Establecimiento del espectro de huellas dactilares UPLC y determinación de componentes indicadores para la hierba medicinal Verbena officinalis
La Verbena officinalis L., planta de la familia de las Verbenáceas, es la parte aérea seca de la planta. Tiene los efectos de favorecer la circulación sanguínea, dispersar la estasis sanguínea, desintoxicar, diuresis, reducir el amarilleamiento e interceptar la malaria. Los estudios de composición química han demostrado que la verbena contiene aceites volátiles, iridoides, fenilpropanoides, flavonoides y otros componentes, que tienen diversas actividades farmacológicas como antiinflamatorio, antioxidante, analgésico, alivio de la tos y el asma, anti isquemia miocárdica y anti isquemia cerebral. La edición de 2020 de la Farmacopea de la República Popular China, Primera Parte, utiliza el ácido oleanólico y el ácido ursólico como indicadores de contenido para la hierba medicinal de verbena, pero su especificidad no es fuerte. Además, en la medicina tradicional china se utilizan decocciones tradicionales, y los componentes lipofílicos como el ácido oleanólico y el ácido ursólico se utilizan como indicadores de contenido. Merece la pena debatir si esto ayuda al control de calidad de las hierbas medicinales. Hay informes en la literatura que al medir el alto contenido de glucósidos terpenoides de éter ciclohexeno, como el verbascósido y el verbascósido, así como el glucósido fenilpropanoide, verbascósido, en el verbascósido, tiene cierta especificidad y significado positivo para asegurar la eficacia clínica del verbascósido. Los indicadores de contenido mencionados se han utilizado en la investigación de control de calidad de la decocción estándar de verbascósido y los gránulos de fórmula. También se han utilizado espectros de huellas dactilares para el control de calidad del verbascósido, pero la identificación de los componentes químicos se centra principalmente en el verbascósido, el verbascósido y el verbascósido. No existen informes sobre el estudio de otros componentes hidrosolubles. En este estudio, el establecimiento de un espectro de huellas dactilares de la hierba verbena combinado con la identificación por espectrometría de masas de alta resolución, así como el establecimiento de métodos de determinación del contenido de cuatro ingredientes activos, a saber, verbascósido, verbascósido, verbascósido e isoverbascósido, se utilizaron para proporcionar una referencia para el control de calidad general de la hierba verbena.

Selección de indicadores de contenido. Según los informes de la bibliografía y nuestras investigaciones anteriores, el verbascósido puede convertirse en isoverbascósido en determinadas condiciones. Tanto el verbascósido como el isoverbascósido tienen efectos antioxidantes, antihemolíticos, antiangiotensinasa, reductores de la presión arterial y potenciadores de la función inmunitaria. Esto indica que el verbascósido y el isoverbascósido son de gran importancia para el control de calidad y la evaluación de la verbena. Por lo tanto, basándose en la investigación existente, nuestra empresa aumentará la determinación de isoverbascósido, con el fin de proporcionar una referencia para el control de calidad de las preparaciones de hierbas chinas que contienen verbena. Los estudios de composición química han demostrado que tanto el verbascósido como el verbascósido son glucósidos iridoides. El verbascósido, también conocido como 5-hidroxiverbascósido, tiene un grupo hidroxilo adicional en la posición 5 del carbono en comparación con el verbascósido. Las estructuras químicas de los dos componentes son similares, y sus curvas de absorción en los espectros UV visible 3D son básicamente las mismas. Por lo tanto, se recomienda combinar los dos componentes para su detección y calcular la cantidad total de los dos componentes. En este estudio, se establecieron cuatro métodos para determinar el contenido de ingredientes activos. El método de preparación de la solución de prueba era coherente con el espectro de huellas dactilares, pero las condiciones cromatográficas se establecieron por separado y no eran coherentes con el espectro de huellas dactilares. Las principales consideraciones fueron el grado de separación, la pureza y la reproducibilidad del método de los componentes indicadores. Los resultados de la determinación del contenido mostraron que había ciertas diferencias en el contenido de verbascósido, verbascósido, verbascósido e isoverbascósido en las distintas zonas de producción de la hierba verbena. Incluso dentro de la misma zona de producción, también había diferencias en el contenido de los distintos lotes de hierbas, que estaban relacionadas principalmente con las diferencias en el momento de la cosecha, los métodos de procesamiento, los métodos de almacenamiento y el tiempo de almacenamiento de las hierbas. Además, nuestra empresa descubrió en nuestra investigación que existen diferencias significativas en el contenido de verbascósido, verbascósido, verbascósido e isoverbascósido en las diferentes partes medicinales de la misma hierba verbena. Entre ellas, el contenido de verbascósido, verbascósido, verbascósido e isoverbascósido en las flores y las hojas es significativamente mayor que en los tallos. Por lo tanto, controlar estrictamente el tiempo de recolección de las hierbas medicinales y asegurar la proporción de flores y hojas en las hierbas es de gran importancia para el control de calidad de las hierbas medicinales de verbena.
Investigación sobre los espectros de huellas dactilares. Se utilizó el método UPLC para establecer el espectro de huella dactilar de Herba Verbena. Se investigaron sistemáticamente las condiciones cromatográficas del espectro de huella dactilar y el método de preparación de la solución de prueba. Los resultados del cálculo de similitud mostraron que la similitud de los espectros de huellas dactilares de 15 lotes de materiales medicinales era superior a 0,9, y la similitud global era alta, lo que puede utilizarse para la identificación y el control de calidad de la Herba Verbena. Mediante el uso de espectrometría de masas de alta resolución para identificar picos comunes, se identificaron tres tipos de ingredientes activos, a saber, glucósidos iridoides, glucósidos fenilpropanoides y flavonoides. Por primera vez, se utilizaron espectros de huellas dactilares para caracterizar los tres tipos de ingredientes activos de la verbena, y por primera vez, se identificaron el isoverbascósido, el 7-diglucósido de luteolina y el 7-O-glucurónido de apigenina a partir del espectro de huellas dactilares de la verbena, reflejando mejor la integridad y las características generales de la verbena. Utilizando el área relativa de los picos comunes como variables, tanto el análisis de conglomerados como el análisis de componentes principales clasificaron los 15 lotes de materiales medicinales en tres categorías. Entre ellos, los materiales medicinales de Henan, Jiangsu y Guizhou tenían proporciones de composición química similares. OPLS-DA encontró siete picos cromatográficos con diferencias significativas en las proporciones de los picos, a saber, los picos 2, 6, 16, 10, 11, 5 y 9. Estas diferencias pueden estar relacionadas con las diferencias en la composición química de los materiales medicinales. Estas diferencias pueden estar relacionadas con las diferencias en el tiempo de recolección y los métodos de procesamiento de los materiales medicinales.
En resumen, este método puede analizar eficazmente las diferencias de calidad de las hierbas medicinales chinas de diferentes orígenes, proporcionando una referencia para la evaluación de la calidad de las hierbas medicinales chinas de diferentes orígenes.