Estudio sobre la relación espectro-efecto del contenido total de polifenoles y antraquinonas en el ruibarbo y su actividad antioxidante in vitro
En 1956, Harman propuso la teoría del envejecimiento por radicales libres, según la cual las reacciones oxidativas son la causa principal de la inducción del envejecimiento biológico y de diversas enfermedades. Los radicales libres se generan principalmente por la fuga de electrones de las cadenas respiratorias mitocondriales o catalizados por reacciones enzimáticas, incluidos los radicales libres de oxígeno y otros radicales libres. Algunas sustancias activas pueden actuar directa o indirectamente sobre los radicales libres para revertir sus ataques oxidativos a las células del organismo. En la actualidad, antioxidantes sintéticos como el butilhidroxianisol, el dibutilhidroximetiléter y el galato de propilo presentan cierta citotoxicidad. Por lo tanto, la búsqueda de antioxidantes eficaces y de baja toxicidad a partir de alimentos, especias y productos naturales también ha atraído mucha atención. El método DPPH y el método ABTS pueden utilizarse para la determinación de muestras grandes y la determinación de la capacidad antioxidante de sustancias hidrófilas y lipofílicas. Por lo tanto, es necesario buscar antioxidantes eficaces y de baja toxicidad a partir de productos naturales. El ruibarbo es una hierba medicinal tradicional china, originaria de la planta Polygonaceae Rheum palmatum L. y Rheum tanguticum Maxim Las raíces y rizomas secos de ex Balf. o medicinal Rheum officinale Baill. contienen principalmente derivados antraquinónicos libres y unidos, taninos, glucósidos estilbénicos, polifenoles y otros componentes, que tienen efectos farmacológicos como diarreico, antibacteriano, hemostático y antioxidante. Estudios anteriores han demostrado que la emodina -8-O - β - D-glucósido y los glucósidos antraquinónicos totales se correlacionan positivamente con la actividad antioxidante in vitro. Ocho componentes, entre ellos el ácido gálico, las catequinas o epicatequinas y la glucosa 2-O-cinamoil-galloil, tienen una gran capacidad de eliminación de los radicales libres ABTS.
El método tradicional de cribado de compuestos activos suele implicar la separación, purificación, etc., lo que sin duda aumenta la intensidad del trabajo y resulta costoso y lento. En la actualidad, la relación espectral-efecto se ha utilizado ampliamente en el cribado de principios activos de la medicina tradicional china. Se refiere al establecimiento de espectros de huellas dactilares y experimentos farmacológicos, utilizando software matemático y tecnología informática para vincular "espectros" y "efectos". Este método está en consonancia con el sistema teórico de la medicina tradicional china y compensa las deficiencias de los espectros de huellas dactilares químicas en el control de la calidad de la medicina tradicional china. La correlación entre las características de calidad y cantidad de los espectros de huellas dactilares de la medicina tradicional china y los resultados de la investigación de la actividad biológica de los materiales medicinales chinos puede utilizarse para establecer una expresión matemática para evaluar la calidad de los materiales medicinales chinos. Por lo tanto, este estudio estableció un "espectro" utilizando el método HPLC, y estableció un "efecto" antioxidante in vitro utilizando el método DPPH y el método ABTS. Se determinó el contenido total de polifenoles y el contenido total de antraquinonas de 20 lotes de ruibarbo para investigar la relación entre la composición química del ruibarbo y su actividad antioxidante in vitro, a fin de obtener el grupo de principios activos antioxidantes potenciales del ruibarbo.

El contenido total de antraquinonas de 20 lotes de trozos de decocción de ruibarbo es de 1,06 ± 0,08~4,82 ± 0,12 mg/g, y el contenido total de polifenoles es de 4,92 ± 0,21~10,12 ± 0,11 mg/g. Los 20 lotes de rodajas de ruibarbo pueden dividirse en cuatro categorías, a saber, el condado de Longxi y el condado de Lintao, el condado de Dangchang y el condado de Li, el condado de Min y el condado de Zhang, y el condado de Weiyuan. Los picos 7 (aloe emodin 8-O-glucoside), 1, 10 (rhein), 2, y 9 (aloe emodin) tienen la actividad de eliminar los radicales libres DPPH, mientras que los picos 7, 2, 9, 10, 3, 8, 12 (emodin), y 14 (emodin methyl ether) tienen la actividad de eliminar los radicales libres ABTS. Esto concuerda con los cambios en el área de los picos de la cromatografía antioxidante in vitro, lo que indica que el efecto antioxidante del ruibarbo es el resultado de la acción combinada de múltiples componentes. El pico 10 (reína) mostró una correlación positiva con la eliminación de radicales libres ABTS, mientras que el pico 7 (aloe emodina 8-O-glucósido) mostró una correlación negativa. Esto puede deberse al hecho de que el pico compartido 10 (rhein) puede formar un gran sistema completo π - conjugado. En solución de etanol, los complejos de reína pueden ser inestables y propensos a formar radicales libres intermedios, lo que resulta en una alta tasa de inhibición y una correlación positiva. El pico 7 (aloe emodina 8-O-glucósido) es relativamente estable en solución de etanol y es menos probable que forme radicales libres intermediarios, lo que resulta en una tasa de inhibición más baja y una correlación negativa. Existe una correlación negativa entre los picos 2 y 11 en cuanto a la actividad de barrido de radicales libres ABTS. Es muy probable que estos dos compuestos no contengan o contengan menos grupos hidroxilo que proporcionen hidrógeno activo. La actividad de barrido de radicales libres ABTS depende de la estructura de la molécula del compuesto, y el número y la posición de los grupos hidroxilo fenólicos son los principales factores que afectan a su actividad antioxidante. Cuanto mayor sea el número de hidróxilos activos, mayor será su capacidad antioxidante. Por lo tanto, este proyecto mejorará aún más la identificación y caracterización de los picos comunes desconocidos mencionados anteriormente, con el fin de aclarar aún más la base farmacológica del efecto antioxidante fuera del cuerpo lúteo.
Este experimento tiene en cuenta la inestabilidad de los componentes polifenólicos y opta por la extracción ultrasónica para evitar la pérdida de componentes en condiciones de alta temperatura. Comparando los componentes con cambios significativos en el área del pico cromatográfico, se llevó a cabo la posterior verificación antioxidante preparando la separación en fase líquida de los monómeros. Se utilizaron técnicas de LC-MS y resonancia magnética nuclear para identificar los productos separados y aclarar los componentes individuales que desempeñan un papel, lo que también constituye una dirección para futuras investigaciones. La correlación entre las características de calidad y cantidad de los espectros de huellas dactilares de la medicina tradicional china y los resultados de la investigación de la actividad biológica de los materiales medicinales puede utilizarse para establecer una expresión matemática para evaluar la calidad de la medicina tradicional china. Sobre la base del establecimiento de un mapa de huellas dactilares del ruibarbo y la determinación de la calidad y cantidad del contenido total de antraquinonas y polifenoles en los trozos de decocción de ruibarbo, este artículo establece además la relación espectro-efecto de la actividad antioxidante fuera del cuerpo lúteo, aclara los grupos efectivos del ruibarbo para eliminar los radicales libres DPPH y ABTS, e identifica los componentes del ruibarbo que ejercen efectos antioxidantes, como el ácido gálico, la emodina y el éter metílico de emodina. Esto proporciona una base teórica para el cribado y la distinción de los ingredientes activos de sustancias antioxidantes de ruibarbo de diferentes regiones de ruibarbo.