Identificación de Ficus microcarpa y sus especies relacionadas basada en la secuencia ITS2 y la huella dactilar HPLC
El Ficus pandurata Hance, también conocido como árbol de la leche o semilla de leche, es una planta del género Ficus de la familia Moraceae. Se distribuye principalmente en Guangdong, Guangxi, Jiangxi, Hainan, Fujian, Hunan, Hubei, Jiangxi, Anhui, Zhejiang y otros lugares. Según el "Diccionario de Medicina Tradicional China", "Registros Medicinales de Fujian" y "Pruebas de Fórmulas Herbales Populares de Jiangxi", las partes de la raíz y las hojas del Ficus microcarpa se utilizan como medicina. Tiene una naturaleza suave, un sabor dulce y ligeramente frío, y no es tóxico. Tiene los efectos de eliminar el calor, vigorizar el bazo, estimular el apetito, nutrir el qi y generar fluidos, y disipar la humedad y el estancamiento. Se utiliza para disipar el viento y la humedad, desintoxicar, tratar la malaria y favorecer la lactancia. Por ejemplo, el "Jiangxi Folk Herbal Formula Testing" registra que cantidades moderadas de raíces de Ficus microcarpa y Malan pueden utilizarse para tratar la ictericia cuando se toman oralmente en una decocción de agua clara; una cantidad apropiada de raíz de banyan, raíz de Brahma, Stephania tetrandra, raíz de Acanthopanax senticosus y tallo de ajenjo puede utilizarse para tratar el dolor de la columna lumbar con la mezcla de Baijiu y agua del mismo volumen. En Guangdong, Ficus microcarpa tiene una larga historia de alimentación y medicina, y una profunda base de masas, que se ha convertido en una parte importante de la dieta tónica característica local y en materia prima de la medicina dietética. La investigación moderna ha demostrado que el Ficus microcarpa contiene ingredientes activos como triterpenoides, flavonoides, cumarinas y ácidos fenólicos. Entre ellos, la lactona de bergamota tiene diversas actividades farmacológicas como antitumoral, regulación del azúcar en sangre, mejora del insomnio, prevención y tratamiento de la osteoporosis, efectos antienvejecimiento, antiinflamatorios y antialérgicos; el psoraleno tiene efectos farmacológicos como antiosteoporosis, neuroprotección, antitumoral, similar al estrógeno, antiinflamatorio, etc. Ambos tienen efectos antiosteoporosis, son abundantes y fácilmente disponibles, y son ingredientes activos representativos del Ficus microcarpa.
En la actualidad, existen tres tipos principales de productos mezclados de hierbas medicinales Ficus microcarpa en el mercado: Ficus microcarpa var. holophylla, Ficus microcarpa var. angustifolia y Ficus microcarpa var. hirta. Quanyuan Qinye Ficus y Tiaoye Ficus son variantes de Qinye Ficus, con formas de hoja de transición entre las tres; además, tanto Ficus microcarpa como Ficus microcarpa utilizan sus raíces como medicina y tienen un aroma lechoso. A menudo se venden en el mercado con el nombre comercial de raíces de árbol de la leche, lo que da lugar a una calidad desigual de los materiales medicinales. En la actualidad, la investigación moderna sobre Ficus microcarpa se centra principalmente en la farmacognosia, la composición química y la actividad farmacológica, y no existen informes sobre las normas de calidad de Ficus microcarpa. La identificación por código de barras de ADN es un método de identificación de biología molecular que utiliza una secuencia de ADN estándar y relativamente corta para la identificación de especies. Este método es de gran importancia para promover el desarrollo y la utilización de nuevos recursos de medicina china, aliviar la escasez de talentos en identificación de medicina china, gestionar la circulación de los mercados de medicina china y abordar los problemas ocultos de las semillas que la morfología es difícil de superar. La huella digital HPLC es un método fiable para identificar la autenticidad, evaluar la consistencia de la calidad y la estabilidad de los componentes químicos de la medicina tradicional china obtenidos mediante técnicas cromatográficas basadas en la comprensión de la acción global de los grupos de sustancias. En este experimento, se utilizaron secuencias ITS2 para la identificación molecular de Ficus microcarpa y sus especies relacionadas. Se establecieron espectros de huellas dactilares por HPLC para determinar las diferencias en el contenido de psoraleno y lactona de bergamota, y para identificar Ficus microcarpa y sus especies afines de diferentes orígenes. Esto proporciona una base científica para el control de calidad y la evaluación de los materiales medicinales de Ficus microcarpa.

El experimento analizó la secuencia ITS2, la distancia genética K2P, el análisis de agrupación de árboles NJ y la estructura secundaria de Ficus microcarpa y sus especies afines. Tanto el análisis de agrupación de árboles NJ como la estructura secundaria pueden distinguir eficazmente Ficus microcarpa y sus especies relacionadas. Sin embargo, la distancia genética dentro y entre las especies K2P tiene ciertas limitaciones en la identificación de Ficus microcarpa y sus especies relacionadas, y requiere la combinación del análisis de agrupación de árboles NJ y la estructura secundaria para la identificación.

El experimento investigó condiciones cromatográficas tales como diferentes disolventes de extracción, longitudes de onda de detección, temperaturas de columna, sistemas de fase móvil y columnas cromatográficas. Los resultados mostraron que el uso de extracción de etanol 95%, XBridge péptido BEH C18 (5 μ m, 4,6 mm × 250 mm) columna cromatográfica, longitud de onda de detección 330 nm, temperatura de la columna 30 ℃, velocidad de flujo 1,0 mL/min, y la fase móvil metanol-pH8 solución tampón fosfato, las formas de pico y el grado de separación de cada espectro de color eran buenas. Hemos establecido los espectros de huella dactilar de HPLC de Ficus microcarpa y sus especies relacionadas, llenando el vacío en el estudio de los espectros característicos de HPLC de Ficus microcarpa. Los espectros de huellas dactilares de Ficus microcarpa y sus especies relacionadas muestran diferencias significativas en el número de picos característicos y el tiempo de retención relativo, que pueden distinguir intuitivamente Ficus microcarpa de sus especies relacionadas y aplicarse a la evaluación de la calidad de Ficus microcarpa. Hay un total de 10 picos cromatográficos en Ficus microcarpa de diferentes orígenes, la mayoría de los cuales no se detectaron en Ficus microcarpa y Ficus microcarpa. La similitud entre especies estrechamente relacionadas y Ficus microcarpa es inferior a 0,807; Existe una diferencia significativa en el contenido de psoraleno y lactona de bergamota entre Ficus microcarpa y sus especies relacionadas. El contenido de Ficus microcarpa y Ficus microcarpa es significativamente inferior al de Ficus microcarpa, lo que indica una diferencia de calidad entre Ficus microcarpa y sus especies emparentadas. Tiene un importante valor de orientación práctica para utilizar el contenido de psoraleno y lactona de bergamota como indicadores de control de calidad de Ficus microcarpa. Por lo tanto, los espectros de huellas dactilares, la similitud y la determinación del contenido pueden distinguir de forma objetiva y precisa la autenticidad de los materiales medicinales de Ficus microcarpa, que pueden utilizarse eficazmente para el control de calidad y la identificación de la autenticidad de los materiales medicinales de Ficus microcarpa.

En resumen, se ha establecido el código de barras de ADN y la huella dactilar por HPLC de Ficus microcarpa y sus especies afines. El método es sencillo, fiable, estable y tiene una buena repetibilidad, por lo que puede utilizarse para la investigación de huellas dactilares y la identificación de la autenticidad de Ficus microcarpa y sus especies afines. Al mismo tiempo, proporciona una base científica para seguir mejorando la calidad de Ficus microcarpa.
En la red PPI, se seleccionaron 42 dianas importantes basadas en la clasificación por grados, que se dividieron principalmente en 5 categorías: proteínas tirosina fosfatasas (PTPN1, PTPN2, PTPN6, PTPN11, etc.), fosfatidilinositol 3 quinasas (PIK3R1, PIK3CB, PIK3CA, etc.), proteínas quinasas activadas por mitógenos (MAPK1, MAPK3, MAPK8, MAPK14, etc.), quinasas dependientes de ciclinas (CDK1, CDK2, CDK4, etc.) y otras dianas importantes (VEGFA, HSP90AA1, LCK, etc.). Estas dianas importantes pueden servir de referencia para la terapia dirigida de la CU.