diana de la superficie de la membrana celular se utiliz\u00f3 para adsorber espec\u00edficamente los componentes qu\u00edmicos del extracto etan\u00f3lico 30% de ruibarbo. Se realiz\u00f3 un an\u00e1lisis por HPLC de los cambios en los picos cromatogr\u00e1ficos de cada componente qu\u00edmico antes y despu\u00e9s de la adsorci\u00f3n. Bas\u00e1ndose en la tasa de cambio del \u00e1rea del pico cromatogr\u00e1fico, se seleccionaron r\u00e1pidamente los componentes activos hipolipemiantes del ruibarbo; y se investig\u00f3 la reutilizaci\u00f3n del material, proporcionando nuevas ideas para la selecci\u00f3n de alto rendimiento de la sustancia base del efecto hipolipemiante del ruibarbo.<\/p>\n
El gel de silicona se somete a reacciones de reticulaci\u00f3n y condensaci\u00f3n con APTES y glutaraldeh\u00eddo, y se une covalentemente a la membrana celular para preparar material de bioafinidad de membrana celular L02 modificado con APTES como portador. La microscop\u00eda electr\u00f3nica de barrido y la espectroscopia infrarroja confirman el \u00e9xito de la preparaci\u00f3n. El material de bioafinidad de membrana celular L02 modificado con APTES se utiliz\u00f3 para adsorber extracto etan\u00f3lico 30% de ruibarbo, y los resultados mostraron que 11 componentes pod\u00edan unirse espec\u00edficamente; Incluidos 4 gluc\u00f3sidos de antraquinona, 5 gluc\u00f3sidos de antraquinona y 2 componentes desconocidos, entre los cuales la emodina \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-gluc\u00f3sido de aloe, la re\u00edna \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-gluc\u00f3sido, la emodina \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-gluc\u00f3sido, y el componente desconocido 1 son los principales componentes espec\u00edficos que pueden utilizarse como ingredientes activos potenciales para la verificaci\u00f3n de la actividad hipolipemiante. Sin embargo, debido a los numerosos objetivos en la superficie de las membranas celulares, este material s\u00f3lo es adecuado para el cribado preliminar de ingredientes activos hipolipemiantes; Y en la etapa posterior, LC-MS\/MS necesita ser utilizado para la identificaci\u00f3n estructural preliminar de dos componentes desconocidos. En comparaci\u00f3n con la adsorci\u00f3n f\u00edsica de los materiales de bioafinidad de la membrana celular L02, este material introduce enlaces covalentes qu\u00edmicos hasta cierto punto, evitando el desprendimiento de la membrana celular y prolongando los tiempos de uso. Puede utilizarse para el cribado r\u00e1pido de los principios activos del ruibarbo para reducir los l\u00edpidos sangu\u00edneos, y tambi\u00e9n puede servir de referencia para el cribado r\u00e1pido de otros principios activos para reducir los l\u00edpidos sangu\u00edneos.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Rapid screening of lipid-lowering active ingredients in rhubarb using chemically modified L02 liver cell membrane biocompatible materials The screening of active ingredients in traditional Chinese medicine mainly relies on activity tracking, with monomer components as the screening objects, which has the disadvantages of large workload, cumbersome operation, and low efficiency. Compared with traditional activity tracking […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n