Estudio del efecto inmunomodulador de las saponinas de Panax ginseng y Panax ginseng en c\u00e9lulas RAW 264.7 in vitro
\nLos macr\u00f3fagos implicados en la inmunidad inespec\u00edfica del organismo constituyen la primera l\u00ednea de defensa contra los agentes pat\u00f3genos. Los macr\u00f3fagos activados pueden liberar diversos factores inflamatorios y citoquinas (como NO y TNF - \u03b1) para participar en la respuesta inmunitaria del organismo y regular la respuesta inmunitaria. La investigaci\u00f3n ha demostrado que las saponinas de la medicina tradicional china pueden activar los macr\u00f3fagos, mejorar la capacidad fagoc\u00edtica celular, promover la secreci\u00f3n de mol\u00e9culas activas relacionadas y regular al alza la expresi\u00f3n de prote\u00ednas relacionadas. Las saponinas de las ra\u00edces de fibroblastos de Radix Pseudostellaria (RPFRS) son uno de los componentes bioactivos aislados de las ra\u00edces de ginseng de Pseudostellaria heterophylla, que tienen los efectos de mejorar la inmunidad del organismo, la antioxidaci\u00f3n, etc. En la actualidad, la ra\u00edz principal del Panax ginseng se utiliza como medicamento, mientras que la seda de la ra\u00edz se desecha, lo que provoca un gran desperdicio. La investigaci\u00f3n ha descubierto que el contenido medio de saponinas totales en la seda de la ra\u00edz de Panax ginseng es 1,14 veces superior al del tub\u00e9rculo de la ra\u00edz. La investigaci\u00f3n preliminar del grupo de investigaci\u00f3n ha demostrado que el extracto de Panax ginseng y Panax ginseng, compuesto principalmente de saponinas, tiene un efecto inmunoprotector en ratones inmunodeprimidos y puede mejorar su funci\u00f3n inmunol\u00f3gica. En la actualidad, existen pocos informes sobre los efectos inmunitarios del RPFRS por s\u00ed solo, y los macr\u00f3fagos mononucleares de rat\u00f3n (c\u00e9lulas RAW 264.7) se utilizan a menudo como modelo para los estudios de actividad inmunitaria in vitro. Por lo tanto, este experimento se centr\u00f3 en las c\u00e9lulas RAW 264.7 y estudi\u00f3 los efectos inmunomoduladores y los posibles mecanismos de los RPFRS in vitro mediante la detecci\u00f3n de indicadores inmunol\u00f3gicos como la proliferaci\u00f3n celular, la actividad fagoc\u00edtica, las citocinas relacionadas y la expresi\u00f3n de ARNm. El objetivo del estudio es enriquecer el contenido inmunol\u00f3gico del RPFRS y proporcionar una base te\u00f3rica para el desarrollo y la utilizaci\u00f3n del Panax ginseng.<\/p>\n
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Efecto de los RPFRS en la proliferaci\u00f3n de c\u00e9lulas RAW 264.7. Las saponinas tienen ciertas propiedades hemol\u00edticas y t\u00f3xicas, y presentan dosis t\u00f3xicas m\u00e1s bajas en comparaci\u00f3n con otros extractos vegetales, por lo que debe prestarse atenci\u00f3n a la dosificaci\u00f3n cuando se utilicen. Para determinar si el RPFRS tiene efectos t\u00f3xicos sobre las c\u00e9lulas RAW 264.7 y buscar la concentraci\u00f3n \u00f3ptima de RPFRS para los experimentos, se utiliz\u00f3 el m\u00e9todo MTT para determinar el efecto de diferentes concentraciones de RPFRS sobre la proliferaci\u00f3n de c\u00e9lulas RAW 264.7. Los resultados de este experimento mostraron que RPFRS podr\u00eda promover significativamente la proliferaci\u00f3n de c\u00e9lulas RAW 264,7 en el rango de concentraci\u00f3n de 12,5-800 \u03bc g \/ ml (P <0,01), y mostr\u00f3 una relaci\u00f3n dosis-respuesta en el rango de concentraci\u00f3n de 12,5-100 \u03bc g \/ ml. Por lo tanto, se seleccionaron concentraciones de 12,5-200 \u03bc g\/mL para los experimentos posteriores.<\/p>\n
Efecto del RPFRS en la actividad fagoc\u00edtica de las c\u00e9lulas RAW 264.7. La fagocitosis es una de las principales funciones de los macr\u00f3fagos. En la inmunidad no espec\u00edfica, los macr\u00f3fagos pueden eliminar o digerir pat\u00f3genos dentro de las c\u00e9lulas, c\u00e9lulas muertas del cuerpo y otros ant\u00edgenos de part\u00edculas grandes mediante la fagocitosis. En la inmunidad espec\u00edfica, pueden desempe\u00f1ar un papel en la regulaci\u00f3n inmunitaria y la presentaci\u00f3n de ant\u00edgenos. Existen informes de investigaci\u00f3n que indican que tanto las saponinas D de Platycodon grandiflorus como las saponinas de Magnolia grandiflorus pueden mejorar la capacidad fagoc\u00edtica de los macr\u00f3fagos de rat\u00f3n. En consonancia con estudios anteriores, los resultados de este experimento indican que RPFRS puede aumentar el valor de DO de la fagocitosis de c\u00e9lulas RAW 264.7 de rojo neutro de una manera dependiente de la dosis a concentraciones de 12,5-200 \u03bc g \/ ml (P <0,01), lo que indica que RPFRS puede mejorar la actividad fagoc\u00edtica de las c\u00e9lulas RAW 264.7 y mejorar su funci\u00f3n inmune.<\/p>\n
Efecto del RPFRS sobre la secreci\u00f3n de NO y la expresi\u00f3n de ARNm de la iNOS en c\u00e9lulas RAW 264.7. Los macr\u00f3fagos pueden eliminar pat\u00f3genos desencadenando respuestas inmunitarias inflamatorias y ayudar al organismo a regular respuestas inmunitarias espec\u00edficas, mientras que el NO sintetizado por la \u00f3xido n\u00edtrico sintasa (iNOS) est\u00e1 estrechamente relacionado con su funci\u00f3n de respuesta inmunitaria inflamatoria. Yang et al. encontr\u00f3 que el hidrolizado de prote\u00edna de Panax ginseng puede promover las c\u00e9lulas RAW 264 para secretar NO y activar los macr\u00f3fagos con TNF - \u03b1, la mejora de su actividad inmune. Los resultados de este experimento mostraron que, en comparaci\u00f3n con el grupo de control en blanco, RPFRS podr\u00eda aumentar significativamente el contenido de NO en el sobrenadante de c\u00e9lulas RAW 264.7 (P <0,05), y al mismo tiempo, la expresi\u00f3n de iNOS en c\u00e9lulas RAW 264.7 tambi\u00e9n se increment\u00f3 significativamente (P <0,01), ambos de los cuales mostraron un aumento dependiente de la dosis. Este resultado concuerda con los hallazgos de Li et al. de que el astragal\u00f3sido IV puede aumentar la expresi\u00f3n de NO y ARNm de iNOS en el sobrenadante de las c\u00e9lulas RAW 264.7.
\nEfecto del RPFRS sobre la secreci\u00f3n de citocinas y la expresi\u00f3n de ARNm en c\u00e9lulas RAW 264.7. Citoquinas como la IL-6, IL-10, IL-1 \u03b2, y TNF - \u03b1 desempe\u00f1an principalmente un papel en las respuestas inflamatorias locales y sist\u00e9micas. La IL-6 puede inducir a los precursores de linfocitos B a convertirse en c\u00e9lulas secretoras de anticuerpos. La IL-10, como factor antiinflamatorio, puede inhibir la actividad de los macr\u00f3fagos y las citocinas inflamatorias como la IL-6 y el TNF - \u03b1. La IL-1 \u03b2 puede promover la activaci\u00f3n y degranulaci\u00f3n de macr\u00f3fagos y neutr\u00f3filos, as\u00ed como la expresi\u00f3n de otros factores inflamatorios. El TNF \u03b1 es la principal citoquina proinflamatoria producida por los macr\u00f3fagos en respuesta a diversos est\u00edmulos, que puede promover la secreci\u00f3n de citoquinas como la IL-6 y la IL-8. Sun et al. descubrieron que la saponina de soja Ab puede aumentar los niveles de TNF - \u03b1 e IL-1 \u03b2 en el sobrenadante de c\u00e9lulas RAW 264.7. Li et al. encontr\u00f3 que el astragal\u00f3sido IV puede aumentar los niveles y la expresi\u00f3n de ARNm de IL-6, IL-1 \u03b2, y TNF - \u03b1 en el sobrenadante de c\u00e9lulas RAW 264.7. Los resultados de este estudio mostraron que en comparaci\u00f3n con el grupo de control en blanco, RPFRS podr\u00eda dosis dependiente aumentar los niveles de IL-6, IL-10, IL-1 \u03b2, y TNF - \u03b1 en el sobrenadante de c\u00e9lulas RAW 264.7. RPFRS tambi\u00e9n aument\u00f3 los niveles de expresi\u00f3n de ARNm de IL-6, IL-10, IL-1 \u03b2, y TNF - \u03b1 en las c\u00e9lulas RAW 264.7 en diversos grados, lo que indica que RPFRS puede regular su funci\u00f3n inmune mediante la estimulaci\u00f3n de la secreci\u00f3n de citoquinas.
\nEfecto de la RPFRS en la expresi\u00f3n de prote\u00ednas relacionadas con la v\u00eda NF - \u03ba B en c\u00e9lulas RAW 264.7. El NF - \u03ba B, como factor de transcripci\u00f3n nuclear, puede activar la expresi\u00f3n de diversos genes relacionados con las primeras respuestas de defensa, regulando as\u00ed procesos fisiol\u00f3gicos como la apoptosis celular, la respuesta inmunitaria, la inflamaci\u00f3n y la remodelaci\u00f3n tisular. La activaci\u00f3n de la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n NF - \u03ba B es estimulada por varias mol\u00e9culas de se\u00f1alizaci\u00f3n. TLR2 y TLR4, como miembros de la familia de receptores de reconocimiento de patrones, est\u00e1n altamente expresados en las superficies de macr\u00f3fagos, c\u00e9lulas B y c\u00e9lulas DC, y pueden monitorizar y reconocer patrones moleculares relacionados con enfermedades para iniciar la transducci\u00f3n de se\u00f1ales en la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n. Estos \u00faltimos tambi\u00e9n pueden estimular MyD88 para desencadenar una cascada de se\u00f1alizaci\u00f3n e inducir la activaci\u00f3n de NF - \u03ba B. MyD88 y TRIF se unen a las prote\u00ednas de uni\u00f3n TLR en el citoplasma, activan la v\u00eda MAPK bajo la acci\u00f3n de la ubiquitina, promueven la fosforilaci\u00f3n de I \u03ba B - \u03b1 para activar la v\u00eda NF - \u03ba B, y regulan la expresi\u00f3n g\u00e9nica corriente abajo. He et al. encontraron que despu\u00e9s de la intervenci\u00f3n con diferentes dosis de saponinas totales de Platycodon grandiflorum, los niveles de IL-6, IL-1 \u03b2, y TNF - \u03b1 en el tejido sinovial de la articulaci\u00f3n del tobillo de ratas con artritis inducida por col\u00e1geno disminuyeron, mientras que los niveles de TLR2, TLR4, MyD88 y otras prote\u00ednas disminuyeron. Shin et al. encontr\u00f3 que ginsen\u00f3sidos tratados con calor Rg1 y Rg3 puede promover la secreci\u00f3n de IL-6 y TNF - \u03b1 en c\u00e9lulas RAW264.7, as\u00ed como la fosforilaci\u00f3n de MAPK y la degradaci\u00f3n de I \u03ba B - \u03b1 para activar el NF - \u03ba B v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n. Los resultados de este experimento mostraron que, bajo la acci\u00f3n del RPFRS, la expresi\u00f3n del ARNm de TLR4 en las c\u00e9lulas RAW 264.7 disminuy\u00f3, mientras que la expresi\u00f3n de ARNm de MyD88 y NF - \u03ba B aument\u00f3; En consonancia con esto, los resultados de WB mostraron una disminuci\u00f3n en la expresi\u00f3n de TLR4, I \u03ba B \u03b1, y citoplasm\u00e1tica NF - \u03ba B prote\u00ednas, mientras que la expresi\u00f3n de TLR2, MyD88, TRIF, y nuclear NF - \u03ba B prote\u00ednas aument\u00f3, lo que indica la translocaci\u00f3n de NF - \u03ba B desde el citoplasma al n\u00facleo. Tras la activaci\u00f3n de la v\u00eda NF - \u03ba B, puede revertir la inducci\u00f3n de la transcripci\u00f3n mediada por citoquinas proinflamatorias, lo que se corresponde con los resultados del contenido de citoquinas y la expresi\u00f3n de ARNm mencionados anteriormente. Esto indica que el RPFRS puede activar las c\u00e9lulas RAW 264.7 a trav\u00e9s de la v\u00eda de transducci\u00f3n TRIF\/MyD88-NF - \u03ba B mediada por TLR2 y TLR4.
\nLos RPFRS pueden promover la proliferaci\u00f3n de las c\u00e9lulas RAW 246.7, mejorar la actividad fagoc\u00edtica, aumentar el contenido y la expresi\u00f3n de ARNm de las citocinas relacionadas, regular a la baja la expresi\u00f3n de ARNm de TLR4, regular al alza la expresi\u00f3n de TLR2, MyD88, TRIF y la prote\u00edna nuclear NF - \u03ba B, regular a la baja la expresi\u00f3n de TLR4, I \u03ba B - \u03b1 y la prote\u00edna citoplasm\u00e1tica NF - \u03ba B, y mostrar un cierto efecto de dosis. RPFRS puede ejercer protecci\u00f3n inmune mediante la inhibici\u00f3n de la estimulaci\u00f3n de TLR4 por LPS, y tambi\u00e9n puede activar las c\u00e9lulas RAW 264.7 a trav\u00e9s de la v\u00eda de se\u00f1alizaci\u00f3n TLR2\/4-MyD88\/TRIF-NF - \u03ba B, participando en el proceso de respuesta inmune y ejerciendo efectos reguladores inmunes. Es necesario seguir investigando la relaci\u00f3n entre el RPFRS y otras v\u00edas de se\u00f1alizaci\u00f3n implicadas en la regulaci\u00f3n inmunitaria de las c\u00e9lulas RAW 264.7, as\u00ed como sus componentes y la actividad inmunitaria.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Study on the immunomodulatory effect of saponins from Panax ginseng and Panax ginseng on RAW 264.7 cells in vitro Macrophages involved in non-specific immunity of the body are the first line of defense against pathogens. Activated macrophages can release various inflammatory factors and cytokines (such as NO and TNF – \u03b1) to participate in the […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n