Determinaci\u00f3n simult\u00e1nea de seis flavonoides en hojas de Wuyao mediante cromatograf\u00eda l\u00edquida de ultra alta resoluci\u00f3n y espectrometr\u00eda de masas en t\u00e1ndem
\nLindera aggregata (Sims) Kosterm, planta perteneciente a la familia del alcanfor y al g\u00e9nero Piper, tiene efectos antiinflamatorios, analg\u00e9sicos, antioxidantes y antitumorales. Se produce principalmente en las provincias costeras del sureste de China, siendo el condado de Tiantai, en la provincia de Zhejiang, el m\u00e1s famoso, de ah\u00ed que reciba el nombre de Tiantai Wuyao. En 2018, fue seleccionado como uno de los nuevos \"Ocho Sabores de Zhejiang\" en Zhejiang. La investigaci\u00f3n farmacol\u00f3gica moderna ha demostrado que la medicina negra tambi\u00e9n tiene efectos inmunomoduladores sobre el sistema nervioso central y el sistema cardiovascular, por lo que sus perspectivas de mercado son amplias. Sin embargo, las partes medicinales del Wuyao crecen lentamente y a menudo tardan entre 8 y 10 a\u00f1os en cumplir los requisitos para el procesamiento de hierbas medicinales de calidad. Durante el ciclo de crecimiento, sus partes de tallo y hoja suelen desecharse, lo que supone un bajo aprovechamiento de los recursos. En las zonas populares de Zhejiang, las hojas de Wuyao se utilizan a menudo para tratar la celulitis aguda, la artritis reumatoide y otras inflamaciones, y tambi\u00e9n se suelen preparar en bebidas de t\u00e9 para reducir los l\u00edpidos, proteger el h\u00edgado y obtener otros beneficios para la salud. Estudios anteriores han demostrado que los extractos de hoja de Wuyao tienen cierto efecto hipolipemiante. El equipo de investigaci\u00f3n realiz\u00f3 un estudio de correlaci\u00f3n farmacol\u00f3gica de los extractos de hoja de Wuyao y descubri\u00f3 que tienen un determinado mecanismo de acci\u00f3n contra la hiperlipidemia y la osteoporosis. Al mismo tiempo, tambi\u00e9n se llev\u00f3 a cabo la separaci\u00f3n sistem\u00e1tica de componentes qu\u00edmicos y la extracci\u00f3n de las hojas de Wuyao en la fase inicial. Se aislaron por primera vez seis flavonoides del extracto etan\u00f3lico de las hojas de Wuyao, que se identificaron como: kaempferol-3-O - \u03b1 - L-ramn\u00f3sido (1), quercetina (2), kaempferol-3-O - \u03b2 - D-xil\u00f3sido (3), kaempferol-3-O - \u03b1 - L-arabinofuran\u00f3sido (4), kaempferol-3-O - (2 \u2033 -3-O-trans-3-O-p-3-O-cumaroil) - \u03b1 - L-ramn\u00f3sido (5), kaempferol-3-O - (2 \u2033, 4 \u2033 -3-O-di-3-O-3-3-3-O-di-3-gluc\u00f3sido) O-trans-3-O-p-3-O-cumaroil) - \u03b1 - L-ramn\u00f3sido (6), estructura qu\u00edmica mostrada en la figura 1.<\/p>\n
En la actualidad, existen informes de investigaci\u00f3n relevantes sobre la evaluaci\u00f3n de la calidad de las hojas de Wuyao. Yi et al. utilizaron HPLC para determinar el contenido de cuatro flavonoides en hojas de Wuyao de diferentes or\u00edgenes en la provincia de Hunan. Sun et al. utilizaron espectrofotometr\u00eda UV para determinar el contenido total de flavonoides en extractos de hojas de Wuyao e investigaron los factores relevantes para la extracci\u00f3n de flavonoides totales, con el fin de optimizar el proceso de extracci\u00f3n. Al mismo tiempo, Sun et al. utilizaron HPLC para determinar el contenido de cuatro lactonas sesquiterpenoides en hojas de Wuyao de diferentes or\u00edgenes. Sin embargo, se trata de m\u00e9todos de detecci\u00f3n tradicionales, que carecen de gran eficacia y precisi\u00f3n en la determinaci\u00f3n del contenido. Con el avance de la tecnolog\u00eda de espectrometr\u00eda de masas, se ha desarrollado la tecnolog\u00eda de espectrometr\u00eda de masas en t\u00e1ndem por cromatograf\u00eda l\u00edquida de ultra alto rendimiento con alta eficiencia, alta especificidad y alta sensibilidad. La espectrometr\u00eda de masas en t\u00e1ndem por cromatograf\u00eda (UPLC-MS\/MS) se ha convertido en un importante m\u00e9todo anal\u00edtico para detectar la calidad de los materiales medicinales tradicionales chinos. Por lo tanto, este estudio utilizar\u00e1 la tecnolog\u00eda UPLC-MS\/MS para estudiar cuantitativamente los seis flavonoides principales en las hojas de Wuyao de diferentes or\u00edgenes, y combinar el peso de entrop\u00eda - \u03b1 - L-m\u00e9todo de clasificaci\u00f3n de soluci\u00f3n ideal aproximada (TOPSIS) para el an\u00e1lisis y la evaluaci\u00f3n, con el fin de proporcionar una base cient\u00edfica para el control de calidad interno de las hojas de Wuyao.<\/p>\n
<\/p>\n
Selecci\u00f3n de las condiciones de extracci\u00f3n. En este estudio, se utiliz\u00f3 el m\u00e9todo UPLC-MS\/MS para determinar simult\u00e1neamente el contenido de seis compuestos indicadores, a saber, kaempferol-3-O - \u03b1 - L-ramn\u00f3sido (1), quercetina (2), kaempferol-3-O - \u03b2 - D-xil\u00f3sido (3), kaempferol-3-O - \u03b1 - L-arabinofuranoside (4), kaempferol-3-O - (2\"- trans - p-coumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnoside (5), y kaempferol-3-O - (2\", 4 \"- di trans - p-coumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnoside (6), en hojas de Wuyao en 10 minutos. Las concentraciones de metanol fueron 30%, 50% y 70%, respectivamente. Bas\u00e1ndose en el an\u00e1lisis del espectro, se seleccion\u00f3 el metanol 70% para obtener el mejor efecto de extracci\u00f3n. Al mismo tiempo, se compararon los m\u00e9todos de extracci\u00f3n por reflujo t\u00e9rmico y por ultrasonidos. Seg\u00fan los resultados de contenido, las tasas de extracci\u00f3n obtenidas eran comparables. Teniendo en cuenta el tiempo y los costes de los consumibles, se opt\u00f3 por la extracci\u00f3n por ultrasonidos.
\nCondiciones de cromatograf\u00eda de espectrometr\u00eda de masas. En este estudio se investigaron tres sistemas de fase m\u00f3vil: agua acetonitrilo, agua acetonitrilo-0,1% \u00e1cido f\u00f3rmico y agua acetonitrilo-0,1% formiato am\u00f3nico. El \u00e1rea del pico y la forma del pico de seis flavonoides se utilizaron como indicadores de evaluaci\u00f3n para determinar el sistema de fase m\u00f3vil apropiado. Se encontr\u00f3 que cuando se seleccion\u00f3 agua acetonitrilo como fase m\u00f3vil, hubo un fen\u00f3meno de cola en los compuestos de kaempferol-3-O - (2 \"- trans-pcoumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnoside y kaempferol-3-O - (2\", 4 \"- di-trans-pcoumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnoside; Cuando acetonitrilo 0..1% agua de formiato de amonio como fase m\u00f3vil, la quercetina 3-O - \u03b1 - L-arabinofuranosido muestra una ligera cola; Cuando se eligi\u00f3 acetonitrilo 0,1% agua de \u00e1cido f\u00f3rmico como fase m\u00f3vil, las formas de los picos de los seis compuestos fueron relativamente sim\u00e9tricas. Por lo tanto, se eligi\u00f3 acetonitrilo 0,1% \u00e1cido f\u00f3rmico agua como sistema de fase m\u00f3vil. En la selecci\u00f3n de las condiciones de espectrometr\u00eda de masas, el estudio utiliz\u00f3 los modos de iones positivos y negativos para determinar el contenido de seis compuestos diana. Con el fin de garantizar que los compuestos objetivo tengan una mayor estabilidad, valores de respuesta m\u00e1s altos y mejores formas de pico, m\u00faltiples experimentos repetidos han demostrado que el uso del modo de barrido de iones negativos para la detecci\u00f3n puede hacer que los seis compuestos flavonoides sean m\u00e1s estables, con mejores formas de pico y valores de respuesta en las condiciones de detecci\u00f3n. Al mismo tiempo, durante la investigaci\u00f3n de las condiciones de cromatograf\u00eda-espectrometr\u00eda de masas, los tiempos de retenci\u00f3n de los flavonoides 2 y 5 extra\u00eddos del cromatograma i\u00f3nico de la figura 2 eran b\u00e1sicamente los mismos. En comparaci\u00f3n con las t\u00e9cnicas tradicionales de an\u00e1lisis HPLC, la cromatograf\u00eda-espectrometr\u00eda de masas basada en el an\u00e1lisis de relaci\u00f3n masa-carga no depende de la separaci\u00f3n pico a pico, y tiene un tiempo de recogida de se\u00f1al corto y una alta sensibilidad. Por lo tanto, en este estudio, se utiliz\u00f3 la tecnolog\u00eda de an\u00e1lisis UPLC-MS\/MS para determinar simult\u00e1neamente seis flavonoides en las hojas de Wuyao, que tiene m\u00e1s ventajas.
\nAn\u00e1lisis de resultados. En este estudio se recogieron muestras medicinales de 10 zonas de producci\u00f3n de Wuyao en China y se utiliz\u00f3 la tecnolog\u00eda UPLC-MS\/MS para determinar simult\u00e1neamente el contenido de seis componentes qu\u00edmicos en las hojas de Wuyao. Se utiliz\u00f3 el m\u00e9todo TOPSIS de peso de entrop\u00eda para analizar y evaluar exhaustivamente los seis compuestos de las 10 zonas de producci\u00f3n. La clasificaci\u00f3n exhaustiva fue la siguiente: Tiantai, Zhejiang>Jinhua, Zhejiang>Changsha, Hunan>Ningde, Fujian>Kunming, Yunnan>Tonglu, Zhejiang>Guilin, Guangxi>Yingtan, Jiangxi. Los resultados mostraron que la calidad integral de las hojas de Wuyao en Tiantai, Zhejiang, era relativamente alta, lo que est\u00e1 relacionado con la creencia tradicional de que Tiantai, Zhejiang, es una aut\u00e9ntica zona de producci\u00f3n de material medicinal de Wuyao. Al mismo tiempo, tambi\u00e9n confirma el registro del Compendio de Materia M\u00e9dica de que para el Wuyao, Tiantai es la ganadora; el Diccionario de Medicina Tradicional China registra que la producci\u00f3n de Wuyao es la mayor de Zhejiang, y la calidad de los productos producidos en Tiantai, Zhejiang es la mejor, de ah\u00ed que se le llame \"Tiantai Wuyao\" o \"Tai Wuyao\". Al mismo tiempo, los resultados de la evaluaci\u00f3n tambi\u00e9n reflejan que hay diferencias significativas en el contenido de seis flavonoides principales en las hojas de Wuyao de distintos or\u00edgenes, y tambi\u00e9n hay diferencias significativas en las hojas de Wuyao de distintas ciudades de la misma provincia. Esto puede estar relacionado con las fuentes de introducci\u00f3n de Wuyao en diferentes bases de plantaci\u00f3n y diferentes entornos ecol\u00f3gicos.
\nEn la actualidad, la Wuyao Ye ha sido aprobada como nuevo alimento de recurso, por lo que se seguir\u00e1 explorando el desarrollo de su producto. Este estudio ha establecido un m\u00e9todo que es f\u00e1cil de operar, tiene buena precisi\u00f3n, estabilidad y repetibilidad, y puede determinar simult\u00e1neamente el contenido de seis flavonoides en Wuyao Ye. Puede utilizarse para el an\u00e1lisis cuantitativo y la evaluaci\u00f3n exhaustiva de los principales flavonoides en Wuyao Ye, y el m\u00e9todo TOPSIS de peso de entrop\u00eda utilizado tambi\u00e9n proporciona una base te\u00f3rica para evaluar la calidad de otras hierbas medicinales con valor medicinal.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Simultaneous determination of six flavonoids in Wuyao leaves by ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry Lindera aggregata (Sims) Kosterm, a plant belonging to the Camphor family and the Piper genus, has anti-inflammatory, analgesic, antioxidant, and anti-tumor effects. It is mainly produced in southeastern coastal provinces of China, with Tiantai County in Zhejiang Province being […]<\/p>\n","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n