Evaluación de la calidad de las flores de loto de diferentes orígenes basada en el espectro de huellas dactilares combinado con el método de reconocimiento de patrones químicos
El loto dormilón es una planta herbácea acuática perenne de la familia Nymphaeaceae, originaria de Ili, Altay, Bohu y otras zonas de Xinjiang. Los botones florales secos del loto dormilón, como hierba medicinal de uso común en la medicina uigur, se han incluido en el Volumen de Medicina Uigur de las Normas sobre Medicamentos del Ministerio de Sanidad de la República Popular China. Tienen los efectos de reducir la fiebre, aliviar la tos, eliminar el calor y desintoxicar, calmar la mente, y pueden utilizarse para tratar dolores de cabeza, tos inducida por la fiebre, golpes de viento agudos y crónicos en niños causados por la fiebre. El loto dormilón contiene principalmente flavonoides y compuestos fenólicos. Los estudios farmacológicos modernos han demostrado que tiene diversas actividades biológicas, como antioxidante, antiinflamatoria, hipoglucemiante, antiviral, etc. Con el fin de controlar mejor la calidad intrínseca de la hierba medicinal china, este estudio pretende utilizar el espectro de huellas dactilares combinado con el método de reconocimiento de patrones químicos para llevar a cabo la determinación del contenido multicomponente, analizar exhaustivamente las diferencias en la composición de las hierbas medicinales chinas en las distintas zonas de producción, aclarar las diferencias en las zonas de producción y los componentes característicos, proporcionar una referencia para la identificación y la formulación de normas de calidad de las hierbas medicinales chinas, y sentar las bases para un mayor desarrollo y utilización.

Selección del disolvente de extracción. Hay muchos componentes químicos y diferentes propiedades en la hierba medicinal del Loto Durmiente. Para reflejar mejor la información de los componentes químicos contenidos en la hierba medicinal en el cromatograma, en este artículo se consultó un gran número de bibliografía y se seleccionaron el metanol, el metanol 50% y el etanol como disolventes de extracción en este experimento. Al utilizar metanol 50% y etanol como disolventes de extracción, debido al análisis de los espectros de huella de 15 lotes de Loto Durmiente, se encontró que había 23 picos comunes a una longitud de onda de 273nm. El pico 1 presentaba una buena separación del ácido gálico y una gran área de pico, por lo que se utilizó como pico de referencia. Hay 17 picos comunes a 350 nm, entre los que se han identificado 4 componentes, a saber, ácido tánico, glucósido de fuegos artificiales, glucósido de nube púrpura y quercetina. Mientras tanto, se evaluó la similitud de los espectros de huellas dactilares de 15 lotes de muestras, y los resultados mostraron una buena similitud con los espectros de huellas dactilares de control. El reducido número de picos conduce a una extracción incompleta. Mediante un análisis exhaustivo de diversos factores, se determinó el método de extracción óptimo utilizando metanol como disolvente.

Selección de la longitud de onda de detección. En este estudio se utilizó un detector de matriz de diodos para realizar un barrido de longitud de onda completa (190-800 nm) en el espectro de la huella dactilar de la flor de loto. Basándose en el espectro 3D presentado, se puede observar que la separación cromatográfica de los picos es alta, la simetría de los picos es buena, la línea de base es estable y la capacidad de los picos es grande bajo las condiciones de longitud de onda de 273nm y 350nm. El espectro obtenido de la solución de prueba puede mostrar información más rica. Por lo tanto, se seleccionaron 273nm y 350nm como las longitudes de onda de medición.

Selección de las condiciones cromatográficas. Se investigó la influencia del metanol y el acetonitrilo como fases móviles en el espectro de huellas dactilares de flores de loto. Cuando se utilizan metanol y acetonitrilo como fases móviles para el análisis isocrático, la eficacia de la separación es deficiente. Para lograr una mejor separación de cada pico cromatográfico, se opta por la elución en gradiente. En comparación con el metanol acetonitrilo como fase móvil, se pueden obtener más picos cromatográficos en el cromatograma de huellas dactilares. Al comparar los cromatogramas obtenidos con dos fases móviles diferentes, se comprobó que el rendimiento de separación utilizando acetonitrilo era mejor que el del metanol. Por lo tanto, se eligió el acetonitrilo como fase móvil para este estudio.
Evaluación de los métodos analíticos. Analizando los espectros de huella de 15 lotes de flores de loto dormidas, se descubrió que había 23 picos comunes a una longitud de onda de 273 nm. El pico 1 presentaba una buena separación del ácido gálico y una gran área de pico, por lo que se utilizó como pico de referencia. Hay 17 picos comunes a 350 nm, entre los que se han identificado 4 componentes, a saber, ácido tánico, glucósido de fuegos artificiales, glucósido de nube púrpura y quercetina. Mientras tanto, se evaluó la similitud de los espectros de huellas dactilares de 15 lotes de muestras, y los resultados mostraron una buena similitud con los espectros de huellas dactilares de control. La combinación de huella dactilar HPLC y análisis de conglomerados, PCA, OPLS-DA puede utilizarse para el análisis de conglomerados y discriminación de componentes de materiales medicinales de diferentes orígenes y lotes. En este estudio se utilizaron métodos de reconocimiento de patrones químicos para realizar análisis de conglomerados, PCA y patrones de clasificación OPLS-DA en la hierba medicinal de Nelumbo nucifera. Los resultados de los análisis de los tres métodos fueron coherentes. Quince lotes de Nelumbo nucifera se dividieron en cuatro categorías a 273nm, con diferencias reflejadas principalmente en los picos 17, 1, 4, 15, 20, 23, 3, 6, 2, y 21. Entre ellos, el pico 1 era gálico y el pico 2 era gálico. Entre ellos, el pico 1 era ácido gálico, el pico 15 era puerarina y el pico 20 era quercetina. A 350 nm, se divide en tres categorías, con diferencias reflejadas principalmente en el cribado de los picos 14, 1, 13, 7, 8, 11, 10 y 2. Entre ellos, el pico 14 es la quercetina. Entre ellos, el pico 14 es quercetina, el pico 7 es glucósido de fuegos artificiales y el pico 8 es glucósido de nube púrpura. Estos componentes pueden servir como los principales componentes característicos para distinguir e identificar la calidad de los materiales medicinales de loto de diferentes áreas de producción. Nuestro grupo de investigación continuará realizando estudios en profundidad sobre componentes diferenciales desconocidos con el fin de proporcionar una referencia más completa para evaluar la calidad de los materiales medicinales de loto.